【LC参数解读编号2--luxw提问】关于LC的问题：色谱柱及泵的压力

longly 2009/08/24

[quote]原文由 [B]emoc98311[/B] 发表: 1.色谱柱的塔板数在低于多少时报废呢？冲洗柱子用5+95的甲醇+水好些还是用纯甲醇 2.在实验结束，冲洗色谱柱（200mm为例）时，用多少水和乙腈来冲洗呢？目的是即保护了柱子又节约了乙腈！ 3.泵的压力是不是越高说明泵性能越好呢？最高为400，那么我们平时在多高时，会认为损害泵呢？ 4.高压力对泵的损害大还是对色谱柱损害大呢？ [color=#DC143C][B]这只列了一小部分，大家可以提问或分享自己的经验！[/B][/color] [/quote] [em09508] 1、塔板数无一定的强制性要求，要看你的使用，分析不同物质要求不一样，当做一种物质分析时，塔板数很低了，但还能有效分离，还会顶用；或作为别一种物质分析用； 2、洗柱，如果是非极性柱，曾经走过含盐流动相，一般先用95%纯水冲洗30倍柱体积后，再慢慢切换到纯有机相冲洗！ 3、乙腈很贵，而且毒性大，一般用甲醉顶用，但乙腈的的极性比甲醇弱，所以对于非极性柱，乙腈的洗脱能力较强，可以用水-甲醇体系洗完柱后，再用乙腈冲一下，再用乙腈保柱！ 4、泵的性能指标中压力是其中一项，理论上是能耐受压力越大越好，但还要看流速范围、流速精度、压力脉冲稳定性、串并联方式等； 5、一般说400Bar是泵的最大建议耐受保护反压，超压了，系统会自动保护关泵，但实际上机械能耐受比400Bar高的反压，但很多常规柱子柱压等度洗脱时时超过300Bar，柱头已经很脏，要注意使用和维护了，很容易梯度洗脱时就超压！ 6、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]系统一般会有压力保护系统，超压关泵保护，不会对泵有大影响，但泵在高压下突然泄压会很危险！柱子在高压下很容易塌陷，变形，如果突然泄压会起泡，流失！ [em09511]

david03052120 2009/08/25

2.在实验结束，冲洗色谱柱（200mm为例）时，用多少水和乙腈来冲洗呢？目的是即保护了柱子又节约了乙腈！ 如果要想节省乙腈，就用甲醇来代替吧，效果一样，价格上便宜一些

宁夏恋冰 2009/08/25

色谱柱的保养 1)柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动； 2)当柱子和色谱仪联结时， 阀件或管路一定要清洗干净； 3)要注意流动相的脱气； 4)避免使用高粘度的溶剂作为流动相； 5)进样样品要用流动相定容并过滤； 6)严格控制进样量； 7)每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品； 8)每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱； 9)若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂充满并密封保存； 1．使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度） 2．大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围 3．避免流动相组成及极性的剧烈变化 4．流动相使用前必须经脱气和过滤处理 5．如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存高比例乙腈中 6．压力升高是需要更换预柱的信号.

柏坡 2009/08/25

[quote]原文由 [B]emoc98311[/B] 发表: 1.色谱柱的塔板数在低于多少时报废呢？冲洗柱子用5+95的甲醇+水好些还是用纯甲醇 2.在实验结束，冲洗色谱柱（200mm为例）时，用多少水和乙腈来冲洗呢？目的是即保护了柱子又节约了乙腈！ 3.泵的压力是不是越高说明泵性能越好呢？最高为400，那么我们平时在多高时，会认为损害泵呢？ 4.高压力对泵的损害大还是对色谱柱损害大呢？ [color=#DC143C][B]这只列了一小部分，大家可以提问或分享自己的经验！[/B][/color] [/quote] 塔板数的要求跟行业要求有关，像我们这一般低于2000就不用了。 柱子一般还是用甲醇冲的好，经济实惠色谱柱的保养经常用纯甲醇冲冲，一般3-4个小时一周一次就可以了。 低压泵还是不要高压作业的好，一般做样柱压2000Pis以内比较好。 高压情况损伤的柱子比较严重些，直接关系到柱子寿命。

〓猪哥哥〓 2009/08/24

[quote]原文由 [B]emoc98311[/B] 发表: 1.色谱柱的塔板数在低于多少时报废呢？冲洗柱子用5+95的甲醇+水好些还是用纯甲醇 2.在实验结束，冲洗色谱柱（200mm为例）时，用多少水和乙腈来冲洗呢？目的是即保护了柱子又节约了乙腈！ 3.泵的压力是不是越高说明泵性能越好呢？最高为400，那么我们平时在多高时，会认为损害泵呢？ 4.高压力对泵的损害大还是对色谱柱损害大呢？ [color=#DC143C][B]这只列了一小部分，大家可以提问或分享自己的经验！[/B][/color] [/quote] 1、和标准测试样品比对，到了1000-2000就基本报废了。先用甲醇水再用甲醇 2、冲柱子最好是用甲醇，如果明天还需要用乙腈，那就用乙腈保存。用流动相暂时保持一段时间也是可以的。 3、泵压力越高，性能越好，如UPLC。只要不超过，低于最大压力几十bar最好。 4、我觉得是色谱柱，仪器可能耐受400bar，可是有的柱子耐压在200bar。