仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【求助】遇到几个问题

毛细管电泳(CE)

  • 1.我设置的电压是20kv但是每次分离过程中实时显示的电压是14kv左右,这是什么原因啊。2.倒峰出现前后的基线不在一条水平线上,总是出倒峰之后基线抬高了,是不是和灯的寿命超出有关系呀?3.电泳图中峰很宽,有时候能拖个1min,现在实验实在没进展了,比较纠结啊。。。

    重现性差的实在可以,请求各位高手指点啊。
  • 该帖子已被版主-userwzy加2积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖
    +关注 私聊
  • userwzy

    第1楼2011/06/21

    你用的什么体系,是不是电流太高导致电压上不去,或者空气太潮湿?

    电渗流倒峰之后,极限抬高多少,其实如果依旧平稳,不影响分离,可以不用管它。

    峰宽,应该是分离体系不合适,优化一下吧,这也会导致重现性变差。

0
    +关注 私聊
  • heguang

    第2楼2011/06/21

    什么分离条件?电流多少?

0
    +关注 私聊
  • lvseyu3

    第3楼2011/06/22

    电压设定15kv。电流刚开始设定上限100uA,后来就直接设成自动最高限,有可能是这个问题。。我再看看。。
    分离体系是不是说缓冲溶液选择不合适啊。还是说缓冲溶液的浓度和pH需要优化?

    userwzy(userwzy) 发表:你用的什么体系,是不是电流太高导致电压上不去,或者空气太潮湿?

    电渗流倒峰之后,极限抬高多少,其实如果依旧平稳,不影响分离,可以不用管它。

    峰宽,应该是分离体系不合适,优化一下吧,这也会导致重现性变差。

0
    +关注 私聊
  • lvseyu3

    第4楼2011/06/22

    分离电压20kv,hepes-tris缓冲,浓度是50mM,pH是7.4.分离温度20度

    heguang(heguang) 发表:什么分离条件?电流多少?

0
    +关注 私聊
  • lvseyu3

    第5楼2011/06/22

    电流是挺高的,可以自己设定一下吗?还是说我的其它条件有什么问题导致电流这么高?我是做毛细管内涂层的,有一次涂的效果较好,那次同样的电压下电流就小很多,涂层是不是也会让电流小一些啊?

    userwzy(userwzy) 发表:你用的什么体系,是不是电流太高导致电压上不去,或者空气太潮湿?

    电渗流倒峰之后,极限抬高多少,其实如果依旧平稳,不影响分离,可以不用管它。

    峰宽,应该是分离体系不合适,优化一下吧,这也会导致重现性变差。

0
    +关注 私聊
  • heguang

    第6楼2011/06/22

    应该是你电流超过最高限造成的,电流到达最高限以后,电压就不会上升了。你要把buffer配的浓度低一点。
    涂层好的话,EOF也会小一点,电流也会相应低一点,但是不会说低很多。

0
    +关注 私聊
  • lvseyu3

    第7楼2011/06/23

    电流高,是要把buffer配的浓度低一点哦?可是我的buffer电导比较低,我想把浓度配高一点会电导高点,然后相当于有个富集,不知道这么想对不对啊?

    heguang(heguang) 发表:应该是你电流超过最高限造成的,电流到达最高限以后,电压就不会上升了。你要把buffer配的浓度低一点。
    涂层好的话,EOF也会小一点,电流也会相应低一点,但是不会说低很多。

0
    +关注 私聊
  • ericwong

    第8楼2011/06/24

    不同因素可能会对实验结果产生不同的影响。最终选取的实验条件是综合各个因素的影响而选择的折中的条件

0
    +关注 私聊
  • heguang

    第9楼2011/06/24

    浓度高一些,通常分离效果也会好一些,但是电流过大,焦耳热效应太明显就会影响分离和稳定性了。当然,buffer浓度很高的话,在样品和buffer接界的地方会有一定的浓缩效应。
    如果你的实验只有在这么高的离子浓度下才能做的话,就使用50um或者更细的毛细管,来降低焦耳热。

    lvseyu3(lvseyu3) 发表:电流高,是要把buffer配的浓度低一点哦?可是我的buffer电导比较低,我想把浓度配高一点会电导高点,然后相当于有个富集,不知道这么想对不对啊?

0
    +关注 私聊
  • lvseyu3

    第10楼2011/06/24

    恩,先做个可行,条件最后优化一下。

    ericwong(ericwong) 发表:不同因素可能会对实验结果产生不同的影响。最终选取的实验条件是综合各个因素的影响而选择的折中的条件

0
查看更多
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...