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什么叫做高通量?什么叫做高压罐?有没有大侠可以帮助判断的,有点晕
简单介绍一下关于药物高通量筛选技术的知识一.概念高通量筛选(High throughput screening,HTS)技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础,以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行试验过程,以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据,以计算机对实验数据进行分析处理,同一时间对数以千万样品检测,并以相应的数据库支持整个体系运转的技术体系。二. 高通量筛选技术体系的组成1. 化合物样品库化合物样品主要有人工合成和从天然产物中分离纯化两个来源。其中,人工合成又可分为常规化学合成和组合化学合成两种方法。2.自动化的操作系统自动化操作系统利用计算机通过操作软件控制整个实验过程。操作软件采用实物图像代表实验用具,简洁明了的图示代表机器的动作。自动化操作系统的工作能力取决于系统的组分,根据需要可配置加样、冲洗、温解、离心等设备以进行相应的工作。3.高灵敏度的检测系统检测系统一般采用液闪计数器、化学发光检测计数器、宽谱带分光光度仪、荧光光度仪等。4.数据库管理系统数据库管理系统承担4个方面的功能: 样品库的管理功能;生物活性信息的管理功能; 对高通量药物筛选的服务功能; 药物设计与药物发现功能。三. 高通量筛选模型常用的筛选模型都在分子水平和细胞水平,观察的是药物与分子靶点的相互作用,能够直接认识药物的基本作用机制。1. 分子水平的药物筛选模型:受体筛选模型;酶筛选模型;离子通道筛选模型1.1受体筛选模型:指受体与放射性配体结合模型。以受体为作用靶的筛选方法,包括检测功能反应、第二信使生成和标记配体与受体相互作用等不同类型。1.2酶筛选模型:观察药物对酶活性的影响。根据酶的特点,酶的反应底物,产物都可以作为检测指标,并由此确定反应速度。典型的酶筛选包括1) 适当缓冲液中孵化;(2)控制反应速度,如:温度,缓冲液的pH值和酶的浓度等;(3)单时间点数器, 需测量产物的增加和底物的减少。1.3离子通道筛选模型: (1)贝类动物毒素的高通量筛选,其作用靶为Na+通道上的蛤蚌毒素结合位点,用放射性配体进行竞争性结合试验考察受试样品。(2)用酵母双杂交的方法高通量筛选干扰N型钙通道β3亚单位与α1β亚单位相互作用的小分子,寻找新型钙通道拮抗剂。2.细胞水平药物筛选模型观察被筛样品对细胞的作用,但不能反映药物作用的具体途径和靶标,仅反映药物对细胞生长等过程的综合作用。包括: 内皮细胞激活; 细胞凋亡; 抗肿瘤活性; 转录调控检测; 信号转导通路; 细菌蛋白分泌; 细菌生长。四.问题及展望高通量筛选技术与传统的药物筛选方法相比有以下几个优点:反应体积小;自动化;灵敏快速检测;高度特异性。但是,高通量筛选作为药物筛选的一种方法,并不是一种万能的手段,特别是在中药研究方面,其局限性也是十分明显的。首先,高通量筛选所采用的主要是分子、细胞水平的体外实验模型,因此任何模型都不可能充分反映药物的全面药理作用;其次,用于高通量筛选的模型是有限的和不断发展的,要建立反映机体全部生理机能或药物对整个机体作用的理想模型,也是不现实的。但我们应该相信,随着对高通量筛选研究的不断深入,随着对筛选模型的评价标准、新的药物作用靶点的发现以及筛选模型的新颖性和实用性的统一,高通量筛选技术必将在未来的药物研究中发挥越来越重要的作用。
根据《中华人民共和做国家环境保护标准》对水质中叶绿色a的测定,采用高通量研磨机进行研磨,可达到最精细的研磨。研磨特点:[b][color=red]直接用离心管研磨,少一次样品转移,少一次损失。[/color][color=red][b][color=red]实验步骤:[/color][/b]1. 将滤膜放置在连有真空泵的玻璃抽滤器上,根据水体营养状态,准确量取定量体积的混匀水样进行抽滤,在水样刚刚完全通过过滤模时进行抽滤,用镊子将滤膜取出,将有样品的一面对折,用滤纸吸干滤膜水分。2. 将抽滤后的样品滤膜放置于高通量适配器中的离心管内,加入0.01g~0.02g碳酸镁及丙酮溶液,充分研磨至糊状,补加3~4ml丙酮溶液继续研磨,并重复1~2次,保证研磨时间5-10min。[/color][color=red]3. 将离心管中的研磨提取液充分振荡混匀后,放置于4[color=#333333]℃[/color]暗处浸泡提取2h以上,不超过24h。