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【求助】UPLC-MS/MS,平行操作,样品峰面积不一样

液质联用(LCMS)

  • UPLC-MS/MS做某个药的血浆样品,换了N种提取溶剂,每次都是平行操作做两个样品,结果每次这两个样品的峰面积都不一样,咋回事啊?

    做标准品的时候,线性能做出来,应该不是质谱的事,大家帮忙分析下。

    提取溶剂试过了二氯甲烷、甲基叔丁基醚、乙醚等等,以及混合提取,氮气流吹干,流动相溶解,斡旋、离心,过0.22滤膜,然后才进针。

    每次两针之间都差挺多,不一定,有时另一个都不出峰,就是这样,帮忙分析下,另外柱子我也换过了、也试过甲醇沉淀蛋白二次提取,都不行。

    会不会和uplc这种小柱有关呢

    郁闷。。。。。
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  • dickwang2008

    第1楼2008/01/24

    如果你的柱子是新的,问题不大!因为我们一直使用这种小柱,每根基本上都能分析上万个生物样品。至于你提到的这个问题,在血浆样品中出现也是正常的,这就要求你在进行条件摸索时,至少平行做3份样品,然后看她们的平均值,来确定哪个条件更适合。当你确定你的最优条件后,只要线性跟准确度精密度能符合要求就是可以的!
    Good luck!

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  • i_maple

    第2楼2008/01/25

    二者峰面积不是差一点,有时候是差十几倍到几十倍

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  • i_maple

    第3楼2008/01/25

    同一份进针重现性很好的

    难道空气中到处都弥漫着我的药!!!!!!

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  • wshx

    第4楼2008/01/26

    我在做某含有羟基的样品是峰面积是越做越小,而另一化学性质很稳定的化合物则重现性很好,现在不知这个问题是否和样品本身化学性质有关,

    楼主是否用了缓冲盐,用盐的话由于有离子抑制峰会越来越小

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  • eleanor

    第5楼2008/01/30

    用internal standard 吗?
    或许萃取的时候,会有流失呢,,
    而且听说,有些带苯环的化合物,,用氮气吹会容易流失...
    相信不是uplc 的问题,,, 要不是你的matrix 有干扰....

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  • flyaway

    第6楼2008/02/14

    那明显就是前处理的问题了。

    i_maple 发表:同一份进针重现性很好的

    难道空气中到处都弥漫着我的药!!!!!!

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  • libing111

    第7楼2009/02/04

    测6个样RSD在10%左右就没有问题

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  • sonickurt

    第8楼2009/02/04

    同一个样重现性很好 平行样差别大 证明应该不是仪器的问题
    你实验了很多次 每次都不一样 个人认为有两个原因 要么你有个细节没注意 比如滤膜没换 进样瓶没换之类的 还有个可能就是 你前处理过程中有个能损失样品的操作 每次操作不同导致每次检验结果
    还是多做 慢慢摸索
    good luck

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  • zhufangwei

    第9楼2009/02/05

    你说两个平行样所得峰面积不一样不是很正常的吗,提取过程有偏差,你说这两个峰面积相差的太大,我就想知道一下,你一个样重复进样没有,一个样品同时进两针峰面积差异大不大,你走溶剂没有,标样什么的,都怎么样,试过没???

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  • sally98

    第10楼2009/02/05

    滤膜应该可以不用过,否则损失太大。涡旋后高速离心即可,12000rpm,10min,取上清进样,楼主可以试试看。

    i_maple 发表:UPLC-MS/MS做某个药的血浆样品,换了N种提取溶剂,每次都是平行操作做两个样品,结果每次这两个样品的峰面积都不一样,咋回事啊?

    做标准品的时候,线性能做出来,应该不是质谱的事,大家帮忙分析下。

    提取溶剂试过了二氯甲烷、甲基叔丁基醚、乙醚等等,以及混合提取,氮气流吹干,流动相溶解,斡旋、离心,过0.22滤膜,然后才进针。

    每次两针之间都差挺多,不一定,有时另一个都不出峰,就是这样,帮忙分析下,另外柱子我也换过了、也试过甲醇沉淀蛋白二次提取,都不行。

    会不会和uplc这种小柱有关呢

    郁闷。。。。。

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