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中国显微图像网网络课堂第四期问题及解答

sishui001

2012/09/10

扫描电镜（SEM/EDS）

　　中国显微图像网网络课堂第四期问题及解答
　　Q1、香柏油可以用在显微镜上吗？
　　A1香柏油在显微镜上的使用逐步被代替，香柏油的缺点之一就是其折射率较小，与光学玻璃的折射率是不同的，而且还有一些颜色，会造成物镜不能显示其更好的分辨率，一般使用厂家推荐的专用浸油，尤其是在荧光检查时必须使用荧光显微镜专用的无荧光浸油。
　　显微镜镜油的技术参数，可以参照文章：什么是理想的镜油
　　Q2、聚光镜发霉了怎么办？
　　A2如果是聚光镜里面的镜组发霉了，需要拆开擦拭，这个最好找厂商工程师，因为如果自己拆了可能会装不回去，还不如再买一个。
　　Q3、1）物镜镜头有没有正置镜头和倒置镜头之分？
　　A3有，正置显微镜和倒置显微镜的物镜不同
　　正置显微镜的物镜在设计光路时将0.17mm的载玻片考虑在内；而倒置显微镜的物镜在设计光路时将1mm的培养皿底考虑在内。
　　2）是否可以把正置显微镜镜头直接拿下来放到倒置显微镜上用？
　　可以把正置显微镜的物镜放在倒置显微镜上看玻片，用来看培养皿就会有问题。
　　Q4、在用荧光显微镜的过程中，用的CELLSENS STARDARD软件看到的视野背景是蓝色的
　　A4估计是拍照时出现的问题，请调下曝光时间或增益，有可能是曝光时间不足，信号不足造成的；至于CELLSENS其他的问题，可以咨询下奥林巴斯的工程师。
　　Q5、刚才讲的荧光的新型光源是什么光源来着、能打字出来吗？
　　A5 X-cite光源，长寿命金属卤素灯，2000h寿命，并且以光纤连接会减少光路中产生的热量对样品的影响，减少光毒性。
　　Q6、以后有没有摄像头方面的介绍啊
　　A6第二周、第三周讲座均有对CCD的介绍，每周三下午14:30，请及时关注
　　Q7、niyanbaby1,说 : 想更多了解荧光显微镜
　　A7荧光显微镜的原理、应用确实比较多，可以细细谈下想了解哪方面的内容，我们可以有针对的来讲。
　　Q8、请问连续变倍的光学主机前可以接显微物镜吗？
　　A8连续变倍的显微镜接普通显微镜的物镜吗？不行，连续变倍显微镜的物镜直径比较大，不能和倒置、正置显微镜互换。
　　Q9、反射荧光和透射荧光的区别，透射荧光对载玻片的要求？
　　A9（摘自网络）透射荧光显微镜
　　光源：高压汞灯或卤素灯。
　　聚光镜：使用暗场聚光镜，使激发光和荧光分离出来。
　　标本：因为是透射观察，薄的标本比较适合。
　　优点：①由于用了暗场聚光镜，激发光不能进入物镜，因此容易形成暗的背景，得到良好的反差，且任何物镜都可用于观察。②用低倍物镜时，比反射荧光显微镜更亮。
　　缺点：必须正确调整聚光镜中心和高度，否则不能获得明亮的荧光像。由于暗视场聚光镜焦距限制，不能使用厚的载玻片。视场照明区不能过大，否则容易使荧光标本荧光色衰褪。厚的或不透明的标本不适用。
　　反射荧光显微镜
　　光源：高压汞灯或卤素灯。
　　聚光镜：因为物镜作为聚光镜，所以不需要聚光镜。
　　物镜：所用物镜必须能透过足够的紫外光，而且本身不产生荧光，对数值孔径没有限制。
　　标本：厚的标本或不透明的标本都能观察。
　　补充一句：目前透射荧光显微镜已基本退出市场。
　　优点：①由于物镜兼作聚光镜，不需要很多调节。②采用柯拉照明法，可利用孔径光阑和视场光阑的效果。③物镜数值孔径不受限制，在高放大倍率时，也可以获得高分辨率的像。④厚的或不透明的标本也能观察，厚的盖玻片也能使用。⑤其它观察法也能与反射荧光结合使用，特别和相差法和透射微分干涉差法相结合。⑥可以避免不必要的荧光色衰褪现象。
　　缺点：在用地倍率物镜时，像比较暗，因此必须用大数值孔径的物镜。滤光镜系统必须有效地分离开激发光和荧光。
　　Q10、视场光阑和孔径光阑的区别和异同？
　　A10二者的相同点是都可以通过调节，改变照射到样品上的光照强度。其实二者有很大的区别，因为都是光阑，可能容易混淆。
　　二者的位置、作用都各不相同。视场光阑在光源附近，通光口处；作用是控制光照范围。孔径光阑在聚光镜上，虽然调节孔径光阑会发现能够改变光照强度，但这并不是它的主要功能，所以不要通过这种方法调节光强。孔径光阑的作用是通过改变大小，改变聚光镜的NA值。
　　Q11、聚光镜的分辨率是受孔径光阑影响吗？
　　A11对，通过调节孔径光阑的大小调节聚光镜的NA值，改变分辨率。所以使用的时候，孔径光阑的具体值是根据物镜改变的。观察物镜上标示的NA值，孔径光阑的NA值调到物镜NAX0.6-0.8比较适合，两个NA值匹配才能够提供最好的分辨率。
　　Q12、相机感光芯片脏了怎么处理
　　A12先确定是否是相机的感光芯片脏了，再做处理
　　转换不同倍数的物镜，看是否是物镜脏了；
　　如果脏的东西视野里和照片中是同一处，说明相机是干净的，一定是显微镜上有脏东西；
　　如果是相机芯片外部的膜脏了，自己可以用酒精擦，参照擦拭其他光学镜片的方式；
　　如果真的是芯片脏了，不建议自己擦，要找专业的工程师在一个超净的工作空间处理，否则会引入其他灰尘。中国显微镜交易网

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小M

第1楼2012/09/24

应助达人

这个是光学显微镜的吧，不是电镜诶，发这里不合适

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