酱油和酸奶中三氯蔗糖检测方案

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酱油和酸奶中三氯蔗糖的残留检测 背景 三氯蔗糖是以蔗糖为原料经氯代而制得的一种非营养型强力甜味剂，甜度为蔗糖的600倍，极易溶于水，具有甜味纯正，化学稳定性好，在人体内几乎不被吸收，是糖尿病人的甜味代用品等优点。因此，广泛应用于酱油、饮料、乳制品、饮料酒和果酱等加工食品中。我国2011版《食品添加剂使用卫生标准》中规定可以在调味乳、饮料、糖果等27种产品中使用三氯蔗糖，但均有限量规定。本试验参考 GB22255-2014食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的检测方法，采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法，对酱油和酸奶中三氯蔗糖的前处理方法及分析条件进行验证。 三氯蔗糖结构式 适用范围 本方法(参考 GB 22255--2014)，适用于食品中三氯蔗糖含量的测定。 实验步骤 1、试剂准备 甲醇(CH3OH)：色谱纯 乙腈(CHCN)：色谱纯 正己烷(C6H14) 水：超纯水 乙酸锌： Zn(CH3COO)2.2H2O 亚铁氰化钾： K4Fe(CN)6.3H2O 中性氧化铝(100-200目) 溶液配制 乙酸锌溶液(219g/L)：准确称取21.9g乙酸锌，加入3mL乙酸，加水溶解至100mL。 亚铁氰化钾溶液(106g/L)：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解至100 mL。 甲醇水(75+25)：准确量取 75mL甲醇，加25mL水，混匀。 乙腈水溶液(11+89)：准确量取11mL 乙腈，加89mL水，混匀。 2、羊品提取 2.1酱油基质 称取2g试样(精确到0.01g) 于50mL离心管中，加入1g中性氧化铝，再加入3mL水和15mL甲醇，涡旋混合30s， 在3000 r/min 的条件下离心 10 min， 移取上清液于另一离心管中，往沉淀物中加5mL甲醇水，重复提取-一次，合并上清液于 150 mL分液漏斗中。往分液漏斗中加入 30 mL 的正己烷，摇晃 3 min 后静置分层，待分层结束后将下层水相70℃氮吹至约1mL， 再加入9mL的水，离心10 min， 最后取上清液待净化。 2.2酸奶基质 称取2g试样(精确到0.01 g)于50mL离心管中，加入5 mL的水和15 mL的甲醇，混匀，再加入0.5 mL的乙酸锌和亚铁氰化钾溶液；后续步骤同酱油基质提取方法，最后后清液待净化。 3、净化 SPE柱： SelectCore HLB 固相萃取柱(200mg/6mL) 活化：依次用5 mL的甲醇和水活化； 上样：加入提取好的全部上清液； 淋洗：用1mL的超纯水溶液进行淋洗； 洗脱：用3mL甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，在50℃下用氮气吹至近干，用1mL乙腈水复溶后，过 0.45 um PES 滤膜后上机检测。 4、液相色谱仪器条件 Column： ChromCore C18，5 um Dimension： 4.6×150 mm Mobile Phase：H2O：ACN=89：11(v/v) Flow Rate： 1.0 mL/min Temperature： 35 ℃ Injection： 20 uL Detection： ELSD Nebulizer Temperature： 60 ℃ Evaporator Temperature： 80℃ Gas Flow Rate： 1.6 L/min 图1：400 ppm 三氯蔗糖对照品溶液色谱图 图2：酱油空白基质色谱图 图3：添加水平 200 mg/kg 的酱油基质色谱图 图4：酸奶空白基质色谱图 图5：添加水平200mg/kg 的酸奶基质色谱图 样品加标回收率实验结果 样品名称 化合物 加标量(mg/kg) 平均回收率% 酱油 三氯蔗糖 200 97.98% 酸奶 三氯蔗糖 200 90.79% 6、实验结论 由以上实验数据可得，选择纳谱分析的 SelectCore HLB 200mg/6mL 固相萃取柱和 ChromCore C18 5um，4.6×150 mm分析柱，酱油和酸奶样品中三氯蔗糖的测定数据稳定、分离度良好、回收率较高，符合国标检测要求。 纳谱分析纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com NanoChrom 样品名称化合物加标量（mg/kg）平均回收率%酱油三氯蔗糖20097.98%酸奶三氯蔗糖20090.79%