仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
色谱
>
薄层色谱(TLC)
>
帖子详情
【转帖】薄层色谱分析步骤及注意事项
happy水中月
2008/02/10
私聊
薄层色谱(TLC)
薄层色谱法(thin layer chromatography简写TLC)是一种物理化学的分离技术,常用于药物的分离与分析。现对此方法的分析步骤及注意事项提点建议。
完成TLC分析通常需经制板、点样、展开、检出4步操作。
⑴制板
在一平面支持物(通常为玻璃)上,均匀地涂制硅胶、氧化铝或其他吸附剂薄层、样品的分离、检测就在此薄层色谱板上进行。
一般选用适当规格的表面光滑平整的玻璃板。常用的薄层板规格有:10cm×20cm、5cm×20cm、20cm×20cm等。称取适量硅胶,加入0.2%~0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na),充分搅拌均匀,进行制板。一般来说10cm×20cm的玻璃板,3~5g硅胶/块;硅胶与羧甲基纤维素钠的比例一般为1:2~1:4。制好的玻璃板放于水平台上,注意防尘。在空气中自然干燥后,置1l0℃烘箱中烘0.5~lh,取出,放凉,并将其放于紫外光灯(254nm)下检视,薄层板应无花斑、水印,方可备用。
⑵点样
用微量进样器进行点样。点样前,先用铅笔在层析上距末端lcm 处轻轻画一横线,然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样,如果要重新点样,一定要等前一次点样残余的溶剂挥发后再点样,以免点样斑点过大。一般斑点直径大于2mm,不宜超过5mm.底线距基线1~2.5cm,点间距离为lcm左右,样点与玻璃边缘距离至少lcm,为防止边缘效应,可将薄层板两边刮去1~2cm,再进行点样。
⑶展开
将点了样的薄层板放在盛在有展开剂的展开槽中,由于毛细管作用,展开溶剂在薄层板上缓慢前进,前进至一定距离后,取出薄层板,样品组分固移动速度不同而彼此分离。
① 展开室应预饱和。为达到饱和效果,可在室中加入足够量的展开剂;或者在壁上贴两条与室一样高、
宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封室顶的盖。
② 展开剂一般为两种以上互溶的有机溶剂,并且临用时新配为宜。
③ 薄层板点样后,应待溶剂挥发完,再放人展开室中展开。
④ 展开应密闭,展距一般为8~15cm。薄层板放入展开室时,展开剂不能没过样点。一般情况下,展开剂浸入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。
⑤ 展开剂每次展开后,都需要更换,不能重复使用。
⑥ 展开后的薄层板用适当的方法,使溶剂挥发完全,然后进行检视。
⑦ Rf值一般控制在0.3~0.8,当Rf值很大或很小时,应适当改变流动相的比例。
⑷ 斑点的检出
展开后的薄层板经过干燥后,常用紫外光灯照射或用显色剂显色检出斑点。对于无色组分,在用显色剂时,显色剂喷洒要均匀,量要适度。紫外光灯的功率越大,暗室越暗,检出效果就越好。
展开分离后,化合物在薄层板上的位置用比移值(Rf值)来表示。化合物斑点中心至原点的距离与溶剂前沿至原点的距离的比值就是该化合物的Rf值。
相关话题
1
【求助】薄层色谱的固定相??
2
【原创】薄层色谱拖尾
3
【求助】薄层扫描仪的检定规程
4
【求助】请教:薄层层析实验中,五色分开指的是哪五色?展开剂是什么
5
【原创】关于薄层色谱的命运和前途
近期热榜
迎国庆送壕礼!十月发帖抢大疆云台
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
喜迎国庆!第十七届原创大赛超级原创日参赛奖励翻倍
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
热门活动
【售后专场--招聘会】
第三届微课大赛投票进行中ing
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【版主公告】冠心丹参滴丸的薄层鉴别研究探讨 9月12日免费下载资料(当日有效)
2008/09/06
中药紫花前胡薄层色谱
已应助
2021/11/17
薄层色谱点样跑板之后成为一个点
求助
2019/10/11
【讨论】你有没有想过用聚酰胺刮板?
2010/09/27
【转帖】薄层色谱仪在毒化检验和书写材料书写时间鉴定中的具体应用方法和技巧
2007/11/06
快来围观冯老汉的加压薄层色谱仪“庐山真面目”
分享
2013/10/18
【资料】薄层色谱展开剂的回收再利用
2011/01/05
聚酯和溶剂的分析
求助
2016/11/15
大腹皮薄层
原创
2024/08/25
如何使两个极性相近的化合物在硅胶板上达到很好的分离效果?
已应助
2024/08/20
薄层色谱板问题
求助
2024/08/14
薄层色谱TLC的核酸标签
求助
2024/08/09
薄层色谱鉴定桑寄生,样品比对照品多斑点
原创
2024/08/03
求助药典中药材薄层色谱彩色图集
已应助
2024/07/30
油漆色泽问题,如何来使用色谱仪来识别
分享
2024/06/29
西洋参跑板,糊成一片
原创
2024/06/11
气象色谱仪显示ALS 故障代码 153是什么情况
求助
2024/09/27
如果计量器具较小,校准标签贴不开怎么办?
求助
2024/09/26
试剂保质期
求助
2024/09/26
出峰时间和分子离子峰一样,二级质谱图不一样是同种物质吗
求助
2024/09/28
液相玻璃吸滤头
求助
2024/09/26
环境空气氮氧化物曲线斜率偏高怎么办
已应助
2024/09/27
安捷伦ZORBAX SB-C18柱使用时升压太快怎么解决呢
求助
2024/09/26
顶空进样气相色谱分析水中环氧乙烷
求助
2024/09/26
【原创】2月10日推荐免费下载资料 UV8500双光束紫外可见分光光度计控制操作软件
2008/02/10
【2:1170】-------【过年了,蜘蛛也疯狂】
2008/02/10
【资料】材料试验机常见故障及排除方法
2008/02/09
【求助】求助:理化检验原始记录应涵盖那些信息?
2008/02/09
【资料】类胡萝卜素的制剂化研究
2008/02/09
【转帖】欧盟陷入转基因产品之争
2008/02/09
【简讯】5项食品营养成分检测标准即将出台
2008/02/09
【资料】出口泡菜生产企业注册卫生规范
2008/02/09
品牌合作伙伴
丹纳赫苏州基地 打工人的梦想
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...