在浸泡过程中要颠倒摇匀2~3次。4. 将离心管放入离心机中,以相对离心力1000*g离心10min(转速3000-4000r/min)。取上清液用0.45um有机相针式滤器过滤,收集滤液待测。[/color][color=red][b]设备介绍 分体式仪器优点:[/b]机械部分与电子控制部分分开,航空插头设计,延长电子元器件寿命,减少损坏;简单,实用。[b]——[/b]这也是一体机致命缺点。[b]一体式仪器优点:[/b]结构紧凑,美观简洁,占地小,噪音低[b]原理:[/b]高通量混合研磨仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂,通过玛瑙小球或不锈钢小珠等在样品管内来回不规则撞击及摩擦,在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨,可以达到5微米。[b]5. 配置:[/b]材质:PTFE、1010尼龙规格:6孔10ml、12孔5ml用途:将4.1中滤膜吸干水的样品粉碎。[b]总结:[/b]高通量混合研磨仪用于***标准实验时,研磨2min和3min,均可成功将物料打成浆糊状,达到测定水中叶绿素的研磨标准。其粉碎粒径测定如下(所用仪器为丹东百特公司(BT-9300S,BT-800):[/color][color=red][color=#B10D14]TJ-2011[/color][color=#B10D14]高通量混合研磨仪技术指标[/color][/color][color=red][color=#B10D14]应用:粉碎、混合、均相化以及细胞破碎、冷冻研磨[/color][/color][color=red][color=#B10D14]应用领域:农业、生物、化学、塑料、建筑材料、电子、环境、食物、玻璃、陶瓷、医药、矿物冶金[/color][/color][color=red][color=#B10D14]样品特征:硬的、中硬性、软性的、脆性的、弹性的、含纤维的[/color][/color][color=red][color=#B10D14]粉碎原理:撞击力、摩擦力[/color][/color][color=red][color=#B10D14]最大进样尺寸:≤8mm[/color][/color][color=red][color=#B10D14]最终出料粒度:~3μm(不同材料研磨细度有差异)[/color][/color][color=red][color=#B10D14]振动频率设置:10-1500次/分钟[/color][/color][color=red][color=#B10D14]典型粉碎时间:2min[/color][/color][color=red][color=#B10D14]干磨:是[/color][/color][color=red][color=#B10D14]湿磨:是[/color][/color][color=red][color=#B10D14]低温研磨:是[/color][/color][color=red][color=#B10D14]带自动中心定位的紧固装置:是[/color][/color][color=red][color=#B10D14]研磨平台数:2[/color][/color][color=red][color=#B10D14]研磨罐种类:旋盖型研磨罐[/color][/color][color=red][color=#B10D14]研磨套件材料:硬质钢、特氟龙尼龙 0.5/1.5mL/2mL/5ml/10ml(离心管/PCR管)[/color][/color][color=red][color=#B10D14]研磨适配器:24孔板×2 96孔板×2[/color][/color][color=red][color=#B10D14]研磨套件尺寸:25mL/50mL(研磨罐)[/color][/color][color=red][color=#B10D14]研磨球材质:玛瑙、不锈钢、氧化锆、碳化钨、陶瓷[/color][/color][color=red][color=#B10D14]粉碎时间设定:数字显示 1秒-99分59秒[/color][/color][color=red][color=#B10D14]驱动:无刷电机[/color][/color][color=red][color=#B10D14]功率:150W[/color][/color][color=red][color=#B10D14]机体尺寸(宽*高*纵深):300*180*420[/color][/color][/b]