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莱克多巴胺检测方法

1．分析目标化合物
　　莱克多巴胺

2、仪器设备
　　高效液相色谱-质谱仪（LC-MS）。

3、试剂
　　除下列试剂外，使用附录2所列试剂。
　　莱克多巴胺：含莱克多巴胺99％以上，熔点为163.9℃～164.6℃。

4．试验溶液的制备
　　1）肌肉、肝脏、肾脏和其它可食用部分
　　肌肉：尽可能除去脂肪层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。
　　肝脏、肾脏和其它可食用部分：搅碎混合均匀后，称取其5.00g。加入20mL乙酸乙酯和1mL4mol／L碳酸钾溶液，均质后，以每分钟3000转离心分离10分钟，收集乙酸乙酯层。离心管内残留物中加入20mL乙酸乙酯，振荡5分钟后，按上述同样条件离心分离，合并所得的乙酸乙酯层，40℃以下浓缩，除去乙酸乙酯。 残留物中加入30mL乙腈溶解，移入分液漏斗中。加入30mL乙腈饱和正己烷，振荡，弃去正己烷层，重复操作2次。乙腈层在40℃以下浓缩，除去乙腈。残留物中加入1.0mL甲醇溶解，此为试验溶液。
　　2）脂肪
　　尽可能除去肌肉层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。加入30mL乙腈和30mL乙腈饱和正己烷，均质后，以每分钟3000转离心分离10分钟，乙腈层移入分液漏斗中。离心管内的正己烷层和残留物中加入30mL乙腈，振荡5分钟，按上述同样条件离心分离。合并所得的乙腈层于前面的分液漏斗中，加入30mL乙腈饱和正己烷。激烈振荡5分钟后，静置，收集乙腈层， 40℃以下浓缩，除去乙腈。残留物中加入1.0mL甲醇溶解，此为试验溶液。

5．标准曲线的制作
　　将盐酸莱克多巴胺标准品配制成0.025～0.5mg（以莱克多巴胺计）/L的甲醇溶液数点，分别注入GC-MS中，用峰高法或面积法绘制成标准曲线。

6．定量试验
　　注入试验溶液于GC-MS中，根据5的标准曲线求出莱克多巴胺的含量。

7．测定条件
　　LC-MS柱：十八烷基甲硅烷基化硅胶（粒径2～5μm），内径2.0～6.0mm、100～250 mm的不锈钢管。
　　 柱温：40℃。
　　流动相：乙腈：0.05%三氟乙酸（1：4）混合溶液。
　　主离子( m/z)： ESI+ 302
　　保持时间标准： 4 ～ 6 分钟

8．定量界
　　0.01 mg/kg

9．注意事项
　　1) 检测方法概述
　　本方法用乙酸乙酯或乙腈从样品提取中莱克多巴胺，用乙腈／正己烷分配脱脂后，LC/MS测定和确证。
　　2) 注意点
　　①莱克多巴胺存在4 种光学异构体。由于用柱子分离光学异构体，确认有复数峰时，应以各峰高或峰面积的和计算。
　　②采用主离子的仪器设备，因最佳离子化方法、生成的离子有不同，所以要研究仪器的最佳条件。对于主离子之外的确证离子，ESI+为284( m/z)。

具体的标准好像还没有

还有一种快速的检测方法，是利用酶标仪的，有具体实践检测步骤吗？

我们使用的农业部１０２５号公告－６－２００８你下载来看看