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他山之石——酶标仪灵敏度指标中吸光度值一般多少?

仪器检定/校准/计量

  • 他山之石——张博士说:
    根据规程JJG 861-2007酶标分析仪检定规程,灵敏度≥0.01,所用浓度为5mg/L,则测得的吸光度不得小于0.05。我偷懒,没有做过这个指标,也没配过这个溶液。

    只能参照【杨青成,酶标仪校准方法探讨,临床血液学杂志,2011,24(4)】中,溶液厚度为5mm、浓度为0.0313%的重铬酸钾吸光度值是0.222,则假设厚度相同,换算成5mg/L重铬酸钾浓度时吸光度为0.0035,算出灵敏度0.0007,与规程差的太远。即使假设规程中样品溶液厚度达到1cm,吸光度也才增加1倍。

    问题出在哪呢?不知道有哪位测过?麻烦告诉我个大概值,谢谢!
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  • 刘彦刚

    第1楼2013/03/28

    应助达人

    张博:
    你好!
    我也质疑过该指标,我觉得对于给定浓度的特定物质,应该有对应的吸光度,而不是这样大于0.01L/mg。因为我儿子在南京工作,所以我还去请教过理化技术委员会副主任,江苏省院化学所所长蔡冶强。当时他是这样说的,一般化学计量不太用准确度,言下之意:化学量受干拢过多,做到准确很难。他说:对于该检测,从理论上讲,当然是有一正确的吸光值对应。但种种原因,我们的测量只能是尽可能接近该值,而很难达到该值。也就是说:按理该吸光度还应较大于0.05。所以我建议你尽可能做一下该检测,很可能规程给出的该指标是错误的。好象老的规程没该指标。

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  • 刘彦刚

    第2楼2013/03/28

    应助达人

    他山之石——张博士说:
    从理论和时间表明,规程给出的指标≥0.01/(mg/L)的指标是错的,应该更改为≥0.01Abs
    根据【马萱,分光光度计波长误差及灵敏度校核初探,武汉工业大学学报,1992,14】中Cr的eb=0.0055左右(b估计是1cm)
    规程中假设液层厚0.5cm,浓度为5mg/L,则A=ebc=0.0055*5/2=0.014
    当然,实际液层厚度可能大于0.5cm,但一般不会高于1cm,所以理论吸光度值在0.014-0.028之间
    实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右

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  • 刘彦刚

    第3楼2013/03/28

    应助达人

    张博:
    1、你复述的灵敏度要求是≥0.01mg/L,还是≥0.01L/mg?规程给出的可是≥0.01L/mg。
    2、你说的实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右,是0.015和0.012左右L/mg;还是0.015和0.012左右Abs?

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  • oywtpugoudj

    第4楼2013/03/28

    感谢版主的精心整理

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  • 刘彦刚

    第5楼2013/03/28

    应助达人

    昨天我向理化计量技术委员会副主任委员请教了该问题,老师的指导给了我启示,使我有了新的思路。后经整理我觉得有点思路:这下让我真正理解了为什么在给定波长,测量给定的重铬酸标液,测得的结果不能用准确度来量度,而只能用灵敏度量度。因为注在酶标板上的被测溶液的液层厚度,不向比色皿那样固定,所以即使仪器是很准确的,也无法测得确定的值。
    而且更可喜的是,因为受到副主任委员的启发。对于张博士提出的问题也得到了解决:因为在酶标板上的被测溶液,也不向比色皿装着那样是固定立方体,从某种意义上讲,它相当于或是凸镜、或许是凹镜的透镜。这样一定会偏离朗伯—比尔定律,或许就使吸光度大了。版友们说有点道理吗?

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  • 刘彦刚

    第6楼2013/03/28

    应助达人

    如果实测值是 实测值是0.015L/mg和0.012L/mg,就说明我们的想法是对的;规程给出的指标和规程宣贯时,给出的检定方法也是对的。

    刘彦刚(pxsjlslyg) 发表:他山之石——张博士说:
    从理论和时间表明,规程给出的指标≥0.01/(mg/L)的指标是错的,应该更改为≥0.01Abs
    根据【马萱,分光光度计波长误差及灵敏度校核初探,武汉工业大学学报,1992,14】中Cr的eb=0.0055左右(b估计是1cm)
    规程中假设液层厚0.5cm,浓度为5mg/L,则A=ebc=0.0055*5/2=0.014
    当然,实际液层厚度可能大于0.5cm,但一般不会高于1cm,所以理论吸光度值在0.014-0.028之间
    实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右

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  • windy

    第7楼2019/09/24

    刘老师,你好,这个灵敏度规程中要求≥0.01,单位是L/mg,而规程中测量法,测量出来的数据是吸光度。这就把握搞蒙了,一个计量性能要求那里给的单位是L/mg与吸光度完全沾不上边哦,不知道咋理解这个项目

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