[交流讨论] 氨基柱使用及维护常识

1.氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的，这一点很多用户都已经知道；但是要注意到的是：正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的，对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。


　　2.对于新购买到的柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类，建议在用分析流动相之前，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。

　　3.氨基柱的使用：
　　需要注意的是，氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解，所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备，特别是当你的使用条件是反相条件下时。反相条件下使用时，要特别注意控制PH值范围，PH值越低越有发生水解的危险，流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以，在使用后以及准备长时间放置该柱时，必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。

另外，氨基键合相在性质上与硅胶有很大的差异，主要是由于Si-OH基显酸性，而－NH2基显碱性的原因。在用水／乙腈为流动相是，可分离极性化合物，在酸性介质中氨基键合相表现为一弱阴离子交换剂。由于氨基具有形成氢键的能力，在水／乙腈作流动相是可分离单糖，双糖和多糖，这时所用的流动相好像是反相的，但由于流动相中水含量的增加使保留减少，所以是按正相方式分离的。有一种情况是，当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时（分析其中的糖份），酸性物质的存在意味着质子的存在，可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。这时，可以用5倍的柱体积的含0.5％NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱（冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨）。

需要特别注意的是，键合相中端基氨基易于氧化，易
于与羰基化合物反应，因此在使用氨基键合相时，在流动相中和在样品中应不含羰基化合物。