化学发光微孔板酶标检测仪

新平台提高了检测灵敏度，克服微孔板中细胞数量过少的限制，强大的检测性能提高了研究效率　　芝加哥，2009 年 10 月 19 日(美国商业新闻)- 专注于提高人类健康及其生存环境安全的全球领先公司 PerkinElmer, Inc.，今天在 2009 神经科学学会年会上宣布推出最新增强型EnSpire(TM) 多标记微孔板检测仪平台 - EUR EnSpire，它具有超灵敏度发光检测功能。此项新检测功能为科研人员(包括在癌症和神经药理学领域从事原代细胞或干细胞研究的科研人员)提供了增强的功能，以提高检测性能和灵敏度。　　EnSpire 平台是一个可灵活配置的微孔板检测器，提供高性能检测功能和方便易用的软件。该平台经济实用，可适合在各种规模的实验室中进行研究。扩展的模块新增了超灵敏化学发光检测、温度控制及适用于 96 孔和 384 孔微孔板的荧光强度 (FI) 底部检测等多种功能。对于细胞样品数量有限的科研人员来说，增强的检测信号可以提高检测性能和精度。　　PerkinElmer 生物研发业务自动化和检测解决方案副总裁兼总经理 Nance Hall 说，“在一些细胞稀缺、研究资源有限的领域，EnSpire 的发光灵敏度可以应对细胞不足和细胞转染率低等限制线性动态检测范围和检测窗优化的因素，强大的检测性能可以轻松面对最新的应用检测技术的挑战。EnSpire 平台目前具有化学发光检测功能，能够帮助化学发光研究领域(尤其是细胞增殖、细胞毒性和报告基因检测领域)的科研人员，提高检测灵敏度。”　　为满足客户需求，EnSpire 平台可以提供以下关键检测技术：　　* Quad 光栅　　- 荧光强度 (FI)　　- 吸光度 (Abs)　　* Alpha 技术　　* 超灵敏化学发光　　* 温度控制与底部检测荧光强度　　关于 PerkinElmer, Inc.　　PerkinElmer, Inc. 是一家专注于提高人类及环境的健康和安全的全球领先公司。据报道，该公司 2008 年收入约为 20 亿美元，拥有 8,400 名员工，为超过 150 个国家/地区的客户提供服务，同时该公司也是标准普尔 500 指数的成员。有关其它信息，请访问 www.perkinelmer.com.cn 或致电 1-877-PKI-NYSE。　　媒体联络　　PerkinElmer, Inc.Kim McCrossen 联络电话︰+781-663-5871 版权所有 美国商业新闻 2009

酶标仪问世之初，是酶联免疫吸附试验(ELISA)的专用检测仪器。随着科学技术发展和市场需求演变，酶标仪被赋予的功能日益丰富。由最初的吸收光(ABS)检测，到荧光强度(FI)、发光检测(LUMI)，再到荧光偏振(FP)、时间分辨荧光(TRF)等检测技术，酶标仪早已突破了ELISA的范畴，在追“光”道路驰而不息。为帮助广大用户及时了解酶标仪前沿技术、主流品牌与创新产品、市场动态以及相关活动，仪器信息网特别策划了《从光吸收到多功能，酶标仪的“逐光”之路》专题（点击查看）。本期，我们特别邀请到德国伯托科技生物分析(Berthold Technologies)中国代表处谈一谈伯托科技酶标仪创新检测技术及其对酶标仪未来市场的看法。仪器信息网：未来中国酶标仪市场的发展前景如何？最看好哪些应用细分？伯托科技：未来中国酶标仪市场将迎来一个理性消费的时代——选择适合自己的酶标仪，单功能酶标仪尤其是化学发光酶标仪会进入一个高增长期。大量小型实验室或者课题组会选择单功能酶标仪。我们认为，“对砍骨头而言，瑞士军刀的作用不如一把十几块钱的菜刀，多功能酶标仪亦是如此。”