灵芝中多糖含量检测方案(抽提萃取)

智能文字提取功能测试中

SInEO新仪IGASSOX-017-201711 SOX-017-201711 海能仪器：索氏提取仪测定灵芝中多糖含量(索氏提取仪) 1前言 灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一。其有多方面的药理活性：能提高机体免疫力、加速血液微循环、提高血液供氧能力、降低机体静止状态下的无效耗氧量等。 本次带来的实验方案是水提醇沉淀+苯酚-硫酸光度法。整个实验水提部分使用 SOX406索氏提取仪，含量测定使用紫外可见分光光度计。分光光度法原理：灵芝多糖在酸性环境下水解为单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，在特定波长下，以比色法测定。 2 实验部分 2.1仪器 SOX406 索氏提取仪；i8紫外可见光-分光光度计；分析天平；鼓风干燥箱；干燥器；旋风磨；100mL量筒。 SOX406 索氏提取仪 i8紫外可见光-分光光度计 2.2试剂 实验用水应符合 GB/T6682 中三级用水的规格，使用试剂除特殊说明外，均为分析纯。 硫酸；苯酚；乙醇；葡萄糖；滤纸；脱脂棉。 3实验方法 3.1仪器准备 请参照说明书，清洗溶剂杯，干燥并称重记为mo。 3.2样品制备 将样品进行粉碎，精确称取样品品2.0g左右(记为m)，并用双层滤纸包包好，放入滤纸筒内。 3.3第一阶段提取 加入抽提溶剂水60mL， 打开冷凝水，启动脂肪测定仪406。设置第一阶段萃取时间2h；萃取温度140℃；实验结束完，将萃取液收集到烧杯内，并用少量蒸馏水由上端萃取口分多次淋洗样品，并入到烧杯内，溶剂杯内换入新的蒸馏水再次进行萃取。再重复此操作两次。 SOX406参数设置 试剂添加 60mL 萃取时间 2h 萃取温度 140℃ 预干燥时 0min 3.4浓缩 将烧杯置于带有石棉网的电炉上烘干至少量水时，在进行水浴烘干。 3.5醇沉淀 将残渣用5ml水溶解，边搅拌边缓慢地加乙醇75ml，摇匀，在低温环境下静置12小时，离心，弃去上层清液，沉淀物用热水溶解并转移至50ml容量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀。 3.6苯酚溶液配制 称取10.0g苯酚置于200ml容量瓶中，加水定容，置于棕色瓶中，避光保存。 3.7葡萄糖溶液配制 称取葡萄糖 0.1g 溶于100ml容量瓶中，并定容。取其中10ml 溶液于100ml容量瓶中，并定容，摇匀得 0.1mg/ml 溶液。 3.8.标准曲线建立 取5个10ml容量瓶，向其中加入 0.0，0.2，0.4，0.6，0.8ml葡萄糖溶液，依次加水1ml，苯酚1ml，浓硫酸5ml，振摇 5min ，置于40℃水浴15min，放冷定容至10ml，用紫外-可见分光光度法在 490nm波长处测定其吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 3.9样品测试 取样品0.5ml，按9中步骤进行依次加入各种试剂，进行测定。从标准曲线上，读出其浓度C(ug/ml). 4结果分析 根据药典规定，灵芝以无水葡萄糖计，可根据如下公式进行计算， 标准曲线 C=-1.556+119.1xA 样品编号 样品质量(g) 浓度(ug/mL) 吸光度(Abs) 多糖含量 (%) 1 2.0005 181.25 1.561 0.906 2 2.0020 181.85 1.565 0.908 注意事项 该实验每阶段收集时，建议多次淋洗。在萃取过程中，将样品浸入到萃取液中，可加速萃取速度。 -- -- 1 前言灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一。其有多方面的药理活性：能提高机体免疫力、加速血液微循环、提高血液供氧能力、降低机体静止状态下的无效耗氧量等。本次带来的实验方案是水提醇沉淀+苯酚-硫酸光度法。整个实验水提部分使用SOX406索氏提取仪，含量测定使用紫外可见分光光度计。分光光度法原理：灵芝多糖在酸性环境下水解为单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，在特定波长下，以比色法测定。2 实验部分2.1 仪器SOX406索氏提取仪；i8紫外可见光-分光光度计；分析天平；鼓风干燥箱；干燥器；旋风磨；100mL量筒。2.2试剂实验用水应符合GB/T6682中三级用水的规格，使用试剂除特殊说明外，均为分析纯。硫酸；苯酚；乙醇；葡萄糖；滤纸；脱脂棉。