abc_1982
第6楼2011/05/27
2.氯霉素
氯霉素是一类1-苯基-2-氨基-1-丙醇的二乙酰胺衍生物。这类独特的抗生素通常由以下三种化合物组成:氯霉素(CAP),甲砜(氯)霉素(THA),氟甲砜(氯)霉素(FLR).上述三种抗生素都具有共同的主链架,它们均被称为“苯醇类”。由于氯霉素在用于治疗人类疾病时,其众所周知的队人体的副作用(如再生障碍性贫血、再生不良性贫血症、粒性白血球减少、舌炎、口腔炎等),因此在美国和加拿大立法规定不允许将氯霉素用于食用动物和鱼类养殖中。在1996年,为治疗牛的呼吸系统疾病(BRD),批准了由有执照的兽医或按其医嘱对牛有限地使用FLR。一些国家允许它们使用,但仍保持严格控制。食用动物接触这些药物,无论是通过非法或不正确地使用非处方(OTC)药品,还是跨标签范围用药及/或不遵守适当的停药时间,都会导致在食品中存在超过最大残留水平(MRL)的残留物,这将影响到人类健康。关于动物性食品中CAP,THA和FLR的残留问题,导致必须加强对动物产品和水产养殖品的检测。
正文
LC-MS/MS方法检测食品中氯霉素残留
1. 适用范围
本方法适用于食品中氯霉素残留的检测。
2. 提取
称取相当于原始样品5g(精确至0.01g)的制备好的试样,置于50 mL具塞离心管中,准确加入100μL氯霉素-d5(200ng/mL)内标溶液,加入15 mL乙酸乙酯,振荡10 min,以3000 r/min离心10 min,吸取上层乙酸乙酯,置于50mL具塞离心管或25mL玻璃刻度离心管中,再加10mL乙酸乙酯提取第二次,合并提取液,在45°C±5°C,水浴用氮气吹干仪吹干待净化。
a. 对于含脂肪量低的样品,加入2 mL乙腈溶解残渣,加入2 mL正己烷(用乙腈饱和过),涡旋1 min,静置分层,弃去上层正己烷层.如果样品中含有较多的脂肪,则重复上述净化步骤直到正己烷层变清。乙腈层氮气吹干,5 mL 20%甲醇水溶液复溶,待净化;
b. 对于加工过的及含脂肪量高的水产品或肉类,加入1 mL甲醇,涡旋1 min,加入15 mL 4%的氯化钠溶液,10 mL正庚烷,振摇30 sec,静置分层(若分层不好,可稍加离心,1000 rpm,1 min),弃去上层正庚烷层,再加入10 mL正庚烷重复一次去油步骤,下层液体待净化。
3. 净化
活化/平衡:依次用3 mL甲醇和3 mL水通过Welchrom® BRP, 60mg/3mL (P/N:WSP010306)固相萃取小柱,流出液弃去;
上样:将上述待净化液加入柱中,流出液弃去;
淋洗:用3 mL 20%甲醇淋洗小柱,流出液弃去;
洗脱:3 mL甲醇洗脱,收集洗脱液
40℃氮气吹干,1 mL 50% 甲醇溶解,0.22μm针孔滤膜过滤后,待分析;
4. 色谱质谱条件
4.1 色谱条件
色谱柱: Xtimate C18 液相色谱柱(2.1 mm*50 mm, 3 μm)
流动相:
|
名称 | 母离子 | 子离子 | 碎裂电压 (Fragment) | 驻留时间 (ms) | 碰撞能量 (V) | 定量离 子对 | 定性离 子对 |
氯霉素(CAP) | 321.0 | 152.1 | 110 | 100 | 18 | + | - |
257.2 | 110 | 100 | 11 | - | + | ||
120.9 | 110 | 100 | 23 | - | + | ||
CAP-D5 | 326.1 | 157.1 | 120 | 100 | 20 | + | - |
添加水平(μg/kg) | ||||||
分析物 | 0.5 | 2 | 10 | |||
Recovery (%) | RSD (%) | Recovery (%) | RSD (%) | Recovery (%) | RSD (%) | |
氯霉素 | 103.9 | 9.29 | 97.5 | 3.53 | 95.5 | 6.27 |