茶叶中农药残留检测方案

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GC-NCI-MS分析茶叶中17种有机氯和拟除虫菊酯农药残留 茶叶试样中8种有机氯和9种拟除虫菊酯农药采用了空白试样基体匹配校准曲线法(MC 法)定量分析。在减小基体效应的 仪器与试剂 仪器： GC/MS-QP 2010气-质联用仪；超声波清洗器； 电热恒温水浴锅宏实验；氮吹浓缩装置。 试剂：丙酮、正己烷和乙酸乙酯均为农残级试剂；无水硫酸钠(AR)，650℃马弗炉中烘烤 4h； Florisil 硅藻土(AR)，100~200目，650℃马弗炉中烘烤4h，加5 茶叶试样的前处理过程 提取：称取经磨碎的茶叶试样 1.00g，用20mLV正己烷/V丙酮=1/1混合提取剂超声提取 10min，转移出上层有机提取液；残渣再用10mL 混合提取剂超声提取5min， 合并两次提取液，加适量无水硫酸钠除水后，氮吹浓缩至 5mL。 净化：在20cm(长)×1.5cm(内径)玻璃层析柱内填入适量的玻璃毛，再依次填入1cm 高无水NazSO4、2.0 g Florisil 硅藻土、1.0g中性氧化铝和 1cm 高无水 NazSO4； GC-NCI-MS 分析条件 色谱条件： DB-5MS 毛细管柱(30m×0.25mm×0.25pm)； He载气(>99.999%)；柱头压 61.8kPa；载气恒线速度36.8cm°s-1；不分流进样 1.00uL；进样口260℃；气-质接口250℃。柱升温程序：80℃→10℃·min升至2200℃→ 方法中，由于空白试样基体匹配校准曲线法(Matrix-matched Calibration， 简称：MC法)简便、实用和效果显著而被广泛应用。 %超纯水去活；层析用中性氧化铝，550 ℃马弗炉中烘烤 4h，加8%超纯水去活。农药标准物质：六六六(a、β、、￥、8)、p.p’-(DDE、DDD、DDT)、o.p’-DDT、联苯菊酯、、1甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯和环氧七氯内标物，氟氯氰菊酯。 先用10mL 正己烷淋洗层析柱，再将浓缩后的提取液转移至层析柱内，然后用20mLV正己烷/V乙酸乙酯=95/5混合洗脱剂洗脱，洗脱液氮吹浓缩近干后，加入1.00mL 100ng° mL"环氧七氯溶液，氮吹定容至1.00mL， 供以下仪器分析。 加标回收试样的制备：准确称取空白茶叶试样后，加入不同浓度17种农药的混合标准溶液，放置过夜，按照上述方法提取、净化和浓缩。 5℃min升至265℃→20℃·min升至290℃(保留7 min)。 质谱条件： NCI离子源；甲烷反应气(>99.95%)；离子化电压 70eV；离子源200℃；溶剂切除时间 5.0min。 NCI-MS 特征离子的选择 图1是氰戊菊酯农药(a)和氟胺氰菊酯农药(b)的 NCI-MS 和主要特征离子结构的解析图，图中可以看出这两种农药的NCI-MS 都仅由少数相对丰度较高的特征阴离子组成，与 EI-MS 相比离子的碎片少且相对丰度高。在选定的色谱条件下，根据每个色谱峰的质谱图选择2~3个相对丰度较高和质荷比较大的特征阴离子进行选 择离子监测方式(Selected MonitoringMode， 简称：SIM)定量分析。内标物和17种农药的色谱保留时间和特征离子选择见表1。分析结果表明这些特征离子反映出分析物质的主要特征，分析的灵敏度高、选择性好、基体效应影响小和定量分析准确。 Fig.1 (a)氰戊菊酯 NCI -MS图.(b)氟胺氰菊酯 NCI-MS 图. GC-NCI-MS分析 17种农药和内标物的色谱峰都可以完全分离，其中农药(11)、(12)、(15)和(16)分别出现两个同分异构体色谱峰，农药(13)和(14)出现四个同分异构体色谱峰。虽然农药(15)和(16)的一个同分异构体色谱峰 重叠(15+16)，但可通过选择两种农药各自特征阴离子进行定量分析。有机氯农药特征阴离子 Cl (m/z=35)、HCI(m/z=71、73)的电负性强且相对丰度高，因此具有高选择性和高灵敏度。 Fig.2 100ng*mL 内标和 200ng*mL"的17种有机氯的 GC-NCI-MS SIM 图 表1 17种农药溶剂曲线法(SC) 和空白试样基体匹配校准曲线法 (MC)的 GC-NCI-MSSIM 保留时间、特征离子、线性方程响应因子(r)和方法检出限(MDL) 农药名称 线性方程，响应因子(r) 和 MDL 保留时间 特征离子 SC MC MDL' MDL y=a’xx+b’ MDL' a'/a /MDL /pgkg-i a b’ r' /ugkg- /min m/z y=axx+b b a rr 0.993 -0.020 0.9999 0.06 1.002+0.037 0.9997 0.10 1.01 1.67 2.B-BHC 6.0~14.0 35，71，73 0.382 -0.020 0.9998 0.19 0.365+0.0040.9998 0.30 0.96 1.58 3.Y-BHC 0.782-0.018 0.9997 0.07 0.723+0.049 0.9992 0.42 0.92 6.00 4.6-BHC 0.835 -0.033 0.9997 0.08 0.889 +0.020 0.9999 0.38 1.06 4.75 IS.heptachlor epoxide 14.0~17.5 5.p.p'-DDE 17.5~19.0 1.194 -0.114 0.9997 0.08 1.077 -0.0410.9998 0.14 0.90 1.75 6.p.p'-DDD 35，37 0.272 -0.057 0.9997 0.01 0.639 +0.019 0.9999 0.19 2.35 19.0 7.o.p'-DDT 19.0~21.5 0.054 -0.095 0.9918 0.20 0.125 -0.0120.9999 0.50 2.31 2.50 8.p.p'-DDT 0.038-0.0410.9798 0.12 0.092-0.0490.9999 0.37 2.42 3.08 9.bifenthrin 21.5~23.5 205，241 0.041 -0.006 0.9961 1.3 0.063 -0.0060.9984 2.3 1.54 1.77 10.fenpropathrin 141，142 0.080 -0.003 0.9917 0.65 0.191 -0.012 0.9965 0.70 2.39 1.08 11.cyhalothrin 23.5~25.0 205，241，243 0.118+0.008 0.9975 0.20 0.264+0.0270.9998 0.27 2.24 1.35 12.permethrin 25.0~26.3 35，207，209 0.008 -0.001 0.9964 6.0 0.016-0.002 0.9974 8.3 2.00 1.38 13.cyfluthrin 0.075+0.003 0.9978 0.75 0.176 +0.011 0.9998 1.2 2.35 1.60 26.3~27.7 171，207，209 14.cypermethrin 0.057 -0.000 0.9959 1.0 0.154-0.0130.9964 1.8 2.70 1.80 15.fenvalerate 27.7~29.5 211，213 0.074 +0.003 0.9975 0.69 0.189+0.011 0.9996 0.81 2.55 1.17 16.fluvalinate 294，296 0.095 -0.0020.9985 2.0 0.220+0.013 0.9984 0.75 2.32 0.38 17.deltamethrin 29.5~34.0 79，81，137 0.026 -0.000 0.9968 2.0 0.050+0.003 0.9998 2.69 1.92 1.35 表2 茶叶样品 SC 和 MC的回收率和相对标准偏差(5次重复)，茶叶样品 MC 方法结果 平均回收(±RSD)/% 茶叶样品 MC 方法结果 SC MC 农药名称Wolong Green Black Flower 20 50 200 20 50 200tea tea tea tea /pgkg /pgkg /pgkg 1.a-BHC 97.9(±5.6)96.3(±6.5)94.1(±5.4) 96.2(±4.5)99.5(±3.3)98.1(±1.0) 2.B-BHC 99.1(±6.2)91.2(±6.7)92.5(±7.8) 101(±4.9)94.2(±4.6)101(±5.5) 3. Y-BHC 78.1(±7.8)79.9(±7.8)93.9(±13) 97.1(±7.5)94.8(±5.3)96.8(±6.0) 4.8-BHC 103(±5.8)91.7(±4.6)96.8(±3.8) 95.5(±2.3)98.4(±5.8)95.9(±2.2) 5.p.p'-DDE 110(±6.2)99.8(±4.1)96.1(±4.5) 118(±1.9)107(±2.7)101(±2.0) 14.0 3.9 4，1 4.9 6.p.p-DDD 107(±10) 106(±7.4)90.3(±7.5) 94.4(±6.3)94.3(±3.6)90.1(±5.5) 9.44 7.0.p-DDT 191(±34) 126(±26) 88.4(±21) 68.5(±19)77.4(±14)80.1(±16) 8.p.p'-DDT 112(±41) 136(±31) 83.5(±34) 67.9(±17)75.1(±13)82.3(±12) 9.bifenthrin 117(±26) 105(±18) 92.8(±23) 103(±6.5)70.8(±18) 93.3(±7.6) 285 10.fenpropathrin 152(±19) 142(±14) 111(±17) 101(±7.5)82.2(±11)83.3(±8.5) 220 8.67 11.cyhalothrin 141(±31) 139(±18) 71.2(±16) 92.9(±6.6)78.4(±8.6)84.5(±6.5) 127 0.47 “-”：未检出. 采用 GC-NCI-MS SIM SC 定量分析，拟除虫菊酯类农药在低加标浓度(20Hg/kg)时，加标回收率普遍偏高，随着加标浓度的升高基体诱导色谱响应增强的影响逐渐减小，加标回收率逐渐降低；以GC-NCI-MS SIM MC 定量分析拟除虫菊 ( 注：数据出自厦门大学化学化工学院 ) l2.permethrin 163(±26) 132(±25) 81.8(±13) 77.8(±20)83.6(±18)91.4(±11) 13.cyfluthrin 171(±32) 158(±22) 93.9(±9.6) 94.0(±14)80.7(±10)94.1(±8.7) 14.cypermethrin 208(±32) 187(±30) 108(±10) 96.9(±18)90.7(±13)97.9(±8.3) 1035 19.5 28.6 15.fenvalerate 287(±28) 228(±29) 122(±7.4) 112(±9.3)117(±3.1)90.8(±7.5) 37.6 12.1 21.1 16.fluvalinate 291(±20) 208(±28) 121(±14) 69.5(±10)88.9(±11)99.3(±3.1) 17.deltamethrin 219(±17) 203(±14) 136(±9.5) 129(±9.0)97.1(±10)90.0(±3.1) — 酯类农药的加标回收率明显得到改善。对于农药(1)~(5)，几乎不存在基体效应的影响，而对于农药(6)~(17)，则存在大小不同的基体诱导色谱响应增强的影响，17种农药 GC-NCI-MS MC分析的加标回收率为67.9%~129%， RSD 为1.0%~20%。