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高效液相色谱双波长检测的优势

houjjun

2013/12/15

中药/天然药检测

高效液相色谱双波长检测的优势

下面我们就重点介绍下样品中多种化合物检测（最佳检测波长不一样）波长选择的问题（其它色谱条件必须一样）。
每种化合物单独检测波长选择肯定是没问题的，选择最佳检测波长一般来说是最好的。
样品中多种化合物同时检测，每种化合物的最佳检测波长往往是不一样的，选择检测波长一般有两种方法。一是选择一个能兼顾每种化合物的检测波长；另一种方法是采用多波长检测。
下面就以具体的检测为例来介绍。

首先介绍下检测具有解肌清热、止泄止痢之功效的葛根芩连微丸中葛根素和黄芩苷。

葛根素检测

色谱条件
检测器：紫外检测器
检测波长：254 nm
色谱柱：Pgrandsil STC C18（250 X 4.6mm，5um）
流动相：甲醇：水（含0.2％磷酸）
流速：1.0mL/min
柱温：30℃
进样量：10ul
梯度洗脱
10ug/ml葛根素标准品色谱图：

黄芩苷检测

色谱条件
检测波长：315 nm
其它色谱条件不变
10ug/ml黄芩苷标准品色谱图：

精
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吕梁山

第1楼2013/12/15

有PDA检测器就足够了，可以提取紫外范围内的任意波长

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houjjun

第2楼2013/12/15

PDA检测器这方面是好，但它有一个不如紫外的特点，它的灵敏度没有紫外的高，而且现在由于买的少，价格也较高
吕梁山(shih20j07) 发表:有PDA检测器就足够了，可以提取紫外范围内的任意波长

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吕梁山

第3楼2013/12/16

也只是低半个数量级，一般的检测实际上区别不大
houjjun(houjjun) 发表: PDA检测器这方面是好，但它有一个不如紫外的特点，它的灵敏度没有紫外的高，而且现在由于买的少，价格也较高

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土老冒豆豆

第4楼2013/12/16

应助达人

假如没有PDA检测器，只是紫外检测器，那么液相有实现这种不同时间切换不同波长的程序控制功能吗？如果没有，就只好如楼主所说的，一个混合样品溶液在这个波长里进一针，在那个波长里进一针，就比较费事了。

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xiaoxu

第5楼2013/12/16

好是好但并不是每个实验室都能实现
吕梁山(shih20j07) 发表:有PDA检测器就足够了，可以提取紫外范围内的任意波长

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xiaoxu

第6楼2013/12/16

灵敏度个人感觉完全够用
吕梁山(shih20j07) 发表:也只是低半个数量级，一般的检测实际上区别不大

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孟

第7楼2013/12/16

这个是针对标准品，假如样品呢？？比如，葛根素和黄芩苷样品，样品中葛根素选择245nm，但是，假如在315nm的时候，样品中的某些杂质刚刚好在黄芩苷出峰时间的一样的峰，结果会不会影响？？是不是需要做一个方法验证。

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houjjun

第8楼2013/12/16

现在的紫外检测器大多多有时间波长功能，只有一小部分没有。多通道检测的紫外现在还不多
土老冒豆豆(土老冒豆豆) 发表:假如没有PDA检测器，只是紫外检测器，那么液相有实现这种不同时间切换不同波长的程序控制功能吗？如果没有，就只好如楼主所说的，一个混合样品溶液在这个波长里进一针，在那个波长里进一针，就比较费事了。

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houjjun

第9楼2013/12/16

那主要是不是价格高的问题了，并且PDA检测器国产的还没有或是性能还不行
xiaoxu(xufangdan) 发表:灵敏度个人感觉完全够用

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xiaoxu

第10楼2013/12/17

这个就有难度了
孟(xmyichenrhm) 发表:这个是针对标准品，假如样品呢？？比如，葛根素和黄芩苷样品，样品中葛根素选择245nm，但是，假如在315nm的时候，样品中的某些杂质刚刚好在黄芩苷出峰时间的一样的峰，结果会不会影响？？是不是需要做一个方法验证。

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