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【求助】GPC测水溶性大豆多糖分子量的标曲的做法

rabbit12345

2010/12/24

凝胶色谱（GPC）

大家好，本人最近在测自己从豆渣中提取的水溶性大豆多糖的分子量分布（水溶性大豆多糖的分子量从五千到一百万之间），用分子量分别为5000 10000 40000 200000 500000 1000000 2000000的葡聚糖做了标曲，标曲上线性可用的保留时间为8.163到9.553，分子量是从5000到1000000.请教是问题为：1.自己觉得标曲上的保留时间间隔太短，不容易区分不同分子量，所以，如何使标样的保留时间间隔大一些？ 2.自己提取的样品走出来的峰很乱，在四分多钟就已经出峰了，这是什么原因？如何改善？
谢谢大家

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有水有渝

第1楼2010/12/24

应助达人

楼主先说明一下你用的是哪个标准检测的，色谱条件是什么？

0

redrumcha

第2楼2010/12/24

5000-1M间隔才1min多？的确太短了，用的什么柱子呀，什么方法分离的呢？

0

tigertooth

第3楼2010/12/24

如果你的软件可以，你可以把标样分成2组分次进样，最后拟合成一条标准曲线。
出峰太早原因很多，就像楼上说的，要说具体条件才好判断。

0

小不董

第4楼2010/12/24

应助达人

很可能你选择的柱子并不是很适合，5k到1000k跨度还是比较大，一般选择混合柱才能达到你想要的结果，色谱条件你没说明，使用的是什么流速？如果你觉得分离时间跨度太窄，那就再增加一根柱子来达到分离效果，至于你的样品，就不好下结论，你自己对你的目标物才了解。前处理是否满足要求等。是否还含有其他干扰物质?

0

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