大白鼠血清中Ca、Mg和Cu元素的形态检测方案(毛细管电泳仪)

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萍乡高等专科学校学报Journalof Pingxiang College2009年6月Jun 2009第26卷第3期Vol 26 NO.3 2009年萍乡高等专科学校学报·94· CE·ICP·AES法测定大白鼠血清中CaMg和Cu元素的形态 冯金荣，邓必阳 (1.萍乡高等专科学校化工系，江西萍乡 337000；2广西师范大学化学化工学院，广西桂林 541004) 摘 要：采用毛细管电泳与电感耦合等离子体原子发射光谱联用的方法，对大白鼠血清中的钙、镁和铜元素形态进行了初步探讨分析。从初步探讨来看， Ca 在大白鼠血清中共有14种主要化学形态；Mg在大白鼠血清中主要以4种化学形态存在；Cu 在大白鼠血清中主要以3种形态存在。 关键词：毛细管电泳；ICP-AES；血清；形态分析 中图分类号：O653 文献标识码：A 文章编号：1007-9149(2009)03-0093-03 1引言 钙、镁、铜是血液和各种体液的必需组分，是生理活性元素。。每一元素呈现不同的生物效应，而效应的强弱依赖于特定器官或体液中该元素的浓度及其存在形态因此研究生理活性元素的存在形态对阐明其生物功能和作用机理甚为重要，并引起国内外学者的高度重视12-5]。Zy lkiew icz 等液相色谱-石墨炉原子吸收联用技术研究了血清中镁的形态16，王志华等用超滤法对血清中Cu的形态进行了研究。本文采用毛细管电泳-电感耦合等离子体原子发射光谱( cap illary electropho resis inductively coupledplasma atom ic emission spectrometry，简称CE-ICP-A ES)联用的方法对大白鼠血清中的钙、镁、铜等元素进行了形态分析。 2 实验部分 21仪器及工作条件 Optima 2000DV 电感耦合等离子体原子发射光谱仪(美国Perk in E lmer 公司)，ACS2000 高压电源(北京彩陆科学仪器公司)。TGL-16G-A 台式高速冷冻离心机(上海仪器厂)。自制毛细管电泳压力进 样装置。熔融石英毛细管(河北永年锐沣色谱公司)。CE-ICP的接口按参考文献「8]制作。 该接口外观类似玻璃同心雾化器，雾化器中心管被毛细管所代替，它的外端口长约0.5cm，内径05mm。样品出口端为负极。 分析线(nm)： Ca 393. 366 M g279 533、Cu324752。 22样品的处理 大白鼠体重150g，年龄60天(桂林医学院基础学院提供)，断颈取血。L。血样直接流入离心管，放置1. 5h，以1500r m in 离心10m in， 取上层清液即为血清。在4℃下保存，实验时用亚沸蒸馏水稀释10倍后用0.45.m 滤膜过滤，该滤液供分离测定用。 23样品的引入 以0.04Mpa的氮气压力将样品溶液引入CE 毛细管中，注入样品的体积由注射时间、毛细管长度和样品溶液的性质决定。 内径100pm，长75cm的毛细管，进样20s，注入体积大约0.9uL。 3 结果与讨论 大白鼠血清中的CaMg、Cu 形态分析工作条件如表1所示。 ( 收稿日期：2008-11- 1 6 ) ( 作者简介：冯金荣(1980-)，女，湖南祁阳人，硕士，助教，主要从事光谱分析及联用技术方面的研究。 ) 血清钙包括离子钙、复合钙及其与血清蛋白结合 cc 图1血清中钙的形态分析 3.2Mg在大白鼠血清中的形态分析 从图2可以看出：Mg在大白鼠血清中主要以4种形态存在，分别用Mg1至Mg4表示在图上。 血清镁54%为离子型，13%与磷酸盐、枸橼酸盐 及其它化合物形成复合物，25%与白蛋白结合，8%与球蛋白结合1101。则MglMg2 和Mg3可能为复合镁、白蛋白镁或球蛋白镁中的某一种或者其它的形态，至于具体是哪一种形态有待于进一步确定。 图2血清中镁元素的形态分析 3. 3 Cu 在大白鼠血清中的形态分析 从图3中可以看看：Cu 在大白鼠血清中主要以3种形态存在，分别用Cu1至Cu3表示在图上。 图3血清中铜的形态分析 本文采用毛细管电泳—电感耦合等离子体原子发射光谱(CE-ICP-AES)联用的方法大大白鼠血清中的钙、镁、铜等元素形态进行了初步探讨分析，鉴于CE-ICP-AES方法本身的限制，这些元素的存在形态，具体为哪一种物质和结构还不清楚，需要进一步研究。但对这些元素在血清中的存在形态进行研究，为阐明其生物功能和作用机理提供了参考作用。 ( 参 考 文 献 ) ( [1] 王志华，马会民，梁树权体液中生理活性元素存在形态分 析方法若干进展[J]分析化学，2001，29(10)：1216 ) ( [2] Das A K ， Chakrabouty R. ，Cervera M L . Guardia M. D. L. M e tal speciation i n b io log ical fluids- a review [J ] M i kroch im. A cta， 1996，122：209~2 4 6 ) ( [3] Das A K， C hakraborty R . . Electro them al a t om i c absorp tion spectrometry (ETAAS) in th e st u dy of metal ion speciation [J ] F r esenius J. A nal Chem， 1997， 357：1~1 7 . ) ( [4] Sm ichow ski P，M adrid Y，Camara C . A nalyticalmethods for antmony speciation i n waters a t t race and ultratrace level s [ J ] I Fresenius J . Anal Chem， ) ( 1998， 360： 623~629 ) ( Das A K ， Chakrabouty R ， Cervera M L， Guardia M D L. M etal speciation n ir in so lid matrices [J] Talanta，1995，42 ： 1007~ 1 030 ) ( [61 Beata a G odlew ska - Zy lk iew icz Thee studyOf magnesium speciation in serum by liqu id chromatography and g raphitet e ffurnace e atom ic ab so rp tion techniques [J ] A nalyca Chm icaActa 1 998，358： 1 85~1 9 3. ) ( [7]W ang Zhi- h ua， M a Hui- m in， M a Quan- l i ， L iang Shu- q uan Sp e ciation analysis of serum copper b y ultrafiltration combined w ith g raphite f u rnaceatom ic a b so rption spectrometry [ J ] C hineseJ.Chem，2001，19(2)： 143~ 146 ) ( [8] B. Y. Deng and W. T Chan， Simple in t erface f or cap illary electrophoresis - i nductively coup lec plasma a t om ic em i s sion spectrometry [J] J. Chromatogr A，2000，891，139 ) ( [9] 李萍生物化学检验M]北京：人民卫生出版社，2003. ) ( 「101 张秀明现代临床生化检验M]北京：人民军医出版 社，2003. ) ( [责任编校：王 科] ) Specation Analysis of Ca， M g and Cu in Big W hite M ouse Serum by CapillaryElectrophoresis Inductively Coupled Plasma A tom ic Em ission Spectrometry Feng Jinrong， Deng Biyang (1. Dep. of Chem ical Engineering， Pingxiang College， pingxiang 337000；2 College of Chem istry andChem ical Eng ineering， GuangxiNom alU niversity， Guilin 541004， China；) Abstract Study on speciation analysis of Ca， Mg and Cu in big w hite mouse serum by cap illaryelectropho resis inductively coup led p la sma atom ic em ission spectrometry. Study show s there are 14fo m s of calcium in big w hite mouse serum， 4 fo mm s of m agnesium in big w hite mouse serum， and 3fo m s of copper in big w hite mouse serum. Key wwoorrddss：： cap illary electropho resis；inductively coupling plasma atom ic em ission spectrometry；serum； speciation analysis ◎China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http：//www.cnki.net