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胶束毛细管电泳需要优化的条件是什么

  • 省部重点实验室
    2012/05/14
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 以毛细管为分离通道,在KNO3缓冲溶液中,用表面镀汞膜的金微电极作为工作电极,采用单脉冲伏安法同时测定铜、锌、铅、镉含量,考察并优化了影响分离和检测的相关因素:缓冲溶液pH、分离高压、脉冲上限和下限、脉冲宽度等。该法的最佳实验条件:5mmol/LKNO3(pH6.0),分离高压20kV,脉冲上限-0.2V,脉冲下限-1.15V(vs.SCE),脉冲宽度500ms。结果表明,各峰面积与其离子浓度成线性
    系,线性范围(μg/mL)分别为:铜5.0×10-2~10.0;锌1.0×10-2~10.0;铅5.0×10-2~5.0;镉2.0×10-2~10.0。加标回收率在95%~110%之间。用该法较好地测定了水样中的重金属铜锌铅镉。
    文章标题:浅谈毛细管电泳-电化学检测法及其在药物分析中的应用
    摘要:本文介绍了毛细管电泳以及电化学检测法。叙述了各种分离模式和检测方法,并评述了近六年来,毛细管电泳电化学检测法在药物分析中的应用进展。

    关键词:毛细管电泳;电化学检测法;药物分析;综述

    毛细管电泳具有分离效率高、快速和所需样品量
    少等特点。应用范围包括无机离子、有机分子及生物大分子和对映体等,在分析化学、生物化学、分子生物学、药物化学、食品化学、环境化学和医学许多领域,有着广阔的应用前景。毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管电分离法(CESM),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离分析技术,具有分离效率高(理论塔板数已达106-107/m)、快速(一般20min内即可完成一次电泳操作,甚至几分钟即可完成几十个阳离子或阴离子的分离)、样品用量少(仅需纳升级)等特点。在近十几年中,CE受到分离分析科学家的极大关注,成为生物化学和分析化学中最受人瞩目、发展最快的一种分离分析新技术。

    1分离模式

    毛细管电泳按分离模式的不同主要可分为CZE,MEKC、CGE、CIEP、CITP、ACE(亲和毛细管电泳)、CAE(毛细管阵列电泳)等。

    2检测技术

    CE的检测技术以其高效、微量、快速等特点引起了广泛的重视,因为毛细管内径极小(通常为25-100微米)和纳升级的进样量,对检测器的灵敏度要求很高。检测是CE中的关键问题。目前己有多种检测器成功地用于CE中。

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  • 省部重点实验室

    第1楼2012/05/14

    灵敏度高,选择性好,微量

    仪器复杂,可获得结构信息

    灵敏度高,特殊操作

    CE中应用最广泛的是紫外/可见检测器,其灵敏度低,但通用性好,十分适合小分子的分析。缺点是受毛细管狭窄内径的限制,有效光程短,其灵敏度相对较低(一般为10-5—10-6mol/L)。激光诱导检测器灵敏度可比紫外可见检测器高1000倍,但是造价昂贵,且大多数样品需要衍生。联用技术是解决毛细管电泳定性问题的最佳方法。

    与CE联用的检测器必须有较小的体积和较高的灵敏度。己经有许多检测器被成功地运用于CE技术中,商品化仪器中常用的检测器主要是紫外可见检测器,但是毛细管的短光程严重限制了它的灵敏度[1]。激光诱导荧光检测器虽然灵敏度高,选择性好,缺点在于仅适合于具有荧光或易于进行荧光衍生的物质[2][3]。CE-MS联用法灵敏度高,专属性强,能提供分子结构信息,是CE非常理想的一种检测器,但是价格昂贵[4]。电化学检测器与CE联用不仅可满足分析微量样品时灵敏度的要求,而且有良好的选择性,仪器造价低廉,易于普及。电化学检测对于大多数易于氧化还原物质的浓度检测限可达10-9mol/L(质量检测限可达10-12mol--10-18mol)。

    3CE电化学检测的基本模式

    CE电化学检测有三种基本模式:安培法、电导法和电位法[5]。安培法测量化合物在电极表面受到氧化或还原时,失去或得到电子,产生与分析物浓度成正比的电极电流。电导法和电位法是测量两电极间由于离子化合物的迁移引起的电导率或电位变化。安培法是CE-ED中应用最广泛的一种检测技术。

    4毛细管电泳电化学检测法在药物分析中的应用

    近年来毛细管电泳在药物分析中的应用得到了迅速的发展。在中药材、中成药制剂、西药复方制剂及生物技术产品等药物和制剂的分离、鉴定和分析中,显示了高效果、快速的特点,正越来越受人们的重视。

    毛细管区带电泳:毛细管和电极槽灌油相同的缓冲液
    胶束电动毛细管色谱:在毛细管区带电泳缓冲液中加入一种或多种胶束。

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