蔬菜中农药残留检测方案

智能文字提取功能测试中

GC-MS/MS 法测定复杂基质(生姜、油麦菜)中多农药残留 摘要： 建立了三重四极杆气质联用仪 GC-MS/MS 同时检测复杂基质(生姜、油麦菜)中50多种农药多残留(农业部年度考核农药)的分析方法。为减少基质增强效应对农药残留分析的影响，采用空白基质配制标准溶液，在1~100 ug/L 浓度范围内，各农药的相关系数均在0.997以上。对 1ug/L 的标准溶液连续6针进样，峰面积的RSD%均小于8.0%，绝大数农药的最低检出限 (LOD) 在 1 ug/kg 以下。在 1 ug/kg 和5 ug/kg 的加标浓度下，大部分农药的加标回收率在 70.0~120.0%之间，完全满足日常检测对农药残留分析的要求。 关键词： GC-MS/MS农药残留生姜 油麦菜 农业生产中广泛使用农药以提高产量，但农药残留危害也日趋严重。发达国家相继建立了蔬菜中更低浓度的农药限定标准，如欧洲指南91/414/EEC 和美国食品质量保护法案(FQPA)等。我国从20世纪90年代初开始研究农药多残留分析方法，并相继推出了一系列国家标准分析方法，农药多残留检测在我国得到了快速发展。 由于蔬菜样品的组成成分复杂，对样品中的农药残留进行直接测定时，需要对样品进行提取、净化以减少其杂质的影响。但对于基质非常复杂的样品如生姜、大葱等，简单的净化不能满足分析要求，传统的检测手段如 ECD、FPD、NPD和 GCMS 等技术也有其局限性，容易造成定性不准确。串联质谱因其分析结果更准确、口可靠、灵敏，正逐渐应用于农药残留分析。 本实验利用三重四级杆气质联用仪，建立了同时测定蔬菜中50多种农药残留的方法，取得了较好的效果。测定的农药参照了农业部年度考核的50多种农药，农药种类涵盖了有机磷、有机氯以及拟除虫菊酯类农药，具有一定的代表性。由于使用了基质校准溶液和多反应监测模式(MRM)减少了基质效应，有效降低了背景干扰，提高了分析灵敏度，使各待测物的方法测定下限在0.003~3.061ug/kg范围，适用于日常的农药残留痕量检测工作。 1.实验部分 1.1仪器 三重四极杆气质联用仪： GCMS-TQ8030(岛津公司) 1.2分析条件 色谱柱： Rxi-5 ms，30mx0.25mmx0.25u.m 进样口温度：250℃ 柱温程序：50℃(1min) -(25℃/min)-150℃-(10℃/min)-300℃(5 min) 恒线速度方式：47.6cm/sec 进样方式：不分流进样不分流时间： 1min 高压进样：250kpa (1min) 离子源：200℃ 传输线：230℃ 检测器电压：相对调谐电压+0.3kv 溶剂切割时间：：1.5min MRM 采集条件见表1 1.3样品制备 1.3.1标准溶液配制： 称取一定量的各农药标准品，用正己烷稀释至 200ug/L 作为使用液备用。 1.3.2样品处理方法： 样品前处理参照 GB/T 19648-2006进行处理，见下图1所示. 表1农药组分保留时间及 MRM 参数 43 16.564 三唑磷 (Triazophos 257>162(8) 257>134(22) 24017-47-8 44 17.022 p，p'-DDT 235>165(22) 235>199(14) 50-29-3 45 17.729 异菌脲 (Iprodione) 314>245(12) 314>56(22) 36734-19-7 46 17.859 亚胺硫磷(Phosmet) 160>133(14) 160>77(24) 732-11-6 47 17.893 联苯菊酯(Bifenthrin) 181>166(12) 181>153(8) 82657-04-3 48 18.074 甲氰菊酯 (Fenpropathrin) 265>210(12) 265>172(14) 39515-41-8 49 18.691 氯氟氰菊酯-1(Cyhalothrin-1) 197>161(8) 197>141(12) 68085-85-8 50 18.868 氯氟氰菊酯-2(Cyhalothrin-2) 197>161(8) 197>141(12) 68085-85-8 51 19.678 氯菊酯-1 (Permethrin-1) 183>168(14) 183>165(12) 52645-53-1 52 19.803 蝇毒磷 (Coumaphos) 362>109(14) 362>226(12) 56-72-4 53 19.806 氯菊酯-2(Permethrin-2) 183>168(14) 183>165(14) 52645-53-1 54 19.655 哒螨灵 (Pyridaben) 147>117(22) 147>132(14) 96489-71-3 55 20.212 氟氯氰菊酯-1 (Cyfluthrin-1) 226>206(14) 226>199(6) 68359-37-5 56 20.309 氟氯氰菊酯-2 (Cyfluthrin-2) 226>206(14) 226>199(6) 68359-37-5 57 20.370 氟氯氰菊酯-3 (Cyfluthrin-3) 226>206(14) 226>199(6) 68359-37-5 58 20.411 氟氯氰菊酯-4 (Cyfluthrin-4) 226>206(14) 226>199(6) 68359-37-5 59 20.537 氯氰菊酯-1 (Cypermethrin-1) 181>152(22) 181>127(22) 52351-07-8 60 20.638 氯氰菊酯-2 (Cypermethrin-2) 181>152(22) 181>127(22) 52351-07-8 61 20.699 氯氰菊酯-3 (Cypermethrin-3) 181>152(22) 181>127(22) 52351-07-8 62 20.703 氟氰戊菊酯-1 (Flucythrinate-1) 199>157(10) 199>107(22) 70124-77-5 63 20.895 氯氰菊酯-4 (Cypermethrin-4) 181>152(22) 181>127(22) 52351-07-8 64 20.895 氟氰戊菊酯-2 (Flucythrinate-2) 199>157(8) 199>107(22) 70124-77-5 65 21.430 氰戊菊酯-1 (Fenvalerate-1) 419>225(6) 419>167(12) 51630-58-1 66 21.544 氟胺氰菊酯-1 (Fluvalinate-1) 250>55(18) 250>200(20) 69409-94-5 67 21.609 氟胺氰菊酯-2 (Fluvalinate-2) 250>55(20) 250>200(20) 69409-94-5 68 21.637 氰戊菊酯-2 (Fenvalerate-2) 419>225(6) 419>167(12) 51630-58-1 69 21.890 苯醚甲环唑-1(Difenoconazole-1) 323>265(14) 323>202(28) 119446-68-3 70 21.959 苯醚甲环唑-2(Difenoconazole-2) 323>265(14) 323>202(28) 119446-68-3 7D 21.998 溴氰菊酯-1 (deltamethrin-1) 253>93(18) 253>172(4) 52918-63-5 72 22.216 溴氰菊酯-2(deltamethrin-2) 253>93(20) 253>172(8) 52918-63-5 2.结果 2.1标准样品的 TIC图 图 2 100ppb的 TIC图 2.2标准曲线 使用空白基质溶液分别配制浓度为1、5、10、20、50、100 ug/L 的混合农药标准溶液，以环氧七氯为内标(浓度28pg/L)。以浓度比作为横坐标，峰面积比作为纵坐标，绘制标准曲线如下图所示，相关系数及检出限见表2. y-六六六 特丁硫磷 地虫硫磷 Area Ratio 50- 25- 0 Conc.Ratio 二嗪农 磷胺Area Ratio 嘧霉胺 Area Ratio 50- 25- Conc. Ratio 8-六六六 乙烯菌核利 甲基对硫磷 Area Ratio Area Ratio Area Ratio 50- 25- 0 Conc. Ratio 毒死蜱 10200- Area Ratio 0- 0- Conc. Ratio Conc. Ratio Canc Ratin 甲氰菊酯 氯氟氰菊酯 氯菊酯 氟胺氰菊酯 苯醚甲环唑 溴氰菊酯 表2各农药标准曲线相关系数及最低检出限(LOD) No. 化合物名称 相关系数r LOD (pg/kg) 甲胺磷 0.9983 3.061 2 敌敌畏 0.9999 0.030 3 敌百虫 0.9999 0.036 4 氧乐果 0.9978 0.112 5 灭线磷 0.9997 0.250 6 治螟磷 0.9998 0.010 7 久效磷 0.9990 0.224 8 甲拌磷 0.9999 0.012 9 α-六六六 0.9998 0.051 10 乐果 0.9995 1.327 11 β-六六六 0.9999 0.023 12 五氯硝基苯 0.9999 0.026 54 氰戊菊酯 0.9999 0.110 55 氟胺氰菊酯 0.9998 0.146 56 苯醚甲环唑 0.9994 0.029 57 溴氰菊酯 0.9997 0.452 2.3重复性测试 取空白基质质制的 1 ug/L 的混合标准溶液，重复进样6次，重复性结果见表3。 表3山峰面积重复性结果 No. 化合物名称 1 2 3 4 5 6 RSD% 甲胺磷 3986 4423 4209 4283 4391 4793 6.17 敌敌畏 6263 6103 5979 5957 6285 6486 3.30 敌百虫 5962 6081 6290 6235 6428 6395 2.91 4 氧乐果 29246 31275 32701 31797 35320 32683 6.21 5 灭线磷 8729 8502 8925 8999 9193 9162 2.97 6 治螟磷 4761 5020 5298 5162 4412 4779 6.53 久效磷 10846 11179 10885 10774 11493 10372 3.48 甲拌磷 4255 4657 4343 4483 4867 4649 4.98 9 α-六六六 1513 1645 1591 