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简单介绍一下关于药物高通量筛选技术的知识一.概念高通量筛选(High throughput screening,HTS)技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础,以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行试验过程,以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据,以计算机对实验数据进行分析处理,同一时间对数以千万样品检测,并以相应的数据库支持整个体系运转的技术体系。二. 高通量筛选技术体系的组成1. 化合物样品库化合物样品主要有人工合成和从天然产物中分离纯化两个来源。其中,人工合成又可分为常规化学合成和组合化学合成两种方法。2.自动化的操作系统自动化操作系统利用计算机通过操作软件控制整个实验过程。操作软件采用实物图像代表实验用具,简洁明了的图示代表机器的动作。自动化操作系统的工作能力取决于系统的组分,根据需要可配置加样、冲洗、温解、离心等设备以进行相应的工作。3.高灵敏度的检测系统检测系统一般采用液闪计数器、化学发光检测计数器、宽谱带分光光度仪、荧光光度仪等。4.数据库管理系统数据库管理系统承担4个方面的功能: 样品库的管理功能;生物活性信息的管理功能; 对高通量药物筛选的服务功能; 药物设计与药物发现功能。三. 高通量筛选模型常用的筛选模型都在分子水平和细胞水平,观察的是药物与分子靶点的相互作用,能够直接认识药物的基本作用机制。1. 分子水平的药物筛选模型:受体筛选模型;酶筛选模型;离子通道筛选模型1.1受体筛选模型:指受体与放射性配体结合模型。以受体为作用靶的筛选方法,包括检测功能反应、第二信使生成和标记配体与受体相互作用等不同类型。1.2酶筛选模型:观察药物对酶活性的影响。根据酶的特点,酶的反应底物,产物都可以作为检测指标,并由此确定反应速度。典型的酶筛选包括1) 适当缓冲液中孵化;(2)控制反应速度,如:温度,缓冲液的pH值和酶的浓度等;(3)单时间点数器, 需测量产物的增加和底物的减少。1.3离子通道筛选模型: (1)贝类动物毒素的高通量筛选,其作用靶为Na+通道上的蛤蚌毒素结合位点,用放射性配体进行竞争性结合试验考察受试样品。(2)用酵母双杂交的方法高通量筛选干扰N型钙通道β3亚单位与α1β亚单位相互作用的小分子,寻找新型钙通道拮抗剂。2.细胞水平药物筛选模型观察被筛样品对细胞的作用,但不能反映药物作用的具体途径和靶标,仅反映药物对细胞生长等过程的综合作用。包括: 内皮细胞激活; 细胞凋亡; 抗肿瘤活性; 转录调控检测; 信号转导通路; 细菌蛋白分泌; 细菌生长。四.问题及展望高通量筛选技术与传统的药物筛选方法相比有以下几个优点:反应体积小;自动化;灵敏快速检测;高度特异性。但是,高通量筛选作为药物筛选的一种方法,并不是一种万能的手段,特别是在中药研究方面,其局限性也是十分明显的。首先,高通量筛选所采用的主要是分子、细胞水平的体外实验模型,因此任何模型都不可能充分反映药物的全面药理作用;其次,用于高通量筛选的模型是有限的和不断发展的,要建立反映机体全部生理机能或药物对整个机体作用的理想模型,也是不现实的。但我们应该相信,随着对高通量筛选研究的不断深入,随着对筛选模型的评价标准、新的药物作用靶点的发现以及筛选模型的新颖性和实用性的统一,高通量筛选技术必将在未来的药物研究中发挥越来越重要的作用。
[font=宋体]高通量抗体库技术是一种创新的生物技术,能够高效快速地开发单克隆抗体。通过使用高通量抗体库技术,研究人员可以同时对多个抗原进行免疫反应,从而在短时间内产生大量的单克隆抗体。下面为大家介绍其特点和筛选步骤:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]高通量抗体库技术的特点包括:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]高通量:该技术可以同时对多个抗原进行免疫反应,从而在短时间内产生大量的单克隆抗体。[/font][font=宋体]快速:通过该技术,可以在短时间内得到针对特定抗原的单克隆抗体。[/font][font=宋体][font=宋体]高效:该技术采用合成生物学细胞重编程方法,建立了能够识别多样性未知抗原的合成免疫细胞组库,可以识别超过[/font][font=Calibri]10^6[/font][font=宋体]种抗原,大大提高了单克隆抗体的开发效率。[/font][/font][font=宋体]无偏见:该技术可以对任何抗原进行免疫反应,不受免疫原性限制。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]高通量抗体库技术的筛选步骤包括:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]提取抗原:从目标组织、细胞器或全蛋白组中提取蛋白。[/font][font=宋体][font=宋体]蛋白组分拆分:将蛋白组按照分子量进行拆分,每个组分包含[/font][font=Calibri]300-500[/font][font=宋体]个蛋白,从而降低蛋白组的复杂度并保证不同分子量的蛋白均获得满意的免疫效果。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫小鼠:将拆分后的蛋白组分分别免疫小鼠,制备[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]万[/font][font=Calibri]-5[/font][font=宋体]万个特异性识别目标蛋白组的单抗文库。