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关于毛细管激光诱导荧光的问题

  • guodongshan
    2011/08/02
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 大家好,我最近在做毛细管激光诱导荧光的实验,做了许久了,发现基线始终是上下波动的比较厉害,就只看到了溶剂峰,看不到样品峰,请教各位同学一下,怎样使基线变得平稳一些,不胜感谢!
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  • userwzy

    第1楼2011/08/03

    首先确定样品有没有荧光,在此体系中能不能出峰,或者迁移时间够不够。

    基线不稳,是不是跟现在室温,湿度有关系。

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  • guodongshan

    第2楼2011/08/03

    你好,请问你做激光诱导荧光的时候,基线怎么样,稳定吗??能否发一张图来看一下,不胜感谢!!

    userwzy(userwzy) 发表:首先确定样品有没有荧光,在此体系中能不能出峰,或者迁移时间够不够。

    基线不稳,是不是跟现在室温,湿度有关系。

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  • viernes

    第3楼2011/08/26

    LIF应该要比UV基线平很多才是,你这样问别人没有办法帮你解决问题的

    你要写清楚 你的 样品 BGE
    分离电压 进样条件
    激光波长

    最好能附一张谱图

    guodongshan(guodongshan) 发表:大家好,我最近在做毛细管激光诱导荧光的实验,做了许久了,发现基线始终是上下波动的比较厉害,就只看到了溶剂峰,看不到样品峰,请教各位同学一下,怎样使基线变得平稳一些,不胜感谢!

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  • 20040902

    第4楼2011/09/17

    溶剂要确保处理好,我的都是用0.22微米的滤膜过滤的;
    避光是否好(若是在现成的电泳仪上做应该不用考虑),外界光的干扰很大;
    你的基线走的时间有多长,时间长一些看会不会好一些;
    奇怪的是,你的样品峰竟然没有,你还是现检查一下你的样品有没有问题吧。

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  • elvisnoxug

    第5楼2011/10/29

    为什么说LIF的基线比UV的平?
    我的印象中LIF觉得没有UV稳定,UV是最稳定的检测器了吧。
    谢谢

    viernes(viernes) 发表:LIF应该要比UV基线平很多才是,你这样问别人没有办法帮你解决问题的

    你要写清楚 你的 样品 BGE
    分离电压 进样条件
    激光波长

    最好能附一张谱图

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  • nini2006

    第6楼2011/11/05

    基线是否稳定不在检测器,在于毛细管双电层的状态还有buffer或者样品本身。UV看起来基线稳定,是因为波长自动选择的关系(PDA检测器)。影响基线不稳的原因很多:①毛细管内径选择(内径大→电流大→焦耳热大→基线不稳),②电压太高(→电流过大→焦耳热大→基线不稳),③运行前毛细管的冲洗不够(你可以适当延长氢氧化钠的冲洗时间试试),④你的buffer不稳定(modifier不稳定,比如一些有机物,容易被电解啥的),⑤buffer或样品有气泡(跑CE前先超声一下吧),⑥样品不稳定(运行过程中被电解,那就没办法咯),……

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  • nk_soil

    第7楼2011/11/09

    CE-LIF的基线一般情况下是比较稳定的,你在做毛细管处理的时候,NaOH冲洗完成后,用水冲干净。
    另外,CE_LIF的缓冲液要干净,你用的什么缓冲液,Tris-Gly是个比较好的缓冲液。
    我在做CE_LIF的时候,基线一直非常稳定。

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