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目视法细胞计数的改进方案

省部重点实验室

2011/07/27

生命科学仪器综合讨论

谈到血常规检查，大家马上会想到WBC、RBC计数，虽然现在各种全自动和半自动的三分类、五分类血球分析仪已经普及，但在广大基层单位，条件尚不许可，仍然是一台显微镜加一块计数板，“目视计数法”还有顽强的生命力，及很强的实用价值，即使在仪器铺天盖地，大口吞噬“人工检验市场”的今天，我们依旧需要手工法进行样本复检、机器校正等工作。
目视计数法在我们的印象中无非是数数方格，传统的计数法是按操作规程之规定，先找到相应的方格，但老方法中几十年来都一成不变的计数区域用到实际工作中并不让人感觉舒适和便利，当出现细胞数过多，堆得密密麻麻时，更容易视觉疲劳和出错；且动辄采血20μl，有些病人不易采足量（在同时进行多项检验时，更易出现采不到量而必须多次穿刺，增加了病人的痛苦）。因此，改进一下计数区域和采血量，寻找一种人性化的方法就很有其必要性了。对于这个问题，我研究了一套解决方案，并在工作中使用了近十年，一直感觉良好。下面，我就把该方案贴出来，和大家做一交流。

一、RBC、PLT计数改进法：
1. RBC：取血10μl加入红细胞稀释液3.0ml内混匀充池（即稀释300倍）
2. PTL：取血10μl加入血小板计数液0.29ml内混匀充池（即稀释30倍）
下面是计数池中间的那部分结构图，以红笔勾出的阴影部分为本法计数区域（两个细长长条区域）

【计算】RBC数 / L = 计数区红细胞总数 / 100 ×10^12 / L
PLT数 / L = 计数区血小板总数 ×10^9 / L

二、WBC计数改进法：
方法1：此法又可称为“盘龙法”，它覆盖面广，可较好的中和细胞不易分布均匀的固有误差，适用于精确计数。
【操作】（同原法）取血20μl加入白细胞计数液0.38ml内混匀充池（稀释20倍）
计数区域见下图所标示（蓝色箭头示意为计数起止方向）

【计算】（亦同原法） WBC数 / L= 计数区白细胞总数 / 20 ×10^9 / L

方法2：此法较上法简便而易于操作，采血量少，更不易疲劳和利于连续计数多量标本，且可灵活应对白细胞过低和过高的特殊情况，但准确性和精密度比上法稍差，适用于日常工作。
【操作】取血10μl加入白细胞计数液0.29ml内混匀充池（即稀释30倍）
（1）当白细胞数在合理区间时的计数区域（即用红线勾出的四个长条形区域）：

【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 / 10 ×10^9 / L

（2）当白细胞数低于4.0 ×10^9 / L时，不必加量采血重做，计数区域：

【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 / 20 ×10^9 / L

（3）当白细胞数高于80 ×10^9 / L时，亦不必进行二次稀释，计数区域与新法计数RBC或PLT的计数区域相同，请见上面的第一幅贴图
【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 ×10^9 / L

我的这套方法好用与否，大家一试便知。最终的计算公式是怎么推导来的，这里我就不做详细论述，大家可以自己试着推导一下，如果对我的文章有疑异的，可以随时和我联系，欢迎大家批评和指正。我的QQ：59889501

作者：景德镇第二医院检验科黄知进

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dong3626

第1楼2011/07/27

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