viernes
第7楼2009/11/19
恩 看到了
这个是分子是化学发光的催化剂 是吧
荧光分子标记的蛋白 可以紫外灯下 过柱洗脱收集
但是 你这个化学发光
小分子分离收集 如果用HPLC 估计你也没有那么多AFP来浪费
Beckman的毛细管电泳有配套设备可以收集馏分的 不过也只是听说过
不知你用过没 如果CE可以顺利分离AFP馏分 这倒不失为一个好方法
你说你 EDC NHS系统标记AFP失败
请问你 试剂加入顺序 加入浓度 以及 孵育时间 是多少
此外 CE分离AFP步骤 你确定是否没问题
另外,可以好好研究下Dynal beads上的偶联方法
他们用的是 NaAc溶液 弱碱性
如果你还想重复该实验 可以试试BSA 或者 便宜点的抗体 试试
毕竟 没有人敢拿AFP 不停地试啊试的
但有的protocol 也不是试几次就能试出来的
plf0717
第8楼2009/11/19
您好,我是做毛细管电泳电化学发光,用的就是电化学发光检测器。西安瑞迈的仪器。
还有人用这套仪器的吗?一起加入交流交流。呵呵
以前实验室做过DMBA(共反应剂,结构图在回复帖中)标记BSA,1mgDMBA+1mgEDC+1mgNHS(溶于DMF中),然后标记BSA,不过进样检测没标记蛋白信号,只有DMBA,EDC的信号(问题:如何淬灭EDC)。
另:您的Dynal beads的偶联方法附件好像没看到呢,