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【原创】PTI 稳态/瞬态荧光光谱仪交流

分子荧光光谱

  • 去年年底实验室买了一台美国PTI光谱仪,因为之前的HITACHI和PE的不能满足一些实验的要求了。跟大家聊聊,交流一下心得。
    厂家宣称他们灵敏度最高,信噪比可以达到10000:1以上(水的拉曼峰),可以达到Am级别的微弱信号。上次他们工程师来调试时,开始灵敏度只能到8000多,几次测下来都差不多这个值,后来推测可能是染料没除净的问题,把比色皿放到酒精里泡了一晚后,重新擦干净就好多。达到了13000多,所以在测试时一定要注意比色皿的洁净度。
    由于我们学校在南方,湿气也比较大吧,空气质量也不是很好,加上用了半年多,确实有些影响。在保存时如果有条件的话,不要放在湿气太重的环境。
    瞬态配的是激光器,单色性还不错,强度也比较高。最低据说可以到100ps,不过还没做过这么低的。检测起来还是很快的,只要几分钟,在原单位用过一台德国的,觉得太慢了,测量起来要大半天,不过数据好像要比PTI稍准点。
    使用了一段时间,暂时还没什么毛病,大体情况就是这样,仅供参考。但毕竟是个大物件,还是要考虑好。后面是当时厂家提供的一些指标。

    PTI推出的QuantaMaster系列荧光稳态测量系统具有测量可靠、灵敏度高、使用方便、配制灵活等优点,系统信噪比一般为6000:1,最高可达10000:1,数据采集速度可达1000 点/秒, 波长范围从紫外到近红外,样品所处的环境温度可调。除常规的荧光稳态测量外,还可进行各向异性(偏振)、双发射、化学和生物发光等方面的测量。通过扩展和升级,可实现电致发光、磷光、荧光寿命、荧光比率和比率成像等的测量。在稳态光谱测量中,通过使用光子计数技术,提供最高的微弱信号检出能力,可对荧光物质进行定性检测和定量分析。

    主要应用

    1、光物理与光化学、光合作用机理
    2、分子反应动力学
    3、突变筛选
    4、缩氨酸结合动力学
    5、FRET动力学
    6、发射光谱和荧光淬灭
    7、荧光量子产率、荧光偏振及导向性
    8、蛋白质结构与折叠的研究
    9、DNA测序研究 、ds-DNA中的染料探针
    10、膜的渗透性及结构研究、膜的流动性和脂相转移
    11、药物与生物体系相互作用的检测
    12、溶剂-溶质相互作用
    13、麻醉过程研究

    主要规格:
    ★ 信噪比(水的拉曼峰):6000:1 最高可达 10000:1
    ★ 数据采样率:每个通道1000点/秒~1点/100秒 ,可同时采集
    ★ 波长范围:180~24000nm 连续可调(由选用的光栅和灯泡决
    定)
    ★ 波长带宽:0~25nm 连续可调
    ★ 检测范围:185~650nm (使用1527型PMT,可扩展至NIR)
    ★ 波长分辨率:0.2nm
    ★ 波长精度:+/-0.5nm

    PTI推出的TimeMasterTM系列荧光寿命测量系统采用了先进的频闪分时测量技术和非线性时标据采集技术,具有测量速度快、精度高、灵敏度高、使用方便、配制灵活等优点,是目前测量速度最快、最先进的荧光寿命测量系统。该系统能够探测7pM荧光素的寿命,最短测量寿命可达100ps。激发光源可采用激光、弧光脉冲及LED灯以满足不同的应用。通过扩展和升级,可实现电致发光、磷光、荧光稳态、荧光比率和比率成像等的测量。

    PTI推出的QuantaMaster系列荧光稳态测量系统具有测量可靠、灵敏度高、使用方便、配制灵活等优点,系统信噪比一般为6000:1,最高可达10000:1,数据采集速度可达1000 点/秒, 波长范围从紫外到近红外,样品所处的环境温度可调。除常规的荧光稳态测量外,还可进行各向异性(偏振)、双发射、化学和生物发光等方面的测量。通过扩展和升级,可实现电致发光、磷光、荧光寿命、荧光比率和比率成像等的测量。在稳态光谱测量中,通过使用光子计数技术,提供最高的微弱信号检出能力,可对荧光物质进行定性检测和定量分析。


    主要应用

    1、光物理与光化学、光合作用机理
    2、分子反应动力学
    3、突变筛选
    4、缩氨酸结合动力学
    5、FRET动力学
    6、发射光谱和荧光淬灭
    7、荧光量子产率、荧光偏振及导向性
    8、蛋白质结构与折叠的研究
    9、DNA测序研究 、ds-DNA中的染料探针
    10、膜的渗透性及结构研究、膜的流动性和脂相转移
    11、药物与生物体系相互作用的检测
    12、溶剂-溶质相互作用
    13、麻醉过程研究

