凝胶柱出现问题，请教各位老师、前辈

应助达人

样品是乙腈溶解的,而流动相是环己烷和丙酮混合液,可能有物质在柱子中析出了,能否考虑用乙腈作流动相呢?合作使用后用乙腈冲洗柱子,看柱压能否下来.

但是此类柱子要求的流动相是环己烷和丙酮，其实我也想过用乙腈代替丙酮，但是又担心这样做对柱子的伤害更大。

应助达人

流动相只能是环己烷和丙酮，不能用乙腈代替丙酮，因为柱子填装的时候和饱和都是环己烷和丙酮。

不知道楼主是测定血里的什么物质，能不能氮吹或旋蒸掉乙腈，用流动相溶解呢？

能不能氮吹或旋蒸掉乙腈，用流动相溶解当然可以，但是这样做就失去了大体积进样的优势。

我们是直接用乙腈沉淀血中蛋白，加无水硫酸镁和PSA后直接进样20ul分析。

柱子堵了有没有补救的办法？

不知道将乙腈换成丙酮效果会怎样？

应用方面我不太清楚，不过从柱子的型号EV来看，是可以：

“色谱柱逆接，使用通常流量50%以下的流动相冲洗，或者使用注射器注入THF，重复数次，可能可去除堵塞物质。但是和键合相结合了的吸附物不能取出。”

详情见：
http://www.shodex.com/china/da0105.html

谢谢了。我现在最想知道的还有一个问题，柱子堵的原因？

CLNpak EV-200 规格是2.0 x 150mm，最大进样量0.2ml，常用流速0.05ml/min，确定没有过载，超压吗？