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04 EZsepTMDON IAC免疫亲和柱应用于白酒中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 01 实验过程 1.1仪器与试剂 Extrapid固相萃取装置,货号:C020019,北京莱伯帕兹检测科技有限公司; LC600二元高压梯度高效液相色谱,北京莱伯泰科仪器股份有限公司; E.T.氮吹浓缩仪,货号: C020017,北京莱伯帕兹检测科技有限公司; EZsepMDON IAC免疫亲和柱 (3mL 20/pk, 货号: PZ24108,北京莱伯帕兹检测科技有限公司); 甲醇(色谱纯, Fischer公司); 聚乙二醇:分析纯; 超纯水; 0.1%吐温-水:1ml的吐温-20,加水定容至1L。 1.2工作液配制 脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备液:200pg/mL,坛墨质检。 脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准中间液:移取脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备液1mL,用甲醇稀释至10mL容量瓶中,配制成浓度为20ug/mL的中间液。 脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准工作液:移取脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准中间液1mL,用30%甲醇水溶液稀释至10mL容量瓶中,配制成浓度为2ug/mL的工作液。 1.3实验部分 1.3.1样品制备 称取20g白酒试样(精确至0.01g)于25mL容量瓶中,加入1g聚乙二醇,用水定容至25ml,超声20min, 快速定性滤纸过滤,收集滤液,待净化。 1.3.2净化与浓缩 将低温下保存的EZsepTMDON IAC免疫亲和柱 (3mL 20/pk, 货号:PZ24108,北京莱伯帕兹检测科技有限公司)恢复至室温,待免疫亲和柱内原有液体流尽后,准确移取2mL上述滤液,上样结束后分别用5mL 0.1%吐温水溶液、10mL水淋洗免疫亲和柱,在真空状态下干燥1min, 最后用2mL甲醇洗脱。洗脱液在40℃下氮吹浓缩至近干,流动相定容至1mL,涡旋混匀,0.22um滤膜过滤,待检测。 1.3.3高效液相色谱检测条件 色谱柱: Promosil C18, 5um, 4.6*250mm; 波长:218nm; 流速: 0.8mL/min; 柱温:35℃; 02 实验结果 图1标准样品色谱图 图2加标样品色谱图 mAU 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 min -1.00)J 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 图3空白样品色谱图 03 结论 ::: 参考文献 ::::: 1.GB 5009.111-2016 食品安全国家标准食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定 2.呕吐毒素免疫亲和柱说明书
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