色谱无法连接上仪

色谱柱连接需要的完整解决方案 实验室内经常出现以下这些情况，如：毛细柱需要连接预柱、毛细柱断裂需要维修，特殊样品需要两支毛细柱串联或者并联等等，还有就是需要将两支毛细柱连接起来的情况。 RESTEK提供最完备的解决方案： 选择一：PressFit两通 优点：1 匹配色谱柱内径，可以确保密封性和减少死体积。2 有明显的颜色点标示，可以准确的判断适合什么ID尺寸的毛细柱。3 可以实现不同内径尺寸的毛细柱的连接。 如下是适合不同内径的毛细柱对应的两通上的颜色点： Red: 0.18/0.25 mm ID (0.34 to 0.38 mm OD)Black: 0.32 mm ID (0.41 to 0.48 mm OD)Blue: 0.53 mm ID (0.61 to 0.70 mm OD) 选择二：SilTite-Union两通 优点：1 全金属材质，耐用。适用于石英毛细柱的连接。2 手拧密封。3 完全的零死体积设计。4 侧切口设计，完全杜绝刃环卡在两通内取不出来的现象。5 不同内径的毛细柱要选择对应尺寸的两通。 选择三： MXT两通 优点：专为毛细MXT柱子的连接设计的。零死体积设计Siltek惰性处理，对极性化合物没有任何吸附。

左右滑动查看更多 ✦ &bull ✦ 同样以“分离”为目的，还有Biozen系列反相色谱柱，助力新型HER2靶向ADC药物质控，为乳腺癌带来希望✦ &bull ✦ 2023年2月24日，中国国家药品监督管理局官网最新公示，注射用德曲妥珠单抗已正式在中国获批上市。这款药物由阿斯利康和第一三共联合开发，科研代号DS-8201。截至目前，德曲妥珠单抗已在全球至少获批5项肿瘤适应证，包括两种乳腺癌。DS-8201由抗HER2人源化单克隆抗体与载药拓扑异构酶Ⅰ抑制剂DXd（payload）通过可裂解连接子（linker）组成，其DAR值达理论最大值8，具有避免耐药、特异性强、高细胞毒性和安全性良好的特点。对于ADC这类药物来说，DAR的测定是非常重要的关键质量属性。今天我们将为大家展示Biozen这种生物惰性的反相柱在这个重要检项上的应用案例。小分子毒素抗体比DAR（drug-to-antibody ratio）是ADC药物独特的重要质量属性，它代表抗体偶联小分子毒性药物的平均数量。DAR值分析常见的模式为HIC，该模式下根据分子疏水性逐渐增加的顺序洗脱。荷载小分子药物最多的分子由于疏水性最强最后洗脱，分离过程类似于反相色谱。但是随着ADC药物的payload不断发展，近期科研工作者发现对于偶联较强亲水性payload的ADC药物而言，不同荷载分子之间的疏水性差异不是特别明显，HIC模式下无法很好的分离不同载药数量的ADC分子。此时反相色谱就成为一种适合的替代方案，该方法特别适合基于半胱氨酸偶联的ADC。通过对ADC药物进行还原，使抗体还原为轻链和重链，含不同数量小分子载药数的轻链和重链依据载药数量从少到多依次洗脱。再通过计算各轻、重链的峰面积百分比，并结合每个峰偶联小分子药物的个数，计算加权平均DAR值。本案例使用Biozen的400&angst 孔径的WidePore C4色谱柱对DTT还原后的Trastuzumab-deruxtecan供试品进行分析，并计算其平均DAR值。01样品Trastuzumab-deruxtecan对照品购自第一三共，DAR值为8。用纯水稀释为浓度为1.0mg/mL；Trastuzumab-deruxtecan供试品，由客户慷慨赠送，先用纯水稀释为浓度为1.0mg/mL；再用1M DTT还原后上样。Trastuzumab购自MCE；先用纯水稀释为浓度为1.0mg/mL；再用1M DTT还原后上样。02色谱条件色谱柱：Biozen WidePore C4（2.6μm，400&angst ，150*4.6mm）；P/N：00F-4786-E0流动相A：0.1%TFA水流动相B：0.1%TFA乙腈流速：0.5mL/min柱温：60℃波长：280nm进样量：10μL03结果与讨论通过对Trastuzumab-deruxtecan供试品，Trastuzumab单抗和Trastuzumab-deruxtecan对照品进行还原（100μg蛋白中加入5μL 1M DTT，37℃分别孵育半小时和一小时），我们可以在反相色谱上通过梯度优化，清晰的分离轻链和重链以及荷载不同小分子数量的轻重链。通过对峰面积进行加权计算，我们可以计算得供试品的平均DAR值为3.98。裸抗（蓝）、供试品（黑）和DS-8201（红）轻重链保留时间对比Tips:反相测DAR的方案，是正交于HIC方法的很好的补充。同时，这种方法可以直接上质谱进行表征，对于含偏亲水性payload的ADC来说，也能够得到比HIC更好的分离结果。本应用使用的Biozen WidePore C4采用核壳技术结合丁基的键合相，核壳的设计不仅可以大幅提高柱效，也可以减少蛋白与固定相的次级作用，改善蛋白回收率，峰形和残留的问题；三键键合工艺能够耐受90度的高温；Bio Ti生物惰性的钛合金柱硬件也最大程度的减少了对生物样品的干扰，保证分析结果的稳健可靠。Biozen WidePore C4pH范围：1.5-9.0**USP分类：L26孔径：400&angst &bull 完整蛋白与片段分析&bull 完整质量数测试&bull ADC药物抗体比（DAR值）Biozen Intact XB-C8pH范围：1.5-9.0**USP分类：L7孔径：200&angst &bull BioTi硬件与核壳硅胶颗粒帮助降低吸附,提升回收率&bull 较低背压下实现高柱效分离&bull 温度可达90℃当然，除了Biozen WidePore C4，稍长碳链的Biozen Intact XB-C8也是键合相互补的优选。特别是对于MMAE这类疏水性payload来说，可以优先尝试空间位阻填料工艺的Biozen Intact XB-C8。