多功能酶标仪是将多种检测技术融于一体，需要检测器和光路等相互妥协，从而导致其每项技术的性能均有不同程度的下降。在过去二十多年仪器制造商的引导下，大多数用户形成了“多功能酶标仪是高大上，四光栅全波长的酶标仪才是高档的”等的观点，从而导致很多小型实验室用户购买的仪器不仅功能过剩，而且没有得到最佳的仪器性能。如做报告基因、ATP检测、蛋白间弱相互作用等应用的用户理应选择化学发光单功能酶标仪，其灵敏度比一般多功能酶标仪会高1-2个数量级，而且实验结果的稳定性更高。细菌培养监测的用户则仅仅需要选择一台不到10万人民币的吸光度酶标仪即可。资源配置的合理优化，不仅是国家的号召，也是一个理性市场未来发展的趋势。大型实验室或者综合性实验平台，首先购买多功能酶标仪，在预算充足或者后期会增购单功能酶标仪。因为这种类型的实验室首要目标是满足不同实验室需求的多样性，其次才是关注仪器性能的提升。前期这些类型的实验室大部分已经购买多功能酶标仪，后期通过宣导，单功能酶标仪会有更进一步的市场，尤其是对灵敏度要求更高的用户更加需要一台化学发光的单功能酶标仪。总之，理性消费，合理选择，将会让单功能酶标仪迎来一个高增长期。就应用而言，生物医药和诊断行业将会迎来比较高的增长，也是我比较看好的应用领域。仪器信息网：请点评吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)和化学发光(Lum)等不同酶标仪检测方法的优劣势？伯托科技：吸光度(Abs)、荧光强度(FI)和化学发光(Lum)在科研实验中均有大量运用，三种方法各有优缺点。技术本身没有好坏之分，而取决于用户对实验的需求，适合自己的才是最好的。从检测灵敏度来说，化学发光最高、荧光次之、吸光度最低；从操作方面来说，荧光最简单、化学发光次之、吸光度最复杂；从成本方面来说，吸光度最便宜，化学发光次之，荧光最贵。因此，三种检测方法在实际运用中慢慢得到区分，如报告基因检测和IVD试剂开发运用到化学发光检测，痕量蛋白的相互作用或者蛋白的弱相互作用（如窗口小于0.01）采用基于化学发光检测的BRET技术(BRET1/BRET2/NanoBRET)。荧光检测中，提高灵敏度最有效的方法之一是降低背景(noise)来明显提高信噪比(S/N)，因此，产生了诸如时间分辨荧光(TRF)，TR-FRET等方法。而荧光偏振(FP)，荧光共振能量转移(FRET)，Alpha技术等主要用于分子间相互作用的检测，根据分子的不同（如大分子之间相互作用，小分子与小分子间相互作用等）采用不同的技术。总之，检测技术没有优劣之分，选择适合自己的才是最好的。仪器信息网：请谈谈酶标仪未来技术发展趋势？伯托科技：对于酶标仪未来技术的发展趋势，个人认为不同的酶标仪检测技术将会强化各自优势以更好的满足用户的需求。用户对化学发光检测技术的需求点在于高灵敏度，那么仪器制造商会从光路的简化、检测器对化学发光光谱波长的敏感性优化以及系统优化等方面提升仪器的灵敏度性能；在荧光检测技术方面，在现有基础上开发更多低背景探针以提高检测灵敏度是一个重要的方向，如上转换荧光探针等；而吸光度检测技术目前发展的已经比较成熟，短期内提高相对困难，重点会倾向于简化酶标流程降低成本或者酶标实验流程的自动化方面。仪器信息网：贵司目前主推的酶标仪产品是什么？请您谈谈该产品的核心竞争力。伯托科技：伯托科技公司(Berthold Technologies)于1949年成立在德国西南的巴符州，拥有生物分析部门、核放射防护部门和过程控制部门三个部门。其中，生物分析部门涵盖微孔板分析仪（即酶标仪）、活体成像系统、ELISA工作站、管式发光仪、放射性相关产品等。