LC-MS/MS测定化妆品中莫匹罗星等5种违禁药物

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本文采用岛津三重四极杆液质联用仪建立了化妆品中莫匹罗星等5种违禁药物的定量分析方法。该方法灵敏度高、线性范围广、重复性和样品加标回收率均良好，可用于化妆品中莫匹罗星等5种违禁药物的检测。SSL-CA23-104Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-763 LC-MS/MS 测定化妆品中莫匹罗星等5种违 禁药物 LCMSMS-763 摘要：本文采用岛津三重四极杆液质联用仪建立了化妆品中莫匹罗星等5种违禁药物的定量分析方法。。该 方法 中 ，5种组分在 0.2~20 ng/mL (以噻吗洛尔为例 )浓度范围内线性良好，相关系数均大于0.999， 准 确度为 88.1~107.9%。精密度实验中，校准曲线S2标准溶液重复分析6次，保留时间 RSD 小于0.2%，峰 面积 RSD 小于 4.5%。实际样品加标实验中，高中低浓渡加标回收率分别为98.7~105.3%、98.2~103.2%、95.0~102.4%，回 收率高。实验结果表明，该方法能快速准确定量分析化妆品中莫匹罗星等5种化合物。 关键词：莫匹罗星 化妆品 LC-MS/MS 技术特点： 心此方法参考药监局化妆品补充检验方法，精密度和准确 度 完全满足标准要求。 莫匹罗星、夫西地酸、红霉素均为抗生素，经常在 品 中莫匹罗星等5种组分的 测 定》化妆品补充检验方法 祛痘类化妆品中违法添加，用以增强疗效。人体长期接 的公告。此公告适用于 膏 霜乳类、液体类(水)化妆品 触含抗生素的化妆品，易 引起接触性皮炎、抗生素过敏 中莫匹罗星、夫西 地 酸、红霉素、噻吗洛尔、特比萘芬 等症状、药物残留还可能导致过敏反应等。噻吗洛尔用 5种组分的定性和定量测定。本实验参考此公告，并通 量过多会带来较大副作用，特比萘芬是一种抗真菌药物， 过优化质谱参数，提高分析灵敏度，且精密度和准确度 均为我国明确禁止在化妆品中使用的违禁药物。 结果完全满足标准要求。 2022年7月，国家药品监督管理局发布了《化妆 实验部分 1.1仪器 本实验采用岛津超高效液相色谱仪 LC -30AD 与三重四极杆质谱仪 LCMS-8050 联用系统。 液相具体配置为： 系统控制器 号：：CBM-20A 自动进样器 ：SIL-30AC 脱气机 几：DGU-20A5R 柱 温 箱：CTO-20A 输液泵 灵：LC -30AD×2色谱工作站：LabSolutions Ver. 5.118 1.2分析条件 液相色谱条件 色 谱 柱：：Shim-pack Velox SP-C18 (50 mm x2.1 mm l.D.，1.8 um， P/N： 227-32001-02，岛津(上海)实验器材有限公司) 流 动 相 A 相-0.1%甲酸水溶液，B相-乙腈 流 速： 0.3 mL/min 柱 温 ： 35℃ 进样体积： 1pL 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为10%，时间程序见表1。 表 1 流动相梯度洗脱程序 Time(min) Module Command Value 5.00 Pumps Pump B Conc. 95 6.00 Pumps Pump B Conc. 95 6.10 Pumps Pump B Conc. 10 10.00 Controller Stop 质谱条件 离 子 源：ESI(+/-) 接口温度：300°℃ 接口电压：4.5 kV(+)/-3kV(-) DL温 度：250°C 雾 化 气： 氮气 3.0 L/min 加热块温度：400°℃ 加 热 气 ： 空 气1 0. 0 L /mi n 扫描模 式：MRM 干 燥 气：氮气10.0L/min MRM 参参 数：见表2 表2 MRM 参数 NO. 中文名 英文名 CAS.NO. 