1584 1653 1385 6.42 10 乐果 2233 2456 2111 2433 2131 2169 6.76 11 β-六六六 4442 5134 4594 4329 4978 4899 6.79 12 五氯硝基苯 2280 2327 2484 2271 2663 2427 6.24 13 Y-六六六 2253 2693 2416 2684 2354 2474 7.18 14 特丁硫磷 9343 9317 8952 9772 9168 9624 3.17 15 地虫硫磷 13227 12887 12032 13423 14234 14926 7.56 16 二嗪磷 6115 6109 6230 5810 7067 6256 6.79 17 磷胺 3478 3653 3721 4013 3570 3623 5.01 18 嘧霉胺 13059 12552 12700 11401 11137 12068 6.24 19 8-六六六 2758 2780 2906 3084 2828 2974 4.33 20 乙烯菌核利 4240 3593 4116 4219 4271 3898 6.52 21 甲基对硫磷 6430 6669 6837 6850 6660 6171 3.95 22 杀螟硫磷 6750 6033 6668 6029 6489 6145 5.11 23 马拉硫磷 12391 12736 12389 12630 13166 13508 3.50 24 毒死蜱 16422 16784 16182 16227 16658 16553 1.45 25 对硫磷 5323 5632 5686 5365 5595 5928 3.98 26 三唑酮 9409 10193 10975 9168 10657 9973 6.94 27 水胺硫磷 3243 2802 3223 3278 3291 3220 5.84 28 三氯杀螨醇 3723 3843 3908 4232 3562 4204 6.77 32 稻丰散 5920 5736 5717 5693 5961 5314 4.00 33 喹硫磷 7382 6987 8209 7830 8069 8621 7.51 34 腐霉利 18592 18510 18031 19449 20208 19209 4.11 35 杀扑磷 6633 6594 6953 6841 7163 7135 3.52 36 α-硫丹 147 162 163 161 156 163 3.96 37 丙溴磷 2508 2142 2299 2073 2214 2382 7.06 38 p，p'-DDE 1822 1532 1562 1755 1859 1784 8.03 39 p，p'-DDD 42629 41691 43952 42502 43373 44236 2.24 40 0，p'-DDT 3363 3078 3164 3065 3090 3320 4.10 41 三唑磷 3133 3153 3587 2897 3326 3267 7.12 42 p，p'-DDT 9448 8781 9183 8353 8814 9252 4.44 43 异菌脲 3137 3048 3233 3332 3261 3276 3.23 44 亚胺硫磷 36431 38090 36724 37678 35833 36758 2.24 45 联苯菊酯 80493 84853 81571 88821 86168 85534 3.63 46 甲氰菊酯 5824 5708 5768 5121 5154 5549 5.63 47 氯氟氰菊酯 3392 4063 3479 3716 3825 4127 7.94 48 氯菊酯 17453 19802 19112 19181 18371 17339 5.38 49 蝇毒磷 7175 7797 7494 7423 7393 7577 2.77 50 哒螨灵 8175 9368 9685 9560 9874 9958 6.93 51 氟氯氰菊酯 5892 6043 6149 7025 6119 6128 6.47 52 氯氰菊酯 8547 8829 9039 9953 9842 9523 6.14 53 氟氰戊菊酯 10135 11507 10500 11675 11085 12333 7.18 54 氰戊菊酯 1887 1808 2063 1953 2090 1888 5.64 55 氟胺氰菊酯 5038 5594 5617 5956 5743 5754 5.45 56 苯醚甲环唑 45544 45726 46755 48316 48938 48005 3.00 57 溴氰菊酯 2534 2689 2594 2783 2724 2507 4.18 2.4回收率测试 分别在空白的生姜及油麦菜基质中加入农药混标，添加浓度为 1 ug/kg 和 5 ug/kg，分别平行处理3份，两种基质的加标回收率(3次平行样平均回收率及 RSD%) 结果见表4. 表4加标回收率 No. 