[/font][/font][font=宋体]抗体筛选:通过抗体筛选试验,选择能够与目标抗原特异性结合的抗体。[/font][font=宋体]抗体优化:对筛选得到的抗体进行优化,以提高其亲和力和特异性。[/font][font=宋体]抗体鉴定:通过生物学实验和临床试验等方法,对优化后的抗体进行鉴定,确认其功能和特性。[/font][font=宋体]应用研究:将鉴定合格的抗体应用于研究和临床实践中,以解决实际问题。[/font][font=宋体]总之,高通量抗体库技术是一种高效、快速、无偏见的技术,可以用于开发针对任何抗原的单克隆抗体。其筛选步骤包括提取抗原、蛋白组分拆分、免疫小鼠、抗体筛选、抗体优化、抗体鉴定和应用研究等步骤。该技术的应用范围广泛,可以应用于基础研究、药物研发、诊断试剂开发等领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为了满足抗体药物筛选等对抗体高通量、快速表达不断增长的需求,义翘神州的重组抗体[url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][b]高通量表达纯化服务[/b][/url]结合了专业的高通量基因合成、载体构建和优化的瞬时抗体表达技术,充分利用义翘优势哺乳动物细胞表达平台,能够提供在[/font][font=Calibri]HEK293/CHO[/font][font=宋体]细胞中快速生产重组抗体服务。详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service[/font][/font]
一、膜分离制氧基本原理 气体在膜中传质过程的研究推算起来实际已有100多年历史了,人们对单一的气体在聚合物及其膜中传送进行了大量的研究, 从而在理论上得到了较好的发展。然而, 膜在实际中的应用却是近几十年间的事, 较突出的例子是核武器中同位素铀的分离。直到20世纪70年代末期,气体在聚合物膜中的渗透性和选择性已发展到具有工业化经济价值时,膜才像今天这样得到大规模应用。 一般说来,膜对所有气体都是可以渗透的,只不过渗透的程度不同而已。气体透过 中空聚合物膜是一个复杂的过程,其透过机制一般是气体分子首先被吸附到膜的表面溶 解,然后在膜中扩散,最后从膜的另一侧解吸出来,膜分离技术依靠不同气体在膜中溶 解和扩散系数的差异来实现气体的分离。当混合气体在一定的驱动力(膜两侧的压力差或压力比)作用下,渗透速率相当快的气体如水汽、氧气、氢气、氦气、硫化氢、二氧 化碳等透过膜后,在膜的渗透侧被富集,而渗透速率相对慢的气体如氮气、氩气、甲烷 和一氧化碳等被滞留在膜的滞留侧被富集从而达到混合气体分离的目的。 二、膜分离制氧设备的流程 根据分离条件中压力 不同,通常我们将膜制氧分成两种不同的工艺流程,用户可根据不同的工况要求,选择适合的流程以达到最低单耗的目的。 1、 高压流程膜制氧 压缩空气经预处理系统除去油、尘埃等固体杂质及大部分的气态水,预热后进入膜分离器,渗透速率相当快的气体如水汽、氧气、氢气、氦气、硫化氢、二氧化碳等透过膜后,在膜的渗透侧被富集,而渗透速率相对慢的气体如氮气、氩气、甲烷和一氧化碳等被滞留在膜的滞留侧被富集;系统在PLC或DCS系统的控制下可实现连续稳定的输出氧气。 2、 负压流程制氧 经鼓风机后的原料空气,净化除去粉尘再进入膜分离器,渗透速率相对慢的气体,如氮气、氩气、甲烷和一氧化碳等被滞留在膜的滞留侧富集后作为废气排出,以真空泵抽真空将渗透侧的富氧空气收集作为产品气。系统在PLC或DCS系统的控制下可连续获得稳定纯度的氧气。 三、膜分离制氧设备的特点 膜法氧氮分离设备主要特点 1、 装置工艺流程简单、结构紧凑、设备投资省 2、 装置占地面积小,可用于室内、外操作 3、 装置自动化程度高,开停车方便快捷;10分钟内达到氧浓度。 4、 无阀门切换等运动部件,不需定期更换易损件,维修量少。 5、 通过增加膜分离器,很容易扩大富氧空气产量。 6、 装置运行和维护费用较PSA法制氧低;在纯度25~35%的范围内,具有优越的性能 价格比。在助燃应用方面,它具有其它空气分离方法所不可比拟的优势,运行能耗较低。 7、 装置运行独立性强,稳定性好,可靠性高,常温低压下工作,安全性能好。 8、 装置规模可从0.2-50000 Nm3/h,产品氧气纯度可达25-45%; 四、膜分离制氧设备的基本组成 高压流程设备主要组成 /低压流程设备组成 1、空气压缩机 / 1、鼓风机组 2、空气源预处理组件/ 2、除尘、冷却器 3、空气缓冲罐/ 3、膜分离器 4、膜分离器/ 4、成品氧气缓冲罐 5、成品氧气缓冲罐/ 5、切换阀门及相应的管件 6、切换阀门及相应的管件/ 6、真空泵机组 7、自动控制、检测系统/ 7、氧气增压机 8、可扩展的增压系统/ 8、自动控制、检测系统 五、膜制氧设备安装运行条件 1、安装条件:安装现场应清洁、平整,吊车或叉车容易到达并进行安装; 2、使用环境要求:安装现场周围空气应干净、无油雾、无腐蚀气体,通风良好; 3、配套条件:电源:380V/50Hz/3相五线; 4、冷却水:符合工业用冷冻、冷却水。 六、膜制氧设备选型注意事项 1、在具体选型前首先确认对所需氧气设备最终产品气的要求,在制造厂商的建议下确定所需设备的流程; 2、考察设备设计的合理性(每一个配件的设置是否合理,必需,并发挥其最大功效); 3、考察设备运行的可靠性(考证设备设计中保证措施的合理性); 4、制造厂商研究开发能力、制造经验及水平; 5、 全面计算制氧设备的成本(设备价格、投入设备所必备的水、电、场地及其费用,设备的使用维护成本,设备的使用寿命),而不仅仅只考虑设备的价格。------------------------------------------------------------希望各位同行互相交流。E-mail:hongfun@hotmail.com