发酵食品中组胺检测方案(液相色谱仪)

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科捷仪器KEJIEINSTRUMENT电话：139-5161-2855网址： www.kj17.com 仪器准备 高效液相色谱法测定发酵食品中组胺的含量 生物胺是一类具有生物活性含氮的低分子量有机化合物的总称。可以看作是作分子中 1-3个氢原子被烷基或芳基取代后而生成的物质，是脂肪族、酯环族或杂环族的低分子量有机碱，常存在于动植物体内及食品中。生物胺引起的食品安全问题，也就是生物胺的毒性作用。其中组胺对人类健康的影响最大，其次是酪胺。除了组胺、酪胺本身的作用外，其他生物胺的存在会增强组胺和酪胺的不良作用。 高效液相色谱具有分析速度快、柱效高、检测灵敏度高、定量分析准确的特点，是目前食品中生物胺含量分析测定的主要手段。生物胺分子中缺少发色基团，本身既无紫外吸收、又无荧光及电化学活性。为了提高检测的灵敏度及其响应，必须衍生后才能检测。 本文以丹酰氯为衍生试剂，采用柱前衍生--高效液相色谱法来分析食品中组胺的含量，通过对市售不同品牌的大豆发酵制品(豆豉、豆酱和酱油)、酸奶和啤酒中组胺含量的测定，对各种食品的组胺含量有一个初步的了解，为保障食品安全提供技术依据。 仪器简介 LC-600A智能全控液相色谱系统由 P600 高压恒流泵与 UV600 紫外检测器直接构成等度分析系统。使用 WS600 工作站可以同时控制数台 P600 高压恒流泵、UV600 紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。 应用领域 化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析 传真：025-83738955 南京科捷分析仪器有限公司 QQ：2326515893 柱前衍生 取样品提取液 0.25mL，加入25uL2mol/L 的氢氧化钠调节 pH 值，加入75L饱和碳酸氢钠溶液和 0.5mL10mg/mL丹酰氯-丙酮溶液，摇匀，于40℃水浴下避光反应45min；反应毕，取出加入25uL25%的浓氨水，静置30min， 用乙腈定容至1.25mL， 振荡混匀。将衍生后溶液用 0.45um 针头微孔滤膜过滤器过滤，用高效液相色谱测定。 色谱条件： 色谱柱 Hypersil-C18色谱柱(250×4.6mmI.D.粒径5um) 柱温 室温 流动相 V(乙腈)：V(水)=60：40 流速 1.0mL/min 紫外检测波长 254nm 进样量 20uL 采样时间 30min 谱图： 图1 组胺标准色谱图 ( 传真：025-83738955 5 1 南京科捷分析仪器有限公司 QQ：2326515893 ) 生物胺是一类具有生物活性含氮的低分子量有机化合物的总称。可以看作是氨分子中1-3个氢原子被烷基或芳基取代后而生成的物质，是脂肪族、酯环族或杂环族的低分子量有机碱，常存在于动植物体内及食品中。生物胺引起的食品安全问题，也就是生物胺的毒性作用。其中组胺对人类健康的影响*大，其次是酪胺。除了组胺、酪胺本身的作用外，其他生物胺的存在会增强组胺和酪胺的不良作用。