分析模式 离子对 Q1 Pre (V) CE Q3 Pre (V) 1 莫匹罗星 Mupirocin 12650-69-0 十 501.25>327.15*501.25>309.05 -36-26 -13-16 -12-21 2 噻吗洛尔 Timolol 26839-75-8 十 317.00>261.05* -12 -18 -13 317.00>244.05 -16 -22 -26 3 特比萘芬 Terbinafine 91161-71-6 十 292.05>141.10* -15 -23 -14 292.05>115.05 -15 -54 -21 4 红霉素 Erythromy- 114-07-8 十 734.35>158.05* -22 -29 -11 cin 734.35>576.30 -22 -19 -30 5 夫西地酸 Fusidic Acid 6990-06-3 一 515.3>455.35* 38 20 20 515.3>393.35 24 24 17 注：*表示定量离子 1.3标准品配制 标准储备液：准确称取标准品10 mg， 用乙腈溶解并定容至 10mL， 配制浓度为1000 ug/mL标准储备液。 标准溶液：取适量标准储备液，用空白乳液基质溶液逐级稀释，配制校准曲线浓 度 为如 下 表3所示。 表3混 合 标准溶液浓度表 NO. 化合物 混合标准系列溶液浓度 (ng/mL) S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 1 莫匹罗星 2 4 8 20 40 80 200 2 噻吗洛尔 0.2 0.4 0.8 2 4 8 20 3 特比萘芬 0.1 0.2 0.4 1 2 4 10 4 红霉素 0.1 0.2 0.4 1 2 4 10 5 夫西地酸 2 4 8 20 40 80 200 1.4样品前处理 准确称取化妆品样品0.2g至离心管，加入10 mL 乙腈水溶液 (V：V=8：2)，涡旋后超声20 min。离心，上 清液经 0.22 um 滤膜过滤后上机分析。 ■结果与讨论 2.1标准溶液色谱图 0.1~2 ng/mL 某乳液基质标准溶液色谱图及信噪比如图1所示。 红霉素 夫西 地酸 图 1基质标准溶液友(校准曲线最低点)色谱图 (莫匹罗星、夫西地酸浓度为2ng/mL；噻吗洛尔浓度为 0.2 ng/mL； 特比奈芬和红霉素浓度为 0.1 ng/mL) 2.2校准曲线 按1.2中 的分析条件进行测定，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，采用外标法建立校准曲线。校准曲线线 性范围如表3所 示 ，校准曲线如图2所示，结果显 示 5种化合物线性相关性良好，线性相关系数大 于 0.999，准确度为 88.1~107.9%。 图25种化合 物 校准曲线图 2.3精密度实验 按照1.2分析条件，将校准曲线中S2基质标准溶液重复分析6次。5种化合物保留时间 RSD 小于 0.20%，峰面积 RSD 小 于 4.50%。 表4 5种化合物重复性实验结果 NO. 化合物 保留时间 RSD% 峰面积 RSD% 1 莫匹罗星 0.19 4.31 2 噻吗洛尔 0.07 3.41 3 特比萘芬 0.08 2.23 4 红霉素 0.18 3.04 5 夫西地酸 0.06 4.29 2.4样品测 定 及加标实验结果 按照1.4中样品处理方法对某乳液样品进行处理，上机分析，样品 中 未检出5种化合物。对此样品进行高中 低浓度加标实验，重复实验3次，加标量及加标结果如表5所示。 表5 实际乳液样品加标结果 NO. 化合物名 低浓度加标 中浓度加标 高浓度加标 加标量 (mg/kg) 回收率(%) RSD(%) 加标量 (mg/kg) 回收率(%) RSD(%) 加标量 (mg/kg) 回收率(%) RSD(%) 1 莫匹罗星 0.3 102.7 4.86 1.5 98.7 3.07 7.5 100.9 0.30 2 噻吗洛尔 0.03 99.0 1.59 0.15 98.2 0.75 0.75 95.9 0.51 3 特比萘芬 0.015 101.3 1.93 0.075 99.1 0.66 0.375 95.0 0.42 4 红霉素 0.015 105.3 3.85 0.075 103.0 1.72 0.375 102.4 1.13 5 夫西地酸 0.3 98.7 1.46 1.5 103.2 0.72 7.5 97.4 0.29 结论 本文采用岛津三重四极杆液质联用仪建立 了 化妆品中莫匹罗星等5种 违禁药物的定量分析方法。该方法灵敏度高、线性 范 围广、重 复性和样品加标回收率均良好，可用于化妆品中莫匹罗 星 等5种违禁药物的检测。 岛津应用云