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跪求大家帮帮忙啊~~！！大家做CE有没有遇到过这种情况？

ZZmOsquitO

2012/04/07

毛细管电泳（CE）

我最近遇到一个很奇怪的现象，百思不得其解。

我在用CE做蛋白和核酸相互作用，蛋白和核酸分别标记用双波长LIF检测器测的所以能分别测到

我之前的条件下一直都是只能看到蛋白的峰以及蛋白-核酸结合的峰，而看不到核酸游离的峰

但是最近核酸的峰就能出来了

我什么条件都没变

奇怪的有三点

一是正常来讲 A条件下我们的蛋白和核酸是几乎不结合的所有实验也支持这点但是只要出现这个“游离的核酸峰”，他们在这个峰的地方就会出现结合

二是只要核酸的峰能出来，我的峰谱就变得非常整齐（因为我用的蛋白对毛细管粘附性挺强的，所以一般跑的时候都会出很多很多小杂峰）。这点不是绝对的。

三是这种情况不是一直能重复出来的有时候就突然出现了而且会持续比较长一段时间换缓冲液之后还是有但是我之前把毛细管和所有缓冲液都换过一次之后又没有游离核酸的峰了。我昨天跑的时候突然就又出来了。。。

我真不知道这到底是怎么回事谁来帮我分析一下呢谢谢大家~

下面是其中一个例子

黑色是核酸峰，蓝色是蛋白峰。
常见的情况：

我现在遇到的情况：

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ericwong

第1楼2012/04/09

楼主用的是什么毛细管？

0

nini2006

第2楼2012/04/10

对于第一点我不是很明白：是不是说，A条件下本该不结合的现在出现了能结合的图谱性质（当游离核酸突然能被检测到的时候）？
如果是这个意思，你是否可以这样考虑：以前的实验说法有误，A条件下应该蛋白质跟核酸是可以结合的，而且是有两种结合形态存在，所以才会出现两个峰。

对于第三种情况，应该是因为吸附问题造成的。吸附一直是一个困扰人的问题。

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