盐酸吗啡是否可以不用衍生化，用OV-17柱子直接进样检测？

吗啡用GC分析要衍生化，如下面的方法：



尿样—麻醉剂镇痛剂吗啡的定量分析—气相色谱质谱联用法

1    范围

本方法采用气相色谱分离/质谱法(GC/MSD)测定尿样中吗啡及代谢物的含量。

本方法适用于尿中吗啡及代谢物的定量检测及确证。

检测范围：采用SCAN方式，检出限为50纳克/微升，采用SIM方式，定量范围为1微克/毫升。

2  原理

经过液－液提取、衍生化、气相/质谱联用仪，以双氢可待因为内标.

3  试剂和材料

3.1半胱氨酸  (C3H7NO2S)

3.2固体缓冲剂（PH约9.6，分析纯无水碳酸氢钠和碳酸钾按重量比9:1混合）

3.3浓盐酸12mol/L

3.4氢氧化钠12mol/L

3.5乙醚(重蒸)      

3.6异丙醇(重蒸)      

3.7甲醇(重蒸)        

3.8乙酸乙酯  

3.9 MSTFA (C6H12F3NOSi)

    3.10 MBTFA  (C5H3F6NO2)

3.11吗啡的甲醇溶液, 1mg/mL

    3.12双氢可待因的甲醇溶液（6mg/mL，称量120mg双氢可待因标品，溶于20 mL分析纯的甲醇中）

    3.13带盖的普通试管

    3.14衍生化小瓶

    3.15铝盖(11mm)

    3.16毛细管柱25m´0.2mm´0.33mm（固定相：柔性石英）

3.17离心机                   

3.18液体快速混合器           

3.19循环水式多用真空泵       

3.20三和松石混匀器

3.21电热鼓风干燥箱          

4  分析仪器

4.1气相色谱/质谱联用仪

质量选择检测器，扫描范围：50－650。分析柱为HP-5 固定相为交联甲

   基聚苯硅醚，长25m、内径0.2mm，膜厚0.33mm。

4.2载气:高纯氦气,流速为0.9mL/min(温度为180°C时)，分流进样，分流比为1:10

4.3仪器条件:进样口温度250°C，接口温度290°C，离子源温度200°C，电子能量

   70eV，升温程序:180°C，以10°C/min升至220°C，又以5°C/min升至260°C，

   再以10°C/min升至280°C，保留10分钟。

5  试样制备

阳性尿：由成年志愿者口服，或肌肉注射吗啡药物，收集服药后48小时的尿

样。

6  操作步骤

6.1空白试验

6.1.1试剂空白:取5mL水按游离部分操作。

6.1.2尿空白:取5mL尿样按结合部分操作。

6.2.提取

6.2.1结合部分

加入100mg半胱氨酸(3.1)，再加入0.5mL浓盐酸(3.4)，振荡，加热30分钟，冷至室温。加3mL乙醚(3.6)振荡10分钟，离心5分钟。弃去有机相，向水相中加入0.6mL氢氧化钠溶液(3.5)，混匀。加入2g固体缓冲剂，混匀。再加入3mL乙醚(3.6):异丙醇(3.7)＝9:1的提取液，振荡10分钟，离心5分钟。冷冻分层后弃去水相，将有机相转移至10mL离心管中。

6.2.2游离部分

加入2g固体缓冲剂，混匀。加入3mL含有3mg双氢可待因（3.13）的乙醚(3.6):异丙醇(3.7)＝9:1的提取液，振荡10分钟，离心5分钟。冷冻分层后弃去水相，将有机相与结合部分的有机相合并。将有机相在50°C，氮气流下吹干。

6.3衍生化

在残渣中加入MSTFA（3.10）100mL，振荡，在70°C下反应10分钟。加入MBTFA（3.11）30mL，振荡，在70°C下反应10分钟。转移至衍生化小瓶中，进2mL于GC/MSD。

7  结果计算

7.1以吗啡的标品及志愿者的阳性尿的数据为标准，用选择性离子414、236和

    429.

7.2内标法进行吗啡定量测定。

8  检测限

吗啡：1.0--50mg/mL。

9  参考文献

   兴奋剂检测的有关规定及相关方法