高效毛细管电泳基本原理 | ||||||||
高效毛细管电泳基本装置如下图 | ||||||||
在电解质溶液中,位于电场中的带电离子在电场力的作用下,以不同的速度向其所带电荷相反的电 | ||||||||
极方向迁移的现象,称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同,迁移速率不同可实现分离 | ||||||||
。高效毛细管电泳是在经典电泳分离法于20世纪、九十年代快速发展起来的新技术。 | ||||||||
经典电泳分离法的不足:所用分离柱的柱较短,柱径大,分离效率不高(远低于HPLC),温度影响 | ||||||||
大。在九十年代出现的高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进: | ||||||||
一是采用了0.05mm内径的毛细管; | ||||||||
二是采用了高达数千伏的电压。 | ||||||||
讨论: | ||||||||
(1)毛细管的采用使产生的热量能够较快散发,大大减小了温度效应,使电场电压可以很高。 | ||||||||
(2)电压升高,电场推动力大,又可进一步使柱径变小,柱长增加, | ||||||||
(3)高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱,理论塔板数高达几十万块/米,特殊柱子可以达 | ||||||||
到数百万。 | ||||||||
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正离子:两种效应的运动方向一致,在负极最先流出; | ||||||||
中性粒子:无电泳现象,受电渗流影响,在阳离子后流出; | ||||||||
阴离子:两种效应的运动方向相反,ν电渗流 >ν电泳时,阴离子在负极最后流出,在这种情况下,不 | ||||||||
但可以按类分离,除中性粒子外,同种类离子由于受到的电场力大小不一样也同时被相互分离。 |