动物源性样品中合成类固醇类激素检测方案(液相色谱柱)

智能文字提取功能测试中

动物源性样品中合成类固醇类激素的检测 (SPE-LC/MS)使用 500mg 3mL HyperSep C18固相萃取柱(部件号：60708-304) 结果26 样品制备 样品5g，加入10%碳酸钠溶液 3mL和10mL乙酸乙酯，均质30s， 振荡10min (4℃)， 6000r/min 离心 10min，将上层有机相转移至梨形瓶中。再用10mL 乙酸乙酯重复提取一次，合并上层有机相。在40℃下，旋转蒸发至干，用30%甲醇溶解并稀释至 5mL。 活化 3mL甲醇，3mL水 上样 样品 清洗 2mL 30%甲醇的水溶液 洗脱 5mL甲醇溶液 LC/MS 方法 色谱柱Hypersil Gold， 5pm，2.1×150mm货号25005-152130流动相0.1%甲酸(A)：甲醇(B)梯度洗脱程序 表1.流动相梯度洗脱条件 Time(min) A(%) B(%) 0 90 10 5 10 90 12 10 90 12.1 90 10 14 90 10 进样量 10pL 流速 250pL/min MS条件 电喷雾电离源(ESI)，正离子模式 选择反应监控(SRM)扫描模式 喷雾电压 4500V 离子传输管温度 350℃ 1.典型 LC/MS/MS 色谱图 RT：9.19 Trenbolone 100 AA：171186 NL：1.52E4 50 m/z=198.90-199.10 F：+c ESI sid=5.00 SRM ms2 275.200[198.995-199.005， 0 252.995-253.005]MS Genesis Ing-mL Nandrolone RT：9.38 AA：141896 100 NL：1.22E4 m/z=108.90-199.10 F：+c ESI sid=5.00 50 SRM ms2 275.200[108.995-109.005， 0 256.995-257.005]MS Genesis Ing-mL Boldenonc 工一 RT：9.17 100 AA：287326 NL：2.70E4 m/z=120.90-121.10 F：+C ESl sid=5.00 50 SRM ms2 287.200[120.995-121.005， 0 134.995-135.005]MS Genesis Ing-mL RT：9.59 Testosterone NL：2.84E4 100 AA：320583 m/z=97.10-97.30 F：+C ESI sid=5.00 50 SRM ms2 289.200[97.195-97.205， 109.195-109.253，195-253.205]MS 0 Genesis Ing-mL Methandicnone RT：9.39 AA：306411 NL：2.79E4 100 m/z=120.90-121.10 F：+c ESI sid=5.00 50 SRM ms2 301.200[120.995-121.005， 148.995-149.005，282.995-283.0051MS 0 Genesis Ing-mL 2 6 8 10 12 Time (min) CC一丫 RT：9.81 NL：1.46E4 100 AA：140671 Methyl testosterone m/z=97.10-97.30 F：+C ESI sid=5.00 SRM ms2 303.200[97.195-97.205，109.095-109.105， 0 RT：10.23 285.095-285.105]MS Genesis Ing-mL NL：2.10E4 AA：231890 Progesterone 100 m/z=97.10-97.30 F：+c ESI sid=5.00 SRM ms2 315.200[97.195-97.205，109.995-109.105，]MS 0 RT：10.39 Genesis Ing-mL AA：115127 Stanozolol NL：1.23E4 100 m/z=80.90-81.10F：+c ESI sid=5.00 SRM ms2 329.200[80.995-81.005，120.995-121.005，]MS 0 Genesis Ing-mL RT：10.98 AA：118153 NL：1.19E4 100 Nandrolone propionate m/z=256.90-257.10 F：+C ESI sid=5.00 SRMms2 331.100[238.995-239.005. 0 RT：11.33 256.995-257.005]MS Genesis Ing-mL MA：91859 NL：9.27E3 100 Testosterone propionate m/z=109.00-109.20 F：+C ESI sid=5.00 SRM ms2 345.200[97.095-97.105，109.095-109.105 0 MS Genesis Ing-mL RT：12.42 AA：189204 4NL：1.61E4 TIC F：+c ESl sid-5.00 SRM ms2 407.200 [105.195-105.205，257.095-257.105]MS 100) Nandrolone phenylpropionate 0 hmGenesis Ing-mL 2 6 8 10 12 Time (min) 图2.11种合成类固醇类激素 LC/MC/MS色谱图 (1.0ng/mL) 2.定量限(LOQ)：本方法在猪、牛、羊、鸡肌肉组织、鸡蛋中，辜酮、甲基睾酮、黄体酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙的检测限均可达到0.1pg/kg。 本方法在各肌肉组织、鸡蛋、牛奶中的睾酮、甲基睾酮、黄体酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙的定量限为 0.5pg/kg. 3.本方法合成类固醇类激素在猪、牛、羊肌肉，鸡肉，鸡蛋，牛奶等动物源性样品中的提取回收率均可达 50-105%。 样品制备样品5g，加入10% 碳酸钠溶液3mL 和10mL 乙酸乙酯，均质30s， 振荡10min（4 ℃），6000r/min 离心10min，将上层有机相转移至梨形瓶中。再用10mL 乙酸乙酯重复提取一次，合并上层有机相。在40℃下，旋转蒸发至干，用30% 甲醇溶解并稀释至5mL。活化3mL 甲醇，3mL 水上样样品清洗2mL 30% 甲醇的水溶液洗脱5mL 甲醇溶液