呵呵,学习了,缓冲液还没有用过
xue2009(xue2009) 发表: 今天继续谈下我对LC的认识,已经有很多天没写了。
首先完整阐述下流动相加缓冲盐的作用。大家都知道的是加入缓冲盐可以稳定杆PH值,改善峰型。它还有很多作用的,比如加入缓冲盐可以提高离子强度进而改善有些峰的前延和拖尾,原因是这些离子先和一部分硅羟基发生作用,可以避免有些目标物和硅羟基发生强烈的作用;并且缓冲盐的浓度越大,对于目标物的保留时间都是有影响的, 可以使保留时间略微增大,原因是缓冲盐的浓度越大,相当于流动相的极性越大,这样对于纯粹的反相保留机制而言,流动相的洗脱能力是减小的,因而保留会增强;它还有一个作用就是用于梯度洗脱时可以减弱基线的漂移,我们知道:梯度洗脱基线的漂移是由于流动相A相(水相)和B相(有机相)的紫外吸收差异所导致的,有机溶剂的紫外吸收总是大于水,而走梯度时有机相的比例是逐渐增大的,这样由于紫外吸收的差异造成基线漂移,如果水相中加缓冲盐,便可以增大水相的紫外吸收,这样就可以通过A相与B相的“吸收匹配”来消除基线的漂移,所以我们看到梯度洗脱一般用缓冲盐还有这个作用。
第二谈下C18柱的问题,不同型号的C18柱是有差异的,这里我想谈下亲水的C18柱,这是先在碳十八烷基链上先键合了一些亲水的、极性的官能团,再将十八烷基链和硅胶键合的 ,根据相似相溶原理,键合极性官能团的C18柱当亲水性较强,并且具备较好的选择性。关于这些极性官能团的键合位置,大家要搞清楚,不是键合在硅胶上,而是键合在C18烷基链上的,因为此前有人在论坛上误导人,这里给纠正下。
这都是我的随笔,以后会逐渐将LC的问题和大家讨论,共同进步,谢谢。