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一、前言L-脯氨酸(简称脯氨酸)是人体合成蛋白质的十八种氨基酸之一,常温下为无色至白色晶体或结晶性粉末,微臭,味微甜,极易溶于水,难溶于乙醇,不溶于乙醚和正丁醇。L-脯氨酸用于生化研究,医药原料及食品添加剂。本实验参照《GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》使用凯氏定氮法对L-脯氨酸中的氮含量进行测定。二、仪器与试剂2.1、仪器K1160全自动凯氏定氮仪,SH520电热消解仪,分析天平等2.2、试剂硫酸(分析纯),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,400g/L氢氧化钠溶液,混合催化剂(6gK2SO4、0.4gCuSO4),0.1mol/L硫酸标准滴定液海能技术 方案编号: K-332-20220919863X四 凯氏定氮仪测定L-脯氨酸的氮含量 一、前言 L-脯氨酸(简称脯氨酸)是人体合成蛋白质的十八种氨基酸之 一 ,常温下为无色至白色晶体或结晶性粉 末,微臭,味微甜,极易溶于水,难溶于乙醇,不溶于乙醚和正丁醇。L-脯氨酸用于生化研究,医药原料 及食品添加剂。本实验参照《GB 5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定》使用凯氏定氮法对L-脯氨酸中的氮含量进行测定。 二、仪器与试剂 2.1、仪器 K1160 全自动凯氏定氮仪, SH520电热消解仪,分析天平等 2.2、试剂 硫酸(分析纯),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂, 400g/L氢氧化钠溶液,混合催化 剂 (6gK,SO、0.4gCuSo ), 0.1mol/L 硫酸标准滴定液 三、实验方法 3.1、样品制备 称取混合均匀的样品0.2g(精确至0.1mg)加入消化管,再加入混合催化剂6.4g (6gK,SO、0.4gCuSO),沿消化管壁加入浓硫酸12mL。 3.2、消解 将加完样品和试剂的消化管放置于消解仪上,盖好排废罩,设定消解仪参数如表1所示: 表1消解参数设置 阶段 温度 保温 1 420℃ 90min 2 冷却 20min 3.3、测试 消解完成后,待消化管冷却至室温后取下备用。检渣定氮仪各试剂是否充足,同时做仪器空白,待仪 器空白稳定后,可将消解好的样品上机测试。定氮仪参数设置如表2所示: 表2定氮仪参数设置 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏时间 蒸汽流量 蛋白系数 滴定酸浓度 20mL 50mL 50mL 5min 100% 一 O.1000mol/L 四、结果与讨论 4.1、实验结果 实验选取的L-脯氨酸样品经消解、蒸馏、滴定,得到实验结果如表3所示: 表3氮含量测试结果 样品名称 样品重量 氮含量 平均值 RSD L-脯氨酸 0.2009g 12.158% 12.156% 0.11% 0.2005g 12.142% 0.2012g 12.169% 4.2、结论 本次测试的L -脯氨酸的氮含量为 12.156%、RSD 值为 0.11%,结果平行性良好。 五、注意事项 若使用 SH220F 和 SH420F 石墨消解炉消解样品,可按照下表中升温曲线进行消解。 阶段 温度 保温 1 200℃ 20min 2 420℃ 120min 参考文献 [1]GB 5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定[S].
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海能未来技术集团股份有限公司为您提供《凯氏定氮仪测定L-脯氨酸的氮含量》,该方案主要用于原料药中含量测定检测,参考标准《暂无》,《凯氏定氮仪测定L-脯氨酸的氮含量》用到的仪器有海能K1160/K1160+K1124全自动凯氏定氮仪、SH520/SH508自动消解仪。
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