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[size=16px] ATP(腺苷三磷酸)荧光细菌检测仪是一种常用于快速检测水样中细菌污染程度的设备。它基于细菌存在时产生的细胞内能量分子ATP,并利用ATP与荧光染料的反应来检测细菌的存在。以下是ATP荧光细菌检测仪如何检测水中细菌的一般过程: 取样和样品制备: 从待检测的水源中取得一定数量的水样。样品可能需要进行预处理,如过滤或稀释,以确保样品中的颗粒物不会影响检测结果。 提取细菌的ATP: 通过一系列化学方法,细胞膜被破坏,使细菌内的ATP能够释放出来。这通常涉及使用一个称为提取缓冲液的溶液,它能够破坏细胞膜并释放细胞内的ATP。 荧光染料与ATP的反应: 一旦ATP被释放,它与荧光染料(通常是叫做“荧光素”的化合物)反应,产生荧光。荧光素与ATP结合后会发出强烈的荧光信号,这个信号的强度与提取的ATP量成正比。 荧光信号测量: 设备会使用荧光探测器测量荧光信号的强度。荧光强度的测量是快速且敏感的,可以在短时间内提供结果。 数据分析和结果显示: 通过与已知细菌样本的比较,可以确定荧光信号的强度与细菌的数量之间的关系。这样,设备可以根据荧光信号的强度,估计水样中细菌的数量或污染程度。 需要注意的是,尽管ATP荧光细菌检测仪在快速检测上非常有效,但它只能提供关于细菌总量的信息,而无法区分具体的细菌种类。此外,样本的处理和设备的操作都需要按照特定的方法和指南进行,以确保准确和可靠的结果。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308231557437534_6784_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]
用细菌杀死细菌病菌对抗生素产生了耐药性怎么办?或许可以用另一种细菌来杀死它。新加坡研究人员利用合成生物学手段,通过基因改造使大肠杆菌分泌专门的毒素,成功杀死绿脓杆菌。 绿脓杆菌是一种生存能力很强、对多种抗生素和消毒剂有耐药性的细菌。 不同类型的绿脓杆菌之间因生存竞争而存在“内战”,它们会分泌称为绿脓菌素的毒素,彼此攻击。每种绿脓菌素只对特定菌株起作用。新加坡南洋理工大学的研究人员利用这种特性,给大肠杆菌植入基因,使其分泌可杀灭感染人类的绿脓杆菌菌株的毒素。 在这种大肠杆菌作用下,实验室中培养的绿脓杆菌只有1%能够存活,绿脓杆菌形成的生物膜也比正常情况下稀薄得多。生物膜是由细菌及其分泌的物质形成的膜状物,毒性和耐药性比单个细菌更强。 不过这一方法目前还有缺陷,离实用尚有距离。研究小组正在设法改进这种方法,并在培养另一种大肠杆菌菌株,用于杀灭霍乱弧菌。
[size=4] 我们对现今应用较为普遍的VITEK-AMS鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(UIO)菌株作了进一步分析,探讨其发生原因、处理方法,以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。[/size][size=4] [b]一、材料与方法[/b][/size][size=4] 1. 仪器与试剂:VITEK-AMS 60型全自动细菌鉴定仪及其配套GNI、GPI、YBC试验卡(生物梅里埃公司产品)。[/size][size=4] 2. 试验菌株:1 025株本院1999.10.21-2000.3.3临床标本分离的菌株进行了Vitek- AMS鉴定,其中应用GNI 卡631例、GPI卡334例、YBC卡60例。[/size][size=4] 3.VITEK-AMS鉴定法:根据细菌表型特征,选择相应GNI+、GPI、YBC卡,严格按仪器操作说明进行,孵育后当检验地带网仪器报告结果为UIO时,挑取生长对照孔(GPI卡第1孔、GNI+卡第3孔、YBC卡第24孔)悬液于非选择性培养基上重新分离,观察是否纯培养,若是,分别按同法及以下两法鉴定。否则, 经纯培养后重新上机鉴定。[/size][size=4] 4. 双歧检索鉴定法:根据Vitek全自动微生物分析系统技术资料提供的双歧检索表,依生化结果检索至属或种。[/size][size=4] 5. 常规鉴定法:按照全国临床检验操作规程[1]进行,并经API系统(生物梅里埃公司) 复核鉴定至种。部分菌株鉴定依据文献[2]进行。 [/size][size=4] [b]二、结果[/b][/size][size=4] 1. UIO发生机率:总共1025株细菌鉴定中,共出现UIO 44株,占4.3%。其中GPI卡334株,出现UIO16株,占4.8%;GNI+卡631株,出现UIO 24株,占3.8%;YBC卡60株,出现UIO4株,占6.7%。[/size][size=4] 2.UIO发生原因:在44株出现UIO中,9株(0.9%)为待检细菌不纯,3株(0.3%)为浊度不合要求,2株(0.2%)为接种物孵育时间过长(超过48h),2株(0.2%)为超出试验卡鉴定范围(均为臭鼻克雷伯菌),1株(0.1%)为菌悬液不乳化(粘液型绿脓假单胞),其他如冲液时气泡过多,或其他原因不确定者27株(2.6%)。[/size][size=4] 3.处理:(1)9株不纯菌株,经纯培养后,重新上机,均能成功鉴定。(2)35株纯培养但报告UIO菌株中,18株(1.8%)可通过双歧检索法获得结果,并与常规分类法结果完 全一致。3株(0.3%)浊度不合要求者经调整浊度后重新上机获得结果。 2株(0.2%)接种物超过48h菌株,经重新孵育后得以鉴定。1株(0.1%)为悬液不乳化菌株经|检验地带网|配制3个麦氏单位菌悬液,然后低速离心1~2 min(1 000r/min),取上清液比浊并调节到所需的浓度后,得以鉴定。(3)余下11株(1.1%)菌中,仅2株(1株为大肠埃希菌,另1株为臭鼻克雷伯菌)不能从双歧检索表中查出结果,其他9株(主要为洋葱假单胞菌、琼氏不动杆菌、木糖产碱氧化杆菌等),虽能从双歧检索表获得结果,但与常规鉴定法结果不相符合,或出现矛盾的生化结果,需增加试验项目,按常规鉴定方法及 API系统报告结果。[/size][size=4] [b]三、讨论[/b][/size][size=4] 实验表明95.7%的临床分离菌株可通过VITEK-AMS正确鉴定,仅4.3%菌株无法一次性成功鉴定。细菌不纯是产生这部分菌株的主要原因(占近1/5),其他如待检菌菌龄、菌液浓度也是关系鉴定成败的关键。由于仪器本身原因(如对于罕见生物型、新种或不典型菌株无法鉴定)也不可忽视。正确处理这部分菌株,有重要的临床意义。实际应用自动化仪器时,必须挑取纯培养菌落,可提高鉴定率,对确认为纯培养而无法鉴定者,可通过传统分类法,参照双歧检索表能成功鉴定将近一半菌株,因此合理应用双歧检索表不失为一种较好的辅助方法。但仍有占总数1.1%菌株需用常规方法或其他方法如API系统重新鉴定。[/size][size=4] 参考文献[/size][size=4] 1,叶应妩,王毓三,主编. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京: 东南大学出版社,1997.5.[/size][size=4] 2,Patrick R. Manual of clinical Microbiology (7th Edition). Washington DC: American Society for Microbiology, 1999.316-647. [/size]