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【求助】关于酶的稀释和保存

生命科学仪器综合讨论

  • 由于要测一些酶的活性
    实验室订购了一下一些酶(试剂):

    辣根过氧化物酶
    葡萄糖氧化酶
    磷酸葡萄糖变位酶
    6-磷酸葡萄糖脱氢酶
    烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(辅酶Ⅱ,NADP+)
    尿嘧啶核苷-5'-二磷酸葡萄糖(UDPG)
    D-果糖-6-磷酸二钠盐(6-磷酸果糖)
    D-葡萄糖-1-磷酸二钠盐(1-磷酸葡萄糖)

    现在要稀释这些酶(试剂)
    1.用蒸馏水稀释可以吗?如果不可以,用什么缓冲剂比较好?
    2.稀释后的溶液可以长时间保存吗?如不能,最长的时间是多久?
    小弟初入此道,望各位大侠细心解答,不胜感激!!
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  • It is me!

    第1楼2008/11/27

    因为你的酶比较多,没有确切一定缓冲液适合所有的酶的.

    如果真是一定要某个溶液去稀释的话,用20%甘油.

    分装后-20度冰箱冷冻保存.时间基本上很长.最长时间不能确定.

    warlf 发表:由于要测一些酶的活性
    实验室订购了一下一些酶(试剂):

    辣根过氧化物酶
    葡萄糖氧化酶
    磷酸葡萄糖变位酶
    6-磷酸葡萄糖脱氢酶
    烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(辅酶Ⅱ,NADP+)
    尿嘧啶核苷-5'-二磷酸葡萄糖(UDPG)
    D-果糖-6-磷酸二钠盐(6-磷酸果糖)
    D-葡萄糖-1-磷酸二钠盐(1-磷酸葡萄糖)

    现在要稀释这些酶(试剂)
    1.用蒸馏水稀释可以吗?如果不可以,用什么缓冲剂比较好?
    2.稀释后的溶液可以长时间保存吗?如不能,最长的时间是多久?
    小弟初入此道,望各位大侠细心解答,不胜感激!!

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  • dong3626

    第2楼2008/11/27

    应助达人

    感觉酶的保藏和分装,首先是看试剂公司给你们提供的说明书操作,如果没有,看酶是什么形态的,固体粉末还是液体的;
    还有就是你做什么样的实验,根据你的实验情况,来选择稀释液,蒸馏水并不适合稀释这些酶的。
    因为有些酶需要保存在零下20度甚至液氮中的,这样用水,冷冻之后在解冻过程中,反复几次,酶的活性就会遭到破坏的。

    需要配制成比较浓的母液(根据你实验的浓度选择母液浓度,自己把握),然后再分装几个小管里面,尽量减少其反复解冻的次数!

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  • warlf

    第3楼2008/12/01

    谢谢楼上的两位
    真的十分感谢

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  • warlf

    第4楼2008/12/01

    因为我的实验可能要持续一两个月

    时间很长

    还希望有做过类似实验的高手给予一些经验

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  • 戈壁明珠

    第5楼2008/12/01

    应助达人

    高浓度的可以保存较长时间,做过酶联免疫,好像有专门的稀释缓冲剂,不同的酶使用的也不一样。稀释后就得尽快用完。

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  • warlf

    第6楼2008/12/02

    看样子只能勤用勤配了

    谢谢给位

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  • tianru的爸爸

    第7楼2008/12/12

    第一个酶,我们常用,可以在4度放置很长时间,超过1个月,活性还能保持90%。
    但我们一般是在酶溶液里加上一定量的BSA,不知道是否影响你下面的试验。

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  • warlf

    第8楼2008/12/19

    谢谢 “跑来跑去”

    我再查查

    我的这几种酶最低保存温度是-20℃

    我在想可不可以配成高浓度母液分装到1.5mL EP管中保藏

    或者20%甘油稀释在-20℃保藏

    不知道甘油对我的实验有没有影响(我的实验主要是测酶活,用分光光度计比较多)

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