化合物名称 加标浓度 1 ug/kg 加标浓度 5 ug/kg 油麦菜 RSD 生姜 RSD% 油麦菜 RSD% 生姜 RSD% 回收率 % 回收率 回收率 回收率 甲胺磷 114.4 2.69 32.7 12.46 69.0 4.34 66.6 11.90 2 敌敌畏 75.7 2.82 70.9 2.16 74.6 4.78 87.7 5.67 敌百虫 75.8 1.93 70.5 2.21 74.6 4.53 88.0 6.06 4 氧乐果 72.3 7.84 74.6 4.58 80.1 4.10 103.0 2.31 5 灭线磷 88.1 6.90 81.4 2.41 133.6 8.89 6 治螟磷 88.6 1.72 56.4 2.13 76.7 2.20 37.7 7.55 7 久效磷 86.6 3.94 70.1 3.09 81.7 5.51 54.5 5.30 8 甲拌磷 82.4 0.85 57.7 2.74 80.5 2.44 69.2 1.78 α-六六六 86.5 6.64 47.2 11.07 84.5 2.85 50.6 8.86 10 乐果 82.3 6.43 136.9 18.32 93.2 2.93 101.6 12.00 11 β-六六六 90.9 0.52 106.5 2.41 87.3 1.13 100.7 1.61 12 五氯硝基苯 88.5 4.80 78.0 7.8 82.8 0.99 102.8 3.68 13 Y-六六六 89.6 5.26 74.4 5.09 75.1 3.48 107.2 2.46 14 特丁硫磷 88.5 4.79 73.9 2.73 68.3 8.85 96.4 2.00 15 地虫硫磷 91.1 2.32 73.8 2.14 74.4 4.50 94.8 2.30 16 嗪磷 80.5 3.14 74.4 1.42 86.5 2.29 94.8 1.95 17 磷胺 99.5 3.31 46.3 6.66 107.4 4.90 95.3 4.45 18 嘧霉胺 92.7 5.04 112.4 3.61 84.6 5.28 106.0 5.48 19 8-六六六 96.2 3.26 160.7 4.66 86.6 2.31 149.2 2.62 20 乙烯菌核利 90.5 1.43 75.1 0.82 87.4 5.08 96.8 2.58 21 甲基对硫磷 99.6 2.80 83.5 1.3 92.9 4.63 113.4 4.52 22 杀螟硫磷 97.5 1.42 84.6 1.75 92.7 2.89 112.9 2.66 23 马拉硫磷 103.7 2.42 79.4 4.3 93.3 1.93 108.3 1.05 24 毒死蜱 108.4 4.52 81.6 3.31 90.1 4.19 105.0 2.35 25 对硫磷 104.4 6.09 97.6 3.77 89.7 1.90 122.9 2.46 26 三唑酮 94.4 3.45 70.6 2.47 87.5 1.58 92.1 1.38 27 水胺硫磷 91.5 1.25 95.8 3.45 90.3 6.28 116.8 0.86 28 三氯杀螨醇 97.0 3.42 78.9 2.82 88.1 3.57 92.3 6.30 29 甲基异硫磷 95.9 3.74 65.6 1.68 90.5 4.00 80.1 1.07 30 氟虫腈 86.0 5.65 59.0 6.07 78.3 5.98 87.8 2.97 31 硫环磷 98.5 4.65 104.5 2.69 32 稻丰散 94.1 0.20 81.9 0.92 81.0 4.20 75.7 8.67 33 48 氯菊酯 113.6 5.25 65.6 9.86 77.6 2.11 70.6 1.78 49 蝇毒磷 96.8 0.95 90.9 3.96 89.2 2.14 105.0 2.55 50 哒螨灵 93.7 5.57 29.6 9.27 93.9 3.95 57.1 8.29 51 氟氯氰菊酯 115.9 1.79 139.6 6.38 100.6 2.76 96.7 5.92 52 氯氰菊酯 117.4 2.86 122.8 0.81 101.1 2.74 125.4 3.17 53 氟氰戊菊酯 117.6 2.59 136.8 2.66 96.5 2.08 102.9 2.09 54 氰戊菊酯 117.1 1.57 129.7 3.94 102.1 3.51 104.7 7.70 55 氟胺氰菊酯 111.9 1.71 154.4 7.15 102.5 4.06 75.1 6.18 56 苯醚甲环唑 113.4 3.46 71.2 4.95 100.5 4.34 81.4 2.50 57 溴氰菊酯 116.7 2.36 148.9 4.56 109.5 4.10 105.5 6.22 注：表中“---”表示受样品基质干扰，结果无法计算 3结论 采用岛津公司 GCMS-TQ8030三重四气杆气质联用仪对蔬菜中50多种农药残留进行定性定量分析，该方法操作简单，重复性好，灵敏度高，在1pg/kg 和 5ug/kg的加标浓度下，大部分农药的回收率在70.0%~120.0%之间，完全满足日常的农药残留痕量分析工作。实验表明，串联质谱的检测方法能够避免杂质的干扰，尤其是分析复杂样品时，能有效地消除基质干扰，减少假阳性的检出率，同时能提高分析的选择性和检测灵敏度，简化样品前处理过程，降低分析成本。