在安捷伦工作站上面进行同位素（及多离子加和）内标曲线法定量过程简单介绍

应助达人

2 标准曲线的建立

和普通内标法曲线法的建立过程一样，先进样标准目标物和其同位素化合物，得到它们的保留时间，定量及特征离子等信息。也可以参考相关标准资料了解目标化合物和其同位素内标的定量或特征离子的相关信息。

下面是20ppm DMS水溶液（可能有点小，大点或许更好测）顶空测定的TIC和质谱图：



从上面看到 H3C-S-CH3(DMS)基峰是62 （分子峰），其它较大的离子有47, 45等。

（二甲基硫醚的α-裂解失去H，m/z61; 重要碎片是CH2=SH，m/z 47；CH2=S, m/z 46; CH≡S，m/z45）

下面是20ppm d6-DMS水溶液的TIC和质谱图：



从上面看到d-DMS(D3C-S-CD3)基峰是68（比DMS多6个amu），其它较大的离子有50, 46等。

六氘代二甲基硫醚的α-裂解失去D（D是2amu， H是1amu），m/z66; 重要碎片是CD2=SD，m/z 50；CD2=S, m/z 48; CD≡S，m/z46

本示例SIM中DMS选用62和47离子；d-DMS选用68和50离子进行扫描检测。大家可以根据自己的需要选择更多的离子来检测。扫描时间：2 – 10min或更长。如下图示例。



配制20, 100, 500, 1000ppm的DMS和100ppm内标d-DMS的系列混合溶液，进样得到质谱数据。这里的系列仅作为示例（当然也是实际数据），您可以根据自己的需要来建立合适的曲线范围。

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调用其中某一数据文件，先把default.m改为（另存）为其它名称，例如dms.m或别的名称。



点击OK

积分并点击峰得到质谱图。



Calibrate----Set up Quantitation…（不能AutoQuant Setup，因为目标化合物和其同位素内标物的保留时间一样，自动校正曲线建立无法进行）。



在calibrate title里面输入名称，例如DMS test。如果使用RTE积分，就在Use RTEINT前面打钩。如果使用ChemStation积分器，就去掉use RTEINT前面的√。这里用ChemStation积分器为例子，您可以根据个人的喜好选择自己常用的积分器。点Browse，选择events.e积分文件打开。



并输入浓度单位和内标量（根据实际量，后面内标量也是可以改的）。



Edit Compounds （编辑化合物）



点In sert Above, 放大色谱图，积分。先输入内标物的名称或代号，例如IS或d-DMS，在内标ISTD前面打勾。必须是先输入内标物，切记。



左右双键同时点击68离子及50离子，save



在色谱峰（与刚才内标物的位置稍微不同一点位置）上面点击，再输入DMS名称，左右双键同时点击62和47离子，和内标物的方法相同。



Save （可以看到色谱图什么有两个加号）, Exit



Exit

File has been quan titated. Quan titate now? 点击Y。



输入compouds Concentration （化合物浓度）, New Level ID（新级别号）里面输入级别号，例如20或其它代号。



Do up date （更新）

应助达人

确定



点OK，Cur rent chan ges will be saved, Pro ceed? 确定。

用下面方法添加别的浓度，即先调用数据文件，积分，calibrate----up date （图中1）



Up date one level（图中2）----OK----Y（图中3）----Do up date （图中4）, 下面和第一个的建立过程一样。其它浓度的点也是一样来加入更新。最后就可以得到下面的校正曲线了。







记住，方法必须再保持一次后退出，否则化合物列表可能会丢失。

应助达人

3 另外说一下多离子加和定量，比较简单（曾请教过别的网友），就是在Advanced菜单下面Q1，Q2, Q3前面选√。例如如果是选两个离子，就在Q1前面选√即可。

当然大家一般是选用单离子定量，这里只是一个示例而已，大家可以根据自己的需要确定选择一个或几个离子共同来定量。



4 样品测定

在同样条件下测定条件下测定样品。选则未知样的MS数据，先需要在Edit Compounds（编辑化合物）里面的identifacatin菜单的sample ISTD concentrating（样品内标加入量）中输入实际内标加入量。用Quantitate/Calculate即可得到含量报告。（比较简单，就不多罗嗦了）

应助达人

预留讨论。

内标法定量，介绍得很详细呢

应助达人

以目标物的同位素作为内标物在定性上更加有优势，可以以两者的分辩率作为一个定性观察因素，当在GC比GCMS上更好的定性确认作用。

原创很详细，峰型也漂亮。

哇很详细哦！