p 　　中药及天然药物化学成分与生物活性的研究是阐明中药治疗疾病的科学内涵、实现中药现代化的前提和基础。而 a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/industry-S22.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 天然药物中活性成分 /strong /span /a 分离是研究中的一大难关，工作量大、针对性差、重复率高等问题，使得活性成分分离效率难以提高。 /p p 　　中国药科大学副校长孔令义带领的团队，经过20年的努力，创建了系列色谱和波谱技术自动连接的制备分离和结构识别一体化的中药和天然药物化学成分分离新技术，发现生物活性化合物和结构新颖化合物。新技术的应用加快了中药物质基础研究与开发的步伐，推动了中药的现代化和国际化，获2015年国家科技进步二等奖。 /p p style=" text-align: center" img title=" 捕获.JPG" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201602/insimg/3f51a001-f6f6-40d3-9b61-4899555f3f3a.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" font-family: 微软雅黑, & #39 Microsoft YaHei& #39 " strong 孔令义获2015年国家科技进步二等奖 /strong /span /p p br/ /p p 　　 strong 探究中药化学成分分离新技术 /strong /p p 　　样品损失、分离效率低是天然药物化学成分研究中的拦路虎。上世纪80年代，美国学者研发的一项高速逆流色谱技术，以其无固体支撑、根据物质在两相中分配系数的差异对物质进行分离，避免了传统色谱技术因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品更能反映其本来的特性，特别适合于天然生物活性成分的分离。 /p p 　　孔令义带领团队深入开展了高速逆流色谱在制备分离各类中药活性成分中的适用性研究，创造性地将制备型色谱分离技术(HSCCC、HPLC、MPLC)和波谱测定技术(MS)连接，建立了色谱和波谱技术自动连接的制备分离和结构识别一体化的中药及天然药物化学成分分离系列新技术，显著提升了天然活性化合物和结构新颖化合物的发现和分离水平。 /p p 　　这项技术可以推动中药物质基础的阐明、基于中药和天然药物活性成分的新药发现、中药质量控制标准的完善和提高等方面的研究工作。将新技术应用到药物研发和生产实际中，可有效提高新药创制水平，解决关键技术难题，为我国中药行业提供强有力的技术支撑。 /p p 　　 strong 基于新技术的中药成分研究 /strong /p p 　　多年来，孔令义带领课题组应用新技术，从60余种中药及天然药物中分离鉴定了5000余个化合物，发现了600余个新化合物，其中新骨架化合物25个。同时，建立了中药和天然药物化合物库，在中药和天然药物的研究和开发中发挥重要作用。 /p p 　　此外，该项目对化合物的生物活性开展了系统研究，阐明了部分中药和药用植物临床治疗疾病的物质基础，确定了具有降血糖、抗过敏性哮喘、抗肿瘤等显著活性的化合物42个，并为开发具有自主知识产权的新药奠定了基础，其中2个化合物被列为国家科技重大专项重大新药创制候选药物。 /p p 　　课题组将分离新技术应用到中药化学对照品的研究制备中，也取得了很好的效果。将分离制备的中药化学对照品应用于《中国药典》2010年版的质量控制研究中，起草了12个中药及饮片的质量标准，并已颁布实施，为中药质量控制标准的完善和提高做出了重要贡献，保证了相关中药临床应用的安全性和有效性。 /p p 　　项目获得8项专利授权，发表SCI收录论文116篇，其中30篇论文发表在色谱分离和天然产物研究相关领域的国际权威期刊。相关成果先后获得2013年度江苏省科学技术奖一等奖、2009年度教育部自然科学奖一等奖。 /p p br/ /p