    上图,通过激发光谱来监测使用Fura-2滴定的Ca2+的变化
    主要规格:
    ★ 信噪比(水的拉曼峰):6000:1 最高可达 10000:1
    ★ 数据采样率:每个通道1000点/秒~1点/100秒 ,可同时采集
    ★ 波长范围:180~24000nm 连续可调(由选用的光栅和灯泡决
    定)
    ★ 波长带宽:0~25nm 连续可调
    ★ 检测范围:185~650nm (使用1527型PMT,可扩展至NIR)
    ★ 波长分辨率:0.2nm
    ★ 波长精度:+/-0.5nm

    PTI推出的TimeMasterTM系列荧光寿命测量系统采用了先进的频闪分时测量技术和非线性时标据采集技术,具有测量速度快、精度高、灵敏度高、使用方便、配制灵活等优点,是目前测量速度最快、最先进的荧光寿命测量系统。该系统能够探测7pM荧光素的寿命,最短测量寿命可达100ps。激发光源可采用激光、弧光脉冲及LED灯以满足不同的应用。通过扩展和升级,可实现电致发光、磷光、荧光稳态、荧光比率和比率成像等的测量。

    主要应用

    1、蛋白结构和折叠;
    2、核酸动态特性与结构;
    3、光合作用机理;
    4、激发态特性;
    5、层面研究;
    6、膜的渗透性与离子转移;
    7、膜的动态特性和结构;
    8、分子距离和旋转动态特性;
    9、溶剂与溶质的相互作用;
    10、微胞结构与反应动力学;
    11、污染物质的探测与辨别;
    12、聚合物结构和动态特性;
    13、药与生物系统的相互作用;
    14、混合荧光物质的探测与辨别。

    主要规格:
    ★ 灵敏度:可测量7pM荧光物质的寿命
    ★ 寿命测量范围:100ps~10s (依靠所用光源及检测器)
    ★ 激光波长范围:235~990nm (依靠所使用染料而定)
    ★ 脉冲宽度:800ps
    ★ 脉冲能量:在500nm、5Hz时,每个脉冲220mj
    ★ 检测范围:185~650nm (使用1527型PMT,可扩展至NIR)
    ★ 波长分辨率:0.2nm
    ★ 波长精度:+/-0.5nm
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  • fragr

    第1楼2009/06/19

    请公布信噪比测试数据 和 计算方法

    我有样品要测试,能帮忙吗?

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  • cheng7692

    第2楼2009/06/19

    请教一下搂主,bandpass和slit怎么确定?

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  • 锐飏

    第3楼2009/06/19

    全是参数,不会是厂商吧??

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  • fragr

    第4楼2009/06/21

    似乎是高端机里面最差品牌。很多指标都很离谱。

    tmxk999 发表:全是参数,不会是厂商吧??

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  • pfz1985

    第5楼2009/07/02

    这个仪器没有听说,用过瓦里安和岛津的,各有优缺点

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  • loyaldavis

    第6楼2009/07/10

    PTI调研过,国内好像就没几台。
    福建那边有一台到现在还没验收呢。
    不敢买啊

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  • wade

    第7楼2009/08/24

    PE和瓦里安信噪比一般低于1000:1,通常我们称之为小荧光。由于其价格便宜几乎在所有理工类学院都能见得到,因此知道的人相对多一些,学生用过的较多。我们通常说的大荧光指的是稳态瞬态荧光光谱仪。信噪比高(〉6000:1),模块化的设计,可扩展的空间大,可实现很多功能的测量。
    PTI (Photon Technology International) 在这方面做的不错,但在中国知道这个品牌学生不多,一般国内外有名的老师都了解。主要原因是该厂家只做高端市场,属于荧光测量的全球领导厂商。从其官方网站公布的各项参数可以看出其产品性能比其他厂家有很多优势,但其价格相对高。

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  • wade

    第8楼2009/08/24

    bankpass 可以通过slit调节来确定。slit 可以通过计算机精确控制。

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  • 魅力星光

    第9楼2009/08/25

    虽然没有美国PTI,也学习学习..

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  • jack_zxd

    第10楼2010/01/28

    您说的确实是实情,目前PTI在国内的用户不多,大约有45家左右,主要是我们的代理工作做的不好。目前PTI在全球用户有上万家,我想中国市场在将来会迎头赶上!

    loyaldavis(loyaldavis) 发表:PTI调研过,国内好像就没几台。
    福建那边有一台到现在还没验收呢。
    不敢买啊

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