【请求】为凝胶色谱建立---根据地

我们有两台岛津凝胶,还有waters和pl(高温)的.lc-10a已经用了十多年,去年又买了一台20,今年又买了一台20(正在购买中,奥运会后了).
我们的经验就是,仪器不怕用,越用越好用.呵呵.我们比较惊诧的是,示差检测器的光源,钨灯寿命通常只有两万小时,而我们却用了四万五千小时.有一天寿终正寝,total energe突然降到了0.5毫伏,换了个灯，一切又ok了。

抛砖引............................玉

呵呵很高兴闻禾老师的加盟，如果真能在这里创出一块专区，增进大家的交流和技术水平，无疑对大家都是有益的。。。
只是还需时间和人气的积累。。。
支持闻禾，希望坚持。。。

我也一直希望和各位大侠交流一下凝胶渗透色谱。希望大家一起进来哈！

因为平安奥运，避免一切可能出现的危险因素，实验基本停了。本以为可以放松一下一直紧张的神经系统了。谁知更难的任务又来了——技术讲座，nnd(学学happy ),我哪儿有那个能力！
挑战一下吧，挑战自己也是我喜欢做的事。
近期GPC总是小病不断，不是仪器，而是“结果”与“沟通”问题，我们常常被质疑，心中颇为郁闷，正好有此机会，准备讲讲有关GPC的基础理论知识，以期促进工艺分析的互相了解和认识，避免一些不必要的麻烦。
正在收集有关GPC方面的技术资料，希望大家支持和帮助。在使用GPC过程中，有什么心得，遇到过什么问题，一起来交流和讨论，让我们一起提高——
小不董，跑来跑去，你们不做版主了，但普及凝胶渗透知识，还需要你们做贡献啊。

感谢版主微凝胶渗透色谱置顶！

在测试方面，遇到了很多问题，下面一一提出。

问题一：
从微观上讲，进样针所获取继而释放的样品量偏差有多大，对实验结果有影响吗？

实验发现，同一个样品依次进样数针，每一针的峰面积都有一定差别，有时还很大，不成规律。如果是溶剂挥发导致样品浓度增加的影响，峰面积应该一致增大才是；环境温度波动不会有那么大的影响，考虑来考虑去，可能的影响因素归结到样品自身特性与进样量的准确性上来，也不知这个考虑方向是否有道理，请大家参与讨论并多多指教。

如果可以的话，闻禾姐把整理的心得、资料等等也在这里分享一下？
在这里为大家也开一个讲座

在技术区,我一般都是“免开尊口”的。面对专业人士，我这个“半路出家”的操作人员，只能当“学者”，只是凝胶渗透版块人气有点弱，或者说巨弱，但在那儿我的确受益匪浅，下载了不少有用的资料，技术资料和人气也需要日积月累。深深感谢那些不曾谋面的热心朋友，尽管大部分都不知道名姓。凝胶渗透版块我可能就记住了跑来跑去和小不董（恭喜小不董喜得千金），非常怀念那里。

问题二

不知大家利用凝胶渗透进行测定分析时，是否做重复进样，做几次。因为新科研项目开发，分子质量超了原来柱子的适用范围，不但更换了新柱子，同时需要建立新的分析测试条件。在对大分子进行重复实验时，发现大部分情况下都有这样的趋势，即后一次的峰位分子质量都比前一次的小一些，分布有所展宽，这样的现象是由于什么原因造成的呢？

是不是我所用的柱子已经被样品“玷污”了呢？我们用的柱子是PL的10um，混合柱。样品最初起点分子量高达两三千万。我认为凝胶粒可能已经不太圆了，或者有些样品或者杂质已经被小孔“金屋藏娇”了。

大家各抒己见，帮我解读一下，我的问题的根本原因到底是什么？。

我想到哪儿就写到哪儿啊，可能比较乱，也可能语无伦次。嘿嘿，就这水平，希望在大家帮助下得以提高。

问题三：

关于k,a值的问题。请问各位凝胶渗透色谱测试人员和GPC专家，在测定不同物质的相对分子质量及其分布的时候，在测定同种物质但结构改变的情况下，你们所用的k,a值是随之改变呢？还是干脆相对到底，就用标准样品通常为聚苯乙烯的k,a值呢？