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【转帖】HPLC流动相的性质要求 点滴
省部重点实验室
2010/12/12
私聊
厂商论坛
HPLC
流动相的性质要求
一个理想的
液相色谱
流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
选好填料
(
固定相
)
后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子
k
降低
;
而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子
k
升高。因此,
k
值是流动相组成的函数。塔板数
N
一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应考虑以下几个方面:
①
流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。
②
纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。
③
必须与检测器匹配。使用
UV
检测器时,所用流动相在检测波长下应没有吸收,或吸收很小。当使用示差折光检测器时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相,以提高灵敏度。
④
粘度要低
(
应
<2cp)
。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质,降低柱效,还会使柱压降增加,使分离时间延长。最好选择沸点在
100
℃
以下的流动相。
⑤
对样品的溶解度要适宜。如果溶解度欠佳,样品会在柱头沉淀,不但影响了纯化分离,且会使柱子恶化。
⑥
样品易于回收。应选用挥发性溶剂。
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