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文档编号: LC-K2025-01-210604 乳粉中维生素 B2的含量测定高效液相色谱法 维生素B2又叫核黄素,微溶于水,在中性或酸性溶液中加热呈稳定状态。维生素B2是体内黄酶类辅基的组成部分。 维生素B2作为婴幼儿配方奶粉的重要添加物,是人体必需的营养元素。当体内缺乏维生素B2时,会影响机体的生物氧化,,使代谢发生障碍。其病变多表现为口、眼等部位的炎症,如口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎等,因此维生素B2可用于上述疾病的防治,还可增进人体对铁的吸收。 为了保障科学定量摄入,准确定量检测奶粉中维生素B2的含量对监管奶粉营养成分及安全具有重要意义,为食品、营养学的分析检测和研究提供量值溯源保障。 实验部分: 乳粉中维生素 B2 的含量测定高效液相色谱法 【仪器与试剂】 仪器与设备::悟空K2025高效液相色谱仪(配荧光检测器),分析天平(精确到0.0001g),涡旋振荡器, pH计,超声波清洗机,容量瓶(50、100、500、1000mL,棕色带刻度); 试剂与材料:维生素B2标准品(CAS号:83-88-5,纯度为97.6%),符合 GB/T6682的一级水,甲醇、冰乙酸(色谱级),无水乙酸钠(优级纯),盐酸、氢氧化钠(分析纯),微孔滤膜(0.22um,水相)。 【样品前处理】 称取 5g(精确至0.0001g)乳粉样品于50mL 容量瓶中,加水25mL,涡旋混匀,先用1moL/L 的盐酸溶液调节 pH至1.7,静置,再用1moL/L 的氢氧化钠溶液调节 pH至4.6, 最后用水定容至 50mL,混匀后过滤,取续滤液待液相色谱测定。 【色谱条件】 a)色谱柱:C18,4.6×250mm, 5um b)流动相:0.05mol/L 乙酸钠溶液+甲醇=65+35 c)柱温:35℃ d)进样量:20pL e)流速:1.0 mL/min f)检测器及波长:荧光检测器, Ex=462nm, Em=522nm 【结果与讨论】: 1.按照上述色谱条件进行采集,维生素B2标准溶液色谱图如图1所示,经计算维生素B2的理论塔板数为10139,拖尾因子为1.16,具有良好的峰型。 图1维维素B2标准溶液 (2.462ug/mL)色谱图 2.将维生素B2标准溶液逐级稀释至信噪比 S/N 为3左右,计算仪器的检出限,数据结果见表1。经计算仪器针对维生素 B2 检出限为 0.811ng/mL, 定量限为2.702ng/mL。 表1灵敏度测试数据 目标物 浓度(ug/mL) 峰高(mAU) 噪声(mAU) S/N LOD (ng/mL) LOQ(ng/mL) 维生素B2 0.137 10.647 0.021 507.0 0.811 2.702 3.将系列浓度的维生素 B2的标准曲线溶液在 HPLC 上进行测定,色谱图如图2所示;绘制校准曲线,线性方程及相关系数见图3,标曲的相关系数R2为0.9998,线性关系良好。 图2维生素B2标准溶液系列叠加色谱图 图3维生素B2标准溶液校准曲线 4.购买市售的乳粉作为样品进行处理并测定,测试样品色谱图如图4所示,经计算该乳粉样品中维生素B2的含量为 1.30mg/100g。 图4市售乳粉样品色谱图 【结论】 使用 K2025高效液相色谱仪,通过对维生素B2的峰形、重复性、线性、灵敏度测试以及对市售乳粉样品中的维生素B2含量进行测定,目标物维生素B2色谱峰的理论塔板数为10139,对称因子为1.16,具有良好的峰型;重复性测试中,连续进样7针,维生素B2保留时间的 RSD 为 0.038%, 峰面积的 RSD为0.058%,定性、定量均有良好的重复性;维生素B2的仪器检出限为 0.811ng/mL, 定量限为 2.702ng/mL;线性关系良好,确定系数R?为0.9998; 因此,Wooking K2025 高效液相色谱仪完全可以满足《GB5009.85-2016食品安全国家标准食品中维生素 B2的测定(第-一一法)》中使用高效液相色谱法测定维生素B2含量的需求。 -- -- 维生素B2又叫核黄素,微溶于水,在中性或酸性溶液中加热呈稳定状态。维生素B2是体内黄酶类辅基的组成部分。 维生素B2作为婴幼儿配方奶粉的重要添加物,是人体必需的营养元素。当体内缺乏维生素B2时,会影响机体的生物氧化,使代谢发生障碍。其病变多表现为口、眼等部位的炎症,如口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎等,因此维生素B2可用于上述疾病的防治,还可增进人体对铁的吸收。 为了保障科学定量摄入,准确定量检测奶粉中维生素B2的含量对监管奶粉营养成分及安全具有重要意义,为食品、营养学的分析检测和研究提供量值溯源保障。
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悟空科学仪器(上海)有限公司为您提供《乳粉中维生素B2含量检测方案(液相色谱仪)》,该方案主要用于婴幼儿配方乳粉中营养成分检测,参考标准《暂无》,《乳粉中维生素B2含量检测方案(液相色谱仪)》用到的仪器有悟空仪器K2025 高效液相色谱仪。
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