全自动诱导荧光毛细管电泳仪

【参数解读】毛细管电泳仪的技术参数解读与使用毛细管电泳仪主要部件有0～30kV可调稳压稳流电源，内径小于100μm(常用50～75μm)、长度一般为30～100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器，前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。由于毛细管电泳有很多分离模式，所以不同仪器差异会很大。有些是普遍适用型，有些则具有专一性，只适用于某种模式或者某种物质的分离分析。普遍适用型的如Agilent 7100，Beckman PA800 plus，专一性的如毛细管电泳液相色谱一体机，这个就只能做电色谱（CEC），类似于HPLC，通常需要有填充物质，但又比HPLC多了个高压系统。再比如iCE280分析仪，其实是一台成像毛细管等电聚焦电泳仪，只能用于蛋白质的分离分析，分离模式固定为毛细管等电聚焦电泳（cIEF）。〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓请您来解析：1、空气制冷和冷凝液制冷，哪个效果更好？冷凝方式，液体冷凝会比较稳定，液冷效果好。只是这样一来还要另外买冷凝液，增加分析成本。2、注意过样品盘的温控范围吗？你的仪器范围多大？什么范围内才比较好？控温范围直接决定了仪器的适用范围，控温的准确度又决定了重现性的好坏，所以，这个参数至关重要。安捷伦的样品温度最低高达10度，如果做生物样品的话就被动了。beckman最低4度，比较有优势。我见过最低温度的是Lumex的毛细管电泳仪，低到-10度。控温的最高值也值得关注，如果毛细管堵住了的话，常温经常冲洗不了，这是提高温度往往会有惊喜（越高越好）。3、毛细管出口端的长度什么情况下会对分离分析产生重要影响？如何评价毛细管的质量好坏？出口端长度是指的是窗口到出口端的距离吗？会影响场强和进样量。在出口端进样模式下，出口端的长度有重要意义，因为较长的有效距离能够提供更好的分离度。4、影响仪器分离度的因素有哪些？仪器的哪些参数会影响分离度？电压、温度、管长、管内径、溶液等；仪器的温度、电压等会影响。5、目前市场上已有一些用途比较专一的毛细管电泳仪，比如毛细管电泳液相色谱一体机和毛细管等电聚焦电泳仪等。普通毛细管电泳仪如Agilent 7100和Beckman PA800 plus等也能完成以上这两种特制仪器的工作吗？可以的，还可以和质谱联用。6、谈谈你的CE仪在使用过程中容易出现的问题和解决办法。常见的是管子容易断或者污染什么的，解决办法就是“换”和“洗”。SDS-MEKC很容易有气泡，解决办法就是超声。如果毛细管里面有气泡，引起断流，断流后如果不及时发现，积聚的热量就有可能烧坏毛细管。欢迎大家参与讨论，补充自己想交流的参数，说说自己的认识或者提出自己的疑问！！！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。 由于毛细管内径的限制，检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检测方法，但是受到仪器、单波长等因素的限制。目前应用最广泛的是二极管阵列(PDA)检测器。常规的检测器还有灵敏度很高的激光光热(LIP)和荧光(FL)检测器。近些年，在实际应用中还产生了激光诱导荧光(LIF)、有良好选择性的安培(EC)、通用性很好的电导(CD)助以及可以获得结构信息的质谱(MS)等多种检测器。迄今为止，除了电感耦合等离子体(ICP)和红外(IR)技术没有和CE联用，其他的检测方法均和CE联用并且大部分实现商品化。使用CE时应该根据所分析物质的特点，选择相应分离模式和检测器，以扬长避短，得到最佳分析效果。毛细管电泳仪的主要部件和其性能要求如下：(1)毛细管用弹性石英毛细管，内径50μm和75μm两种使用较多(毛细管电色谱有时用内径再大些的毛细管)。细内径分离效果好，且焦耳热小，允许施加较高电压，但若采用柱上检测因光程较短检测限比较粗内径管要差。毛细管长度称为总长度，根据分离度的要求，可选用20～100cm长度，进样端至检测器间的长度称为有效长度。毛细管常盘放在管架上控制在一定温度下操作，以控制焦耳热，操作缓冲液的黏度和电导度，对测定的重复性很重要。 (2)直流高压电源采用0～30kV(或相近)可调节直流电源，可供应约300μA电流，具有稳压和稳流两种方式可供选择。 (3)电极和电极槽两个电极槽里放入操作缓冲液，分别插入毛细管的进口端与出口端以及铂电极，铂电极接至直流高压电源，正负极可切换。多种型号的仪器将样品瓶同时用做电极槽。(4)冲洗进样系统每次进样之前毛细管要用不同溶液冲洗，选用自动冲洗进样仪器较为方便。进样方法有压力(加压)进样、负压(减压)进样、虹吸进样和电动(电迁移)进样等。进样时通过控制压力或电压及时间来控制进样量。 (5)检测系统紫外-可见光分光检测、激光诱导荧光检测、电化学检测和质谱检测均可用作毛细管电泳的检测器。其中以紫外-可见光分光光度检测器应用最广，包括单波长、程序波长和二极管阵列检测器。将毛细管接近出口端的外层聚合物剥去约2mm一段，使石英管壁裸露，毛细管两侧各放置一个石英聚光球，使光源聚焦在毛细管上，透过毛细管到达光电池。对无光吸收(或荧光)的溶质的检测，还可采用间接测定法，即在操作缓冲液中加入对光有吸收(或荧光)的添加剂，在溶质到达检测窗口时出现反方向的峰。 (6)数据处理系统与一般色谱数据处理系统基本相同。