加根什么样的柱子避免样品峰与溶剂峰相连？

应助达人

至少加mixed-D以下的柱子。

楼主用DMF流动相，多少温度？压力多少？

温度50 压力8.82左右， 加根mixed-E还是单一孔径住呢？

应助达人

mixed-E最高到30万， 可以的，但我怕你和mixed-c混用后，在30万容易出现峰变形，最好用单一柱子比较好，也看你样品的分子量大概在什么位置。
单一孔径问题可能会更大。
压力有8.82有点大了哈，没办法，DMF粘度太大，已经50度了，用了PL-50就没办法升高温度了。若你再加根mixed-E压力都要超过10bar了。如果可以，建议还是用两根mixed-e的柱子吧。

单一孔径柱会有什么问题呀？我现在用加溴化锂的流动相配置样品，似乎可以很大程度上解决样品峰与溶剂峰相连的问题。

是的，之前是7.8左右，这次是刚换的保护柱还没做样，压力就这么大>但经常是做了几十个样品，我们用跟踪的单标样品的PDI就会变大，然后排查后就会发现是保护柱的问题，其实压力根本没有变大，所以我们现在经常是做几十个样品就要更换保护柱，费用很大，请问您遇到这样的问题吗？怎么解决的呢？

应助达人

那就是你流动相中的溶剂峰的影响，用流动相来溶解样品是最好的解决办法。若能分离开就好，虽然mixed-C线性分子量范围是200-2000000，若你样品中分子量有很大的，用这个柱子是很好用的，若分子就在几万的话， 用mixed-d就会更好，范围是200-400000，若分子量更小就选择mixed-E，最高300000。

应助达人

说明你样品很容易污染柱子，过滤样品会好很多。

PL mixed-E 是30k吧，300k那不是和mixed-D差不多了？

请问你测试的样品和流动相是极性的吗，溴化锂添加的浓度是多少？