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[size=4] 传统的微生物分离、鉴定方法操作繁杂,周期长,准确性差,灵敏度低,对实验室技术人员的专业技术、操作技能、工作经验要求极高,快速和准确获得细菌的鉴定及药敏结果是非常必要的。近年来随着计算机的发展及广泛应用,微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。先后出现了许多全自动细菌鉴定与药敏系统,比如VITEK 系统、MicroScan WaikAway系统、MicroScan AS-4 微生物分析仪、PHOENIXTM系统等。这些技术的应用,为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序,大大提高了细菌鉴定的准确性,在很大程度上提高了工作效率,但同时也应注意一些问题,本文对几种常用的鉴定系统在临床微生物检验中的应用情况做一综述。[back=rgb(243, 40, 255)]1 全自动微生物鉴定系统的基本原理 [/back] 全自动微生物鉴定系统是基于生物信息编码(数码)鉴定细菌的新方法。数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一组数码,建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字(编码),查阅检索本或数据库,得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。 鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础,而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。大多鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化,色原性或荧光原性底物的酶解,测定挥发或不挥发酸,或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。 药敏试验分析系统的基本原理是将抗生素微量稀释在条孔或条板中,加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育,通过测定细菌生长的浊度,或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解,观察细菌的生长情况。在含有抗生素的培养基中,浊度的增加提示细菌生长,根据判断标准解释敏感或耐药。[/size]
酶联免疫吸附试验(ELISA/EIA,简称“酶免试验”)是一项现代医学临床检验基本的、常规的检测技术。尽管在90年代初期,由于以聚合酶链反应(PCR)技术为代表分子生物学水平技术的发明,人们纷纷预测,酶免试验将被更高灵敏度、数百万级信号放大的、病原体水平检测的核酸放大试验(NAT)所取代。但由于免疫临床标志物(抗原/抗体)具有无法替代的临床意义、以及酶免试验具有操作简便、技术可靠,特别是,90年代末期ELISA检测系统的灵敏度和特异性以及检测过程的自动化得到了显著提高与完善,因此,酶免试验再也没人怀疑将被淘汰,而成为传染病血清学标志物(如肝炎、艾滋、致畸病原Torch)、肿瘤标志物及内分泌等各种临床免疫指标检测的主导技术。 支持酶免试验技术的进步,酶标板检测仪器朝着二个方向快速发展。一方面,侧重酶免试验的光学检测系统——酶标仪,到90年代末已达到至臻完美状态;随着纳米技术微量加样的发展,酶标仪将很容易由检测传统的96微孔板,转化为检测384微孔板,甚至1536微孔板,达到更高的检测效率。另一方面,侧重酶免试验处理过程技术——酶标分析系统,到90年代末已充分发展;随着多任务软件,如O/S2,Unix及Windows NT等操作平台的完善,满足现代实验室GMP/GLP要求的全自动酶标分析系统,正在世界各种实验室普及。应当指出,在发达国家全自动酶标分析系统的进步,是由法规要求严格、酶免试验结果至关重要的血站实验室需求推动的。这是因为,不同于临床病人检测结果,仅是医生诊断的参考数据,血站血液筛查实验室的检验结果判定,将直接决定血液的安全性。 以日本为代表的“全面实验室自动化”(TLA)运动,对于全自动酶免分析系统产生了巨大的需求。在90年代初期,手工酶免试验操作曾经成为TLA的主要障碍。目前,由于全面实验室自动化具有标准化、高效率、高质量的自动化与网络化特征,正成为临床实验室发展的新趋势。 酶免试验自动化与网络化的时代已经到来,全面实验室自动化不再是一种模型。了解这些技术进步将有助于高效临床实验室的建设 根据美国临床病理学院(CAP)的调查报告,实验室误差(ERROR)产生原因的79%因素,是因为实验过程中样本处理不当造成的。 区别与其他临床检验技术针对于每一反应单元对应于一份标本,酶免试验的样本处理必须基于批量化操作——96孔酶标板。为保障正板内各孔标本孵育时间最小差异,必须采用8通道或12通道快速加样。因此全自动样本处理机是提高实验精度、提高实验效率和避免人为误差和差错的关键设备。 第一代多功能(Robotic)样本处理机,是由瑞士哈美顿(HAMILTON)公司开发于1985年上市的Microlab 2200。这是一台基于机械臂运动和具有管路系统的稀释分配器(Diluter)原理,采用8或12根固定距离的特弗隆探针,由单任务的BASIC程序控制的样本处理机。 随着酶免试验的普及,基于管路稀释分配器原理的样本处理机得到快速发展,先后有数家厂商开发了十余种样本处理机,以满足实验室液体处理需要。如瑞士哈美顿公司的Microlab 4000等。 1989年,哈美顿公司独树一帜,开发上市了以专利技术的可抛弃塑料活塞注射器(Micro-syringe)为原理的,无管路批量样本处理机Microlab AT,试图满足更快的加样(12针)、无污染地加样、主动抛弃可能失去精度的加样针、摒弃不可预测的管路污染与稀释等实验室需求。