肌腱防粘连膜中蛋白质含量检测方案(定氮仪)

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K-249-202001 凯氏定氮仪测定肌腱防粘连膜中的蛋白质含量 1前言 肌腱防粘连膜为牛跟腱提取的Ⅰ型胶原制作成的具有三维孔隙结构的可降解可吸收的生物膜，用于手部肌腱损伤后修复，辅助减少术后粘连。其原材料Ⅰ型胶原蛋白亦可用于硬脑膜、硬脊膜及周围神经的再生修复。本实验使用凯氏定氮法测定肌腱防粘连膜及其原材料斗型胶原蛋白的蛋白质含量。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1160 全自动凯氏定氮仪， SH420F石墨消解仪，分析天平。 2.2试剂 硫酸(分析纯)， 20g/L 硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂(3gK2SO4、0.2gCuSO4)， 0.1mol/L 硫酸标准滴定液。 3实验方法 3.1取样 将样品剪成条状，精密称取0.2g样品加入消化管中。加入混合催化剂3.2g，加入浓硫酸10ml. 3.2消解 设定消解参数 表1消解参数设置 阶段 温度/℃ 保持/min 1 280 20 2 420 90 3.3测试 表2定氮仪参数设置 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蒸汽流量 蛋白系数 滴定酸浓度 25mL 30mL 40mL 5min 100% 6.25 0.1225mol/L 4结果与讨论 4.1实验结果 表3肌腱防粘连膜中蛋白质含量测试结果 样品名称 取样量g 氮含量% 蛋白质含量% 平均值% RSD% 胶原提取物 0.1946 15.170 94.813 94.684 0.192 0.2029 15.162 94.763 0.1978 15.116 94.475 肌腱防粘连膜 0.2075 15.833 98.956 98.910 0.219 0.1946 15.788 98.675 0.2063 15.856 99.100 4.2结论 结果表明肌腱防粘连膜中蛋白质含量为 98.910%胶原提取物中蛋白质含量为 94.684%，肌腱防粘连膜成品及其原材料蛋白质含量都较高。且测试结果 RSD 分别为 0.192%和 0.219%，重复性较好。 ( 参考文献 ) ( [1]YZB/国6996-2014肌腱防粘连膜[S]. ) -- -- 1 前言肌腱防粘连膜为牛跟腱提取的Ⅰ型胶原制作成的具有三维孔隙结构的可降解可吸收的生物膜，用于手部肌腱损伤后修复，辅助减少术后粘连。其原材料Ⅰ型胶原蛋白亦可用于硬脑膜、硬脊膜及周围神经的再生修复。本实验使用凯氏定氮法测定肌腱防粘连膜及其原材料Ⅰ型胶原蛋白的蛋白质含量。2 仪器与试剂2.1仪器K1160全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪，分析天平 。                  2.2试剂硫酸（分析纯），20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂（3gK2SO4、0.2gCuSO4），0.1mol/L硫酸标准滴定液。