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tangtang
第1楼2012/10/11
没用过这样的色谱柱,先查阅相关文献吧。
vcningmeng
第2楼2012/10/12
个人觉的应该没有多大区别吧,SEC的分离模式是不是以分子排阻为主要模式?
histone1
第3楼2012/10/12
对,理论上来说没有影响。可是实际呢?再比如一个PI=7的蛋白,在pH4.0和pH9.0的buffer中,保留体积是一样的吗?
第4楼2012/10/12
说实在的,对蛋白这块不熟悉,个人觉的即使buffer有变化,但对于蛋白空间大小的影响会不会很大???如果不是很大的话,我觉的对分离没有太大影响,毕竟对于体积排阻来说,是不是分子量需要相差一倍以上,才会有比较好的分离?
第5楼2012/10/12
对,对于结构影响应该不大。可是对于带电性能有很大影响,蛋白柱的填料基质对于不同电荷的蛋白会有吸附吗?或者这么说吧,大部分蛋白是酸性蛋白,等电点小于7,pH7.0的缓冲液中带负电,色谱柱说明书里的标准蛋白也是这类蛋白。可是对于那些等电点大于7的碱性蛋白来说,pH7.0下带正电荷,蛋白柱对于碱性蛋白的分离效果如何?虽然有些蛋白柱的应用案例也有碱性蛋白,但是实际上,我用同样的条件做下来,结果的并不好。
mingmingtong
第6楼2012/10/14
可以去查阅文献啊
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