1997年,AT系列增加改进为Microlab AT plus 2型。这种原理的样本处理机,具有全面的标本质量系统、加样质量保障系统。是唯一获得美国FDA许可,用于血液筛查实验室的产品。在中国自1996年开始引进AT样本处理机,迄今为止已有150余名。 样本处理自动化的最新技术进步,是以瑞士哈美顿公司于2000年8月推出的,第五代斯达尔全自动随机式批量样本工作站(Microlab STARTM,Sequential Transfer Aliquoting Robot)为标志的,这是世界上第一台符合2003年实施的IVD标准的全自动样本处理工作站。其主要技术特征是: 采用专利的压缩导入-O形环扩张(CO-RE)核心技术,实现标准加样的智能化、自动化; 理想的加样体系——气动置换加样原理ADP的实现; 实现任意加样动作编程同时使用不同的加样头(抛弃型加样尖和永久型探针); 实时实现液体双传感(△C-△P)技术; 全方位液面传感应用,特别是解决了酶标板的液面监测世界难题; 活性洗涤工作站(Active Wash Station)进行平行洗涤加样针,是提高加样速度的关键; 模块化、无管路、独立加样通道系统4——16通道,用户可以根据工作量进行升级; 智能增强的容错纠错系统(Sophisticated Error Handling) 实现全过程控制(TPC),全部步骤都在监控下运行,每个步骤都形成记录文件(TRACE),甚至对加样体积质量进行校验、备份,实现全自动GMP/GLP。 最新一代哈美顿—斯达尔的典型应用为: *血站输出筛选实验室: ——ELISA实验 ——标本留样存档(Archiving) ——血型正/反定型实验 ——转氨酶和梅毒凝集实验 ——NAT汇集实验 ——NAT试验无污染(RNAse/DNAse)加样 *医院检验实验室: ——样本处理中心(对病人标本分项处理(aliquot)生化/免疫/体液/血液/血凝) ——酶免实验室ELISA试验(标本、对照/标准、试剂的分配、稀释) *分子生物学与生物技术药物筛选 ——DNA纯化 ——PCR加样 ——DNA测序加样 ——克隆快速筛选分配 ——药物筛选自动分配 目前,酶免试验样本处理设备已开始在全国血站系统普及,其中哈美顿AT数量最多。样本处理机还是酶免自动化所需主动标本识别(Positive Sample ID)条码阅读的基本设备系统。此外,样本处理机还有下列重要意义。 *提高加标本速度与效率 *减少操作人员劳动强度 *使标本传染操作人员机会最小化 *通过减少人为失误和改善加样精确度与准确性来改善检测分析质量 *采用批量(batch)或随机(random access)进行多种组合与多种模式检测
http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C142831%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 海能仪器 的 P850A 全自动旋光仪(自动校准)(P850A pro)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来,这款产品已经被多家单位采用,如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解,欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动,并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介: Hanon P系列全自动旋光仪具有全自动光电检测技术和WINDOWS界面的人机对话系统,具有测量过程精确、可靠及操作便捷等优点。通过对物质旋光度的检测,可以分析确定物质的浓度、含量及纯度等,广泛应用于医药、石油、食品、化工、香精、香料、制糖等行业及有关的高校和科研院所。 P850/P850A内置帕尔贴(Peltier)精确控温系统,可以满足用户在恒定温度下进行测试的需要;P810A/P850A内置自动校准系统,标配标准校准器,完全满足高端用户对仪器测量精度可控的需求。 使用寿命超过十万小时的LED光源 成熟的全自动光电检测技术在Hanon P系列全自动旋光仪中得以合理应用,不但全面提高了仪器的整体实验效率,更确保了最后结果的准确性和稳定性;特别订制的高亮度LED光源,使用寿命超过100000小时,用户不必再为频繁更换光源而烦恼。 全自动控温系统 基于Hanon PODG 开发的P810全自动旋光仪,升级后的P850加入内置帕尔贴(Peltier)精确控温系统,让整个实验过程能够在一个精确、恒定的温度下进行,用户从此告别实验温度无法精确控制,结果因温度不确定而无法精确计算的历史,进入由P850开创的精确控温时代。 (P850/ P850A特有) 全自动校准系统 P810A/ P850A 内置自动校准系统,标配标准校准器,可实现用户对测试结果更加精准的需求。 广角度测量技术 运用最新的广角度测量技术,使旋光度的测量范围从±45°扩展到±89.99°,改写了旋光仪测量样品的局限性,提高实验室整体测量水平。 性能特点: 全自动光电检测技术搭配内置的帕尔贴(Peltier)精确控温系统,保证测量的准确度和稳定性 宽大的彩色触摸显示屏和创新的WINDOWS界面软件,让仪器操控和数据读取更加便捷,满足高端用户使用习惯 使用寿命超过100000小时的高亮度LED光源 多种测量模式供用户选择,免去复杂的人工计算过程 拥有超大存储容量空间,可自动存储高达1000组数据信息 整机通过实验室分析仪器TART品质认证标准 技术参数: 工作波长:589.3nm(钠D光谱) 测量范围:±89.99°(旋光度) 最小读数:0.001°(旋光度) 准确度:±0.01° 可测样品最低透过率:1% 重复性(....【了解更多此仪器设备的信息】