再话ODS-3 C18色谱柱是否可以用二氯甲烷冲洗？

好像测三聚氰胺的方法也用乙酸铅沉淀蛋白质啊？柱子寿命还可以。

柱压高可能是筛板堵了。

筛板堵的可能性不是很大，如果安捷伦的仪器，有过滤白头，岛津仪器里面也有过滤片的，都是0.45UM的，不太可能堵了筛板。
个人觉的冲了甲醇以后，直接换到二氯甲烷问题多多，甲醇和二氯甲烷虽然是互溶的，但溶解性比较差，正确的应该是甲醇冲了以后--异丙醇过渡--二氯甲烷冲洗--异丙醇过渡---甲醇冲洗
Waters专家应该不会连这样的常识都不知道，个人倾向客户可能忘记了异丙醇过渡的步骤了

下面是岛津技术人员给出的建议

不知道样品中的蛋白质有多少，如果很多的话，二氯甲烷和蛋白质会发生质变，估计这根柱子已经用不成了。

1， 如果是很微量的蛋白质的话， 以下这个步骤结束后就可以了。因为很微量蛋白质不会造成很大的影响。

[ 95%水/5%甲醇（1ml/min，冲洗1小时）冲洗完后，再用100%甲醇（1小时）冲洗，保存。]

2，如果想清除柱子中的蛋白质的话，一般可以使用两种方法；

1） 使用碱性溶剂来溶解蛋白质。 比如；0.5% 的NH3.

但是，使用碱性溶剂的话，pH会增高，柱子是ODS的话，硅胶也会随之融化，导致柱子受损。

所以一般我们不建议。

2） 使用高浓度的缓冲溶剂。 比如； 1mol的盐类 之后使用100%水 =〉 50% 有机溶剂 -〉100% 有机溶剂 保存。

常理上来讲，如果目的样品不是蛋白质的话，在进LC之前，前处理的时候会除去蛋白质。


3，使用二氯甲烷来冲洗柱子，也是有的事情，但是一般不是很多。

柱子里面进入非亲水性强，非极性化合物的时候，使用二氯甲烷来清洗。

但是由于二氯甲烷具有挥发性，所以清洗之后需要使用中性溶剂来置换，比如；100% 的IPA (异丙醇） -〉 100% 甲醇 保存。

看了一下，岛津技术人员的建议是合理的