【求助】NCCLS

卫生部颁发了（2000）412号文件，即《出血时间、凝血时间检验方法操作规则的通知》其精神如下：
一、停止使用出血时间测定项目的Duke 法，但出血时间的检验项目不废除。若临床怀疑血管壁异常可致出血性疾病时（如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等）可使用出血时间测定器法检测出血时间。
二、停止凝血时间测定玻片和毛细管法，用活化部分凝血活酶时间（APTT）或全血凝固时间（CT试管法）测定替代。
三、停止使用一般外科手术前和常规出凝血时间检测，用活化部分凝血活酶时间（APTT），血浆凝血酶原时间（PT）和血小板计数（PLT）联合测定替代，如临床有出血史时另加出血时间测定器法进行出血时间检测。
文件还规定各类医疗机构必须在2001年12月31日前达到要求。
根据《通知》精神，对一些相关的问题作以下简要说明。
止血可分为血管止血，血小板的作用，血液凝固及血管修复四个阶段。血小板在止血全过程中起非常重要的作用，因此血小板计数是判断止血功能的必备指标。但是许多病理因素（如血管性血友病、VWF缺乏原发性、血小板减少性紫癫等）可影响止血功能而导致出血，故此类病人需作出血时间的检查。
在凝雪过程中，血浆内源性凝血途径中Ⅻ被激活后，血浆中的诸因子依次被激活，连续放大使纤维蛋原变成纤维蛋白而止血。同样，血管收缩释放组织因子激活外源性凝血途径激活因子，连续放大使纤维蛋白原变成纤维蛋白而止血。APTT是一个检测内源性凝血途径的检查，主要反应血浆Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ因子的量和活性，而PT则是一个检测外源性凝血途径的检查，主要反应血浆凝血酶原、Ⅴ因子、Ⅶ因子的量和活性，而纤维蛋白质原（F1B）的检测可反应共同凝血途径中纤维蛋白原转变成纤维蛋白所需的"原料"，故通过APTT、PT及F1B的检查可基本达到凝血功能引起的出血的疾病的筛选。
INR是PT的国际标准化比值，在溶栓及口服抗凝药物的治疗时，既要溶栓又不能溶栓过度引起出血，INR则是提供此类保证重要指标，最重要的一点是，不同疾病的溶栓治疗INR范围不一致。
出血时间的检查采用出血时间测定器法，在检查时，需与临床医生共同完成（需在受检查者手臂作一切口），但在临床上，血管性血友病，遗传性血小板疾病等发病率仅几万分之一，故出血时间的检查作为特殊检查，在怀疑有上述疾病而引起的出血性倾向的病人，可申请出血时间的检查。
在作凝血检查时标本采集应注意的问题：
有了好的实验方法，还需要一个合格的标本，特别在凝血检查过程，标本的采集显得尤为重要。
1、抗凝剂比例，采用真空采血，标本管符合国际惯例，但在具体操作时有的标本未及时混匀或抽血太少、太多，导致结果同临床表现不符。
2、采血时应一针见血，以免组织因子的渗入，扎止血带时间不能过长，以免组织因子的渗入，扎止血带时间不能过长，以免血液浓缩，同时激活内源性凝血因子。采血中，最好不用止血带。
3、标本采集后，应注明采集时间并立即送检，因为Ⅴ因子是易变因子，时间超过4小时后，V因子活性大大降低而影响PT结果。
4、送标本过程中，应避免剧烈震动。