公司的宗旨是将科学转化为解决方案(Transforming Science into Solutions)，目前在全球范围内100多个国家搭建了销售和服务网络体系。我们目前主推的酶标仪是Tristar系列微孔板分析仪，主要包括Tristar 3和Tristar 5两种型号。其中Tristar 5是一款模块化的高性能多功能微孔板分析仪，提供独立的滤光片光路系统或（和）光栅光路系统多种选择，兼具吸收光(紫外/可见)、荧光强度、化学发光、荧光偏振和时间分辨荧光等检测功能。采用One-4-All光路系统（滤光片光路和四光栅光路）既能满足发光检测中必须减少空间干扰，很大程度地提高光子检测效率的需要，又结合了荧光实验中小光子散射及激发/发射荧光信号的分辨能力。另外，Tristar 5还具备超高灵敏度，在同一台仪器中能够实现发光(6 amol ATP)和荧光(7 amol FITC)两种超低检测限。尤其在生物发光共振能量转移（BRET）实验，Tristar 5的检测性能效果拔群，即便低于0.01窗口内仍然具有超高的稳定性。同时，Tristar 5喷射式进样器采用Teflon技术，通过准确、快速进样来保证试剂高效混合，具备全进样体积CV2%的准确度和精确度。Tristar 5多功能微孔板分析仪仪器信息网：请介绍贵公司酶标仪发展历程中里程碑事件。伯托科技：自1949年伯托科技成立以来，公司一直持续深耕发光检测行业，不遗余力地投入人力物力加大研发力度。1979年，伯托科技成功研发出了第一台管式发光仪；1986年，公司推出第一台微孔板发光仪，并在2002年推出系列多功能微孔板分析仪。目前，Tristar3和Tristar5是伯托科技微孔板分析仪的最新型号。我们始终站在发光检测性能的前列，最新Tristar系列的ONE-4-ALL光路，将荧光检测的灵敏度也提高到了7 amol FITC的超高水平。这是我们公司多功能微孔板分析仪发展的最新里程碑。仪器信息网：贵公司酶标仪主要应用哪些领域的哪些实验环节？有哪些代表性用户单位？伯托科技：Tristar系列微孔板分析仪自上市以来，受到业内广泛关注和各领域研究人员的青睐，包括生命科学、临床医学、制药学、环境科学、食品科学等。著名用户涵盖国内知名高校和中科院下属的各研究所的实验室。近几年来，我们公司不断加强对化学发光诊断试剂体系的研发，在中国IVD行业中也取得了长足进展。比如Tristar系列因其高灵敏度和进样试剂的超高准确性而受到诸如西门子等全球知名企业的青睐。如有技术干货、科研成果、酶标仪使用心得等内容，欢迎投稿，投稿文章将在《从光吸收到多功能，酶标仪的“逐光”之路》专题(点击查看)展示并在仪器信息网相关渠道推广。投稿邮箱：zhaoyw@instrument.com.cn，关于征稿内容要求也可邮件咨询或电话联系：13331136682（同微信）。

吉林检验检疫局建立的金标法检测单核细胞增生性李斯特氏菌技术作为当今检测病原体和诊断疾病方面最为敏感的免疫学技术之一，不仅操作简便、快速、特异，更为重要的是适用于广大基层食品监管部门的现场检测和诊断，这些特点都是其他免疫学方法所无法比拟的。　　该技术不仅具有巨大的发展潜力，而且还具有广阔的市场和应用前景，如可适用于医疗卫生行业，出入境食品口岸抽查和鉴定、流通领域卫生监督和工商行政部门和质监部门的食品企业监管等，甚至可以走进餐馆、家庭进行简易的食品自控和检测等。　　由吉林出入境检验检疫局承担的国家质检总局科研课题《应用化学发光探针及免疫金标法检测食品中多种致病菌的研究》在2011年获得了国家质检总局“科技兴检”三等奖。该课题建立的化学发光探针检测技术能够快速检测食品中常见的四种病原菌：空肠弯曲菌、单核细胞增生性李斯特氏菌、大肠杆菌O157和金黄色葡萄球菌。其中对单核细胞增生性李斯特氏菌还建立了应用免疫胶体金试纸条的快速检测方法。　　急需速测技术　　我国的食品生产加工企业数量多，规模小，较分散，而且为数较多企业过分追求利润法律意识淡薄，社会责任心不强导致其产品质量良莠不齐。　　据报道，我国45万个食品生产企业中，员工人数10人以下的食品生产加工小作坊就有35万家，约占80%，因而导致食品安全事故时有发生，给社会和消费者的健康造成了巨大危害。　　而目前的食品卫生监管的检测手段主要依据国家标准或行业标准规定方法进行，虽然这些方法准确可靠，但这些方法一般都需要建设专门的微生物检测实验室，配备专业的检测技术人员，需要较长的检测周期，由此造成的检测成本过高，缺乏时效性等问题，使一些突发的食品安全事件不能迅速得以解决。因此发展和建立一种快速、简便、灵敏准确的检测技术，作为标准检测方法的初筛技术，是解决上述问题的有效手段之一。　　食品检验新兵　　化学发光探针技术的原理是互补的核酸单链会特异性识别并结合成稳定的双链复合物。这一检测系统利用一个标记有化学发光物的单链DNA探针，可以特异性的识别和结合目标微生物的核糖体RNA。微生物中的核糖体RNA释放出来后，化学发光标记的DNA探针就与之结合形成稳定的DNA-RNA杂合体。标记的DNA-RNA杂合体会与非杂交探针分离，并在化学发光检测仪中进行测量。样本的检测结果通过计算与阴性对照进行比较得出结果。利用化学发光剂标记和检测核酸使得许多非放射性标记检测的灵敏度达到甚至超过了同位素标记测定。　　在众多的化学发光体系中，应用最多的化学发光体主要有三类：增强鲁米诺发光体系、吖啶类化合物发光体系和碱性磷酸酶催化的1，2-二氧环己烷发光体系。吉林检验检疫局建立的化学发光技术使用吖啶酯标记核酸探针。　　利用化学发光杂交保护分析的原理检测空肠弯曲菌、单核细胞增生性李斯特氏菌、大肠杆菌O157和金黄色葡萄球菌4种致病菌特异性RNA序列，这种方法无需物理分离，利用吖啶酯标记DNA探针，通过核酸杂交保护分析法，即应用人工合成的靶DNA保守区的寡核苷酸，在合成时引入一个烷氨基的手臂，经活化后接上吖啶酯，制成化学发光探针。　　杂交后无需分离步骤，而是利用差分水解来鉴别，即加入碱性溶液，游离的发光探针遇碱水解失去发光特性，而与特异性目的片段结合的探针形成DNA-RNA杂交体，由于吖啶酯是平面结构很容易进入双螺旋的内部而获得杂交保护，水解速度缓慢(半衰期达10分钟以上)，仍有发光性能，可以在发光仪上显示化学发光信号，从而实现对病原菌的检测。　　应用前景广阔　　该项目利用胶体金技术研制了胶体金检测试纸条，用于单核细胞增生性李斯特氏菌的快速检测，该检测试纸条的灵敏度高，具有很强的特异性，不同批次生产的免疫胶体金具有良好的检测重现性，稳定性好，操作简单，检测时间只需10至20min即可报告结果，胶体金法无污染，不会危害操作者以及环境。胶体金抗体复合物在冻干状态下室温储存相当稳定，有效期长 此外胶体金技术还具有检测迅速、灵敏、不需要复杂仪器设备、产品永不褪色等优点，适合于食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的初筛检验。　　吉林检验检疫局建立的基因探针化学发光检测方法可在30分钟内快速确定病原体，并可直接于固体或液体培养基上鉴定目标微生物。该方法可直接应用于国外生产的LEADER 50i检测仪上，仪器自动注入检测试剂，立刻测量标记物所产生化学反应的化学发光强度，并自动计算结果及打印报告，该检测方法敏感性高，特异性强，检测成本低，操作简便、快速，对我国食品安全快速检测和监控工作具有重要意义，具有广泛的推广前景。胶体金快速检测试纸