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毛发中羧基Δ-9-四氢大麻酚(cTHC)检测方案(液相色谱仪)

检测样品 毛发/头发

检测项目 羧基Δ-9-四氢大麻酚(cTHC)

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方案详情

随着法医毒理学检测的兴起,人们迫切需要能够快速、准确、可靠且稳定地定量各种生物基质中的化合物的分析方法。以毛发作为检测对象,能以简单、受控且非侵入性的方式采集基质,而且毛发中含有这类检测方案通常需要测定的各种分析物。 本研究证明,ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro系统的分析灵敏度足以检测毛发中亚pg/mg浓度水平的cTHC。

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[技术简报]WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 技术简报 在法医毒理学分析中使用UPLC-MS/MS测定毛发中的羧基-△-9-四氢大麻酚(cTHC) Massimo Gottardi'、Francisco Ferron?、Rob Lee、Andrea Gardumi'、Simone Donzelli?和Michelle Wood3Comedical(意大利特伦托);沃特世公司(意大利米兰);沃特世公司(英国威姆斯洛) 目的 为分析毛发中的cTHC开发一种稳定的UPLC-MS/MS方法,使得常规分析能够满足国际毛发分析协会(Society of Hair Testing,SoHT)指导原则推荐的确认cut-off浓度。 背景 过去十年来,在法医毒理学检测中,将毛发作为生物基质的应用越来越广泛。与血液和尿液等传统基质相比,毛发的检测窗口更宽,此外,如果进行分段分析,还能按时间顺序提供数月甚至数年的药物暴露历史。已知人的头发每月生长1cm左右。 药物可通过多种机制进入毛发,包括在毛囊处的供血过程中被动扩散到正在生长的毛发基质中,从汗液或皮脂扩散到毛干中,或者通过外部污染(如烟雾或被污染的手)进入毛发。 一种用于测定毛发中cTHC的高稳定性、高灵敏度UPLC-MS/MS方法。 毛发采集是一种非侵入性技术,采样过程不涉及类似于尿样采集的隐私和掺假问题,而与血样采集相比,毛发采集不需要由经过医学培训的人员执行。此外,毛发样品易于储存。 大麻是世界上使用最为广泛的管制物质,长期使用可产生依赖性。大麻素是最常检出的违禁药物之一,因此大麻素的分析对于法医医测而言极其重要。△-9-氢大大麻酚(THC)是大麻植株中存在的主要精神活性成分,可产生一系列代谢物,其中就包括11-去甲-9-羧基-△9-四氢大麻酚(cTHC)。 为了区分实际摄入大麻与被动暴露于环境中的大麻烟雾, SoHT要求通过测定内源性代谢物cTHC来确认毛发样品中THC的阳性鉴定结果。然而,分析这种代谢物的难度极大,因为其浓度度常低至pg/mg水平,并且可用样品量往往很有限,因此需要高灵敏度的分析技术。 解决方案 从志愿者身上采集对照毛发样品,用二氯甲烷、甲醇和二乙醚进行连续去污处理,然后剪成1~2mm的小段。剪碎的毛发在使用前储存于4℃下。M3试剂由Comedical(意大利特伦托)提供。 http://www.comedical.biz/ 称取对照毛发样品(20mg)加入带有密封盖的离心管中,并加入浓度为0~10 pg/mg的cTHC。加入内标(80 pg cTHC-d3)以及M3试剂。将样品置于100℃的培养箱中温育60 min, 冷却后将整个样品上样到OASIS" PRiME HLB 30 mg小柱(部件号186008055)上。依次使用乙腈溶液和正己烷清洗样品。用乙腈/甲醇(9:1v/v)洗脱cTHC, 挥干溶剂后,将样品复溶于甲醇溶液中,然后转移至Waters"全回收样品瓶中。 ACQUITY"UPLC"I-Class (FTN)系统配备30 uL进样针,可进样15pL样品; 在BEH""C18色谱柱上使用pH9.5的氟化铵和甲醇梯度分离cTHC。使用Xevo"TQ-S micro质谱仪对cTHC的两个MRM通道进行监测,即m/z 343>191(定量离子)和m/z 343>245(定性离子)。使用通道m/z 346>194对内标(cTHC-d3)进行监测。 对照(空白)毛发萃取物与加标毛发萃取物的对比如图1所示。图中显示了两个样品经平滑处理和积分后的定量离子MRM谱图。 加标样品的浓度为0.2 pg/mg, 与SoHT推荐的cut-off浓度值一致。0.2 pg/mg cTHC加标毛发样品定量离子和定性离子MRM通道的信噪比(峰到峰)计算结果如图2所示。我们还考察了该方法在0~10 pg/mg范围内的线性,校准曲线和残差图如图3所示。 图1.对照(0 pg/mg)毛发样品(下方谱图)和cTHC加标(0.2 pg/mg)毛发样品(上方谱图)定量离子MRM通道的色谱图。 图2.0.2 pg/mg加标毛发样品定量离子(下方谱图)和定性离子(上方谱图)MRM通道的色谱图,图中显示了信噪比计算结果。 图3.加入对照毛发样品中的cTHC在0~10 pg/mg范围内的线性。 总结 随着法医毒理学检测的兴起,人们迫切需要能够快速、准确、可靠且稳定地定量各种生物基质中的化合物的分析方法。以毛发作为检测对象,能以简单、受控且非侵入性的方式采集基基,而且毛发中含有这类检测方案通常需要测定的各种分析物。 本研究证明, ACQUITY UPLCI-Class/Xevo TQ-S micro系统的分析灵敏度足以检测毛发中亚pg/mg浓度水平的cTHC。 ( 参考文献 ) 1. G.A.A. Cooper, R. Kronstrand, P. Kintz. Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair. Forensic Science Internationa/ 218 (2012) 20-24. 仅适用于法医毒理学应用。 本技术简报系沃特世公司与COMEDICAL s.r.l.(意大利特伦托)合作撰写。 扫一扫,关注沃特世微信 Waters 沃特斯中国有限公司 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 沃特世科技(上海)有限公司 北京:010-52093866 上海:021-61562666 Waters、 The Science of What's Possible、ACQUITY、UPLC、Xevo、BEH和Oasis是沃特世公司的商标。其它所有商标均归各自的拥有者所有。 广州:020-28296555 香港:852-29641800 免费售后服务热线:800(400)8202676www.waters.com ◎沃特世公司。中国印刷。H KP-PDF 目的为分析毛发中的cTHC开发一种稳定的 UPLC-MS/MS方法,使得常规分析能够满足国际毛发分析协会(Society of Hair Testing, SoHT)指导原则推荐的确认cut-off浓度。背景过去十年来,在法医毒理学检测中,将毛发作为生物基质的应用越来越广泛。与血液和尿液等传统基质相比,毛发的检测窗口更宽,此外,如果进行分段分析,还能按时间顺序提供数月甚至数年的药物暴露历史。已知人的头发每月生长1cm左右。 药物可通过多种机制进入毛发,包括在毛囊处的供血过程中被动扩散到正在生长的毛发基质中,从汗液或皮脂扩散到毛干中,或者通过外部污染(如烟雾或被污染的手)进入毛发。总结随着法医毒理学检测的兴起,人们迫切需要能够快速、准确、可靠且稳定地定量各种生物基质中的化合物的分析方法。以毛发作为检测对象,能以简单、受控且非侵入性的方式采集基质,而且毛发中含有这类检测方案通常需要测定的各种分析物。本研究证明,ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro系统的分析灵敏度足以检测毛发中亚pg/mg浓度水平的cTHC。

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沃特世科技(上海)有限公司(Waters)为您提供《毛发中羧基Δ-9-四氢大麻酚(cTHC)检测方案(液相色谱仪)》,该方案主要用于毛发/头发中羧基Δ-9-四氢大麻酚(cTHC)检测,参考标准《暂无》,《毛发中羧基Δ-9-四氢大麻酚(cTHC)检测方案(液相色谱仪)》用到的仪器有Waters ACQUITY UPLC I-Class 超高效液相色谱、Waters Xevo TQ-S micro 三重四极杆质谱。

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