生物样品预处理-样品冷冻干燥及结合物水解

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生物样品预处理 -样品冷冻干燥及结合物水解 1.1样品冷冻干燥 冷冻干燥是-种储存和预处理生物样品的有效方法，但其针对性比较强，主要适用于大量和被检测药物的水溶性比较强样品，此方法也适用于挥发性较强的药物。此外还有--种情况就是有些被测药物需要衍生才能被检测到，若采用液-液萃取则需要进行样品浓缩，在一定温度下会导致被测药物分解，此时采用冷冻方法最为合适。 基本原理是将样品冷冻，其中的水分会形成冰壳附着在样品表面，增大了挥发面积，再将其放入冻干机减压，冰则直接升华，其他杂质也会一并挥发掉。但如果被测药物挥发性过强，也可能损失一部分。 冷冻干燥生物样品时可先将其置于冰-丙酮浴，液氮中或其他低温条件下。半固体样品如粪便、组织等冷冻时间为 1-10min 即可放入冻干机中。 1.2结合物水解 药物在体内第二相代谢反应之后，常形成葡萄苷酸或硫酸脂等结合物。使一些药物无法以游离状态存在。如果想要检测母体药物浓度就需要将其水解后再进行测定。 1.2.11酸水解 酸水解，通常使用无机酸，如尿样中结合物水解可加入适量的盐酸溶液。至于加入盐酸的浓度、酸化时间及加热温度则需要根据具体实验而定。有的药物结合物水解需要温和的实验条件，如加入 0.5moL/L 盐盐后放置 15min 即可，有的则需要剧烈的实验条件，如加入3moL/L 盐酸后还必须煮沸1h，水解后样品成酸性，必要时刻加入碱性物质调整 pH值再进行药物提取。 1.2.2酶水解 酶水解是专属性很强的一种水解方法，使用最为广泛的的水解酶是β-葡萄糖苷酸酶(B -glucuronidase) 和芳基硫酸酯酶 (arylsulfatase)，一前者可专门水解药物的葡萄糖醛酸苷。后者水解药物的硫酸酯。也可用两者的混合物将两者同时水解。尿液中含有葡萄苷酸或硫酸脂两种物质，故使用混合酶更具有实用价值， 大致步骤为按照不同酶试剂要求控制一定的 pH值(4.5-7.0)加入水解酶后厌氧温育16h。 1.2.3溶剂解 某些药物或内源化合物的硫酸酯，可随加入的萃取溶济，再萃取过程中发生分解，通常称为溶剂解。其也是一种较温和的水解方法。如尿液中的甾体激素硫酸脂结合物，再pH为1条件下加入乙酸乙酯萃取时，则发生分解，释放出的甾体激素被萃如乙酸乙酯中。 水解反应温度很重要，有些实验还需要反应的同时进行摇晃振荡，我公司可提供以下仪器。 HWT系列恒温水浴箱 HWT-20B HWT-6 B HWT-10B 仪器介绍 HWT系列恒温水浴箱为实验室加热恒温的常规装置。现广泛用于微生物临床试验室培养、恒温反应、样品浓缩及其他常规实验中。 主要特点 1.温度调节采用 PID 技术、数字显示。 2.先进的 PTC 加热元件，升温平稳。运行安全可靠。 3.装置表面使用不锈钢材料，耐腐蚀性强。 4.触摸式调节按键，温度调节方便自如。 技术参数 型号 HWT-2B HWT-6B HWT-10B HWT-20B 温控精度(℃) ±1 温控范围(℃) 室温-------100 温控方式 4位数显/PID 调节/过热保护/PTC加热 加热容量(L) 2 6 10 20 槽内尺寸(mm) 150×135×100 300×150×150 300×250×150 500×300×150 电源功率(W) 150 240 300 800 重量(kg) 1.5 5 9 18 HWT系列恒温水浴摇床 1.无碳刷直流电机，低噪音、无振动、免维护、使用寿命长。 2.内置反馈控制系统，保证转速的稳定。 3.数字式 PID 控制器，具有自动微调动功能达到精确温控，软键盘操作。 4.可选择往复式摇床活动轨道式摇床。 5.微电脑控制，触摸式按键，温度速度 LED 显示。 6.独立的过温保护装置。 型号 HWT-10C HWT-20C 温控精度(℃) ±1 温控方式 4位数显/PID 调节/过热保护/PTC加热 温控范围(℃) 室温-------100 振荡方式 往复式 加热容量(L) 10 20 槽内尺寸(mm) 500×290×440 730×330×460 电源功率(W) 100 2100 振荡范围(mm) 0-20 0-24 转速(rpm